本文關鍵詞：不同劑量的雌激素對大鼠子宮內膜損傷后修復的影響

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【摘要】：目的宮腔粘連(Intrauterine adhesion,IUA)是已成為育齡女性繼發(fā)不孕常見原因之一。目前對于IUA的形成機制仍不清楚,且尚無有效的治療手段。宮腔操作術后特別是刮宮術后預防IUA的發(fā)生具有重要意義,預防IUA及IUA術后再發(fā)生成為學界的研究熱點。雖然雌激素相關制劑在人工流產術后干預被普遍應用,但是其對預防IUA形成的效果以及使用劑量等仍存在爭議。本課題小組前期已成功建立穩(wěn)定的大鼠宮腔粘連動物模型,為研究提供良好的平臺。本研究期望在此動物實驗模型基礎上,采用芳香化酶抑制劑(來曲唑)阻斷體內雌激素的合成,在消除內源性雌激素的基礎上,添加不同劑量的外源性雌激素,對雌激素預防宮腔粘連形成的效應方面進行初步研究,包括雌激素干預后對7天的近期組織效應觀察,以及對受精卵著床后的遠期內膜容受性的功能效應觀察。方法(1)不同劑量的雌激素干預大鼠宮腔粘連的近期效應觀察:通過常規(guī)陰道涂片選擇動情期Wistar大鼠,隨機分為5組。除正常對照組(Control組,C組)外,余4組均采用自制微型刮勺模擬機械刮宮術,且均為左側子宮損傷處理,右側不予處理。根據(jù)不同觀察需求,余4組分為損傷組(Damage組,D組)、損傷+來曲唑組(Damage+Letrozole組,DL組)、損傷+來曲唑+10μg雌激素組(Damage+Letrozole+10μg E2組,DL-10組)、損傷+來曲唑+100μg雌激素組(Damage+Letrozole+100μg E2組,DL-100組)。于術前,術后3天、5天以及處死前收集各組大鼠血清待測。所有大鼠于術后7天下午四時斷頸處死,立即取材,收集子宮標本。常規(guī)石蠟包埋切片后HE染色、及免疫組化檢測組織修復相關因子在子宮內膜中的表達。(2)不同劑量的雌激素預防大鼠宮腔粘連的遠期效應觀察:將動情期Wistar大鼠隨機分為4組,分別為正常對照組(Control組,C組)、損傷組(Damage組,D組)、損傷+10μg雌激素組(Damage+10μg E2組,D-10組)、損傷+100μg雌激素組(Damage+100μg E2組,D-100組)。損傷及雌激素干預同前。在雌激素干預后21天予雌雄鼠交配,于孕5.5天及孕7天處死后取材。常規(guī)石蠟包埋切片后行HE染色及免疫組化檢測容受相關在子宮內膜中的表達。結果(1)本實驗在大鼠宮腔粘連模型基礎上,使用芳香化酶抑制劑和外源性雌激素添加對模型進行干預。從HE組織形態(tài)染色及粘連相關因子、血管生成相關因子、炎性相關因子、增殖細胞等方面觀察,隨著體內雌激素水平的升高,子宮內膜纖維化面積有所縮小,有統(tǒng)計學差異(P.05)。但在高雌激素環(huán)境下,大鼠子宮內膜腺上皮呈現(xiàn)不同程度的鱗狀上皮化生。(2)大鼠子宮內膜損傷給予不同劑量的雌激素干預后對內膜容受的效應觀察,C組和D-10組雌激素組腺體豐富,實質細胞多,D組和D-100組腺體數(shù)目明顯減少,實質細胞減少。損傷各組與C組比較,內膜αvβ3、LIF表達量顯著下降(P.05);D-10組與D組、D-100組比較,αvβ3、LIF表達量顯著增多(P.05);D組與D-100組比較,αvβ3表達量相當(P.05),而LIF表達量下降(P.05)。與C組及各組自身對照側比較,損傷各組損傷側著床點個數(shù)顯著減少(P.05);損傷各組間比較,D-10組著床個數(shù)較D組、D-100組稍增多,D-100組與D組比較,著床個數(shù)略增加,均無顯著性差異。結論(1)提示雌激素可在一定程度預防子宮腔粘連,降低內膜纖維化的發(fā)生率,但是高雌激素的使用會帶來高風險及副作用;(2)雌激素干預可在一定程度上促進子宮內膜修復,改善子宮內膜容受功能,其中10μg劑量(相當于大鼠生理劑量)效果最佳,大劑量的雌激素可能導致子宮內膜容受性的下降。
【關鍵詞】：子宮內膜 機械損傷 宮腔粘連和(或)纖維化 雌二醇 大鼠
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R711.74
【目錄】：

• 英文縮略詞表(ABBREVIATIONS)6-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 第1章 不同劑量的雌激素對大鼠子宮內膜損傷修復的近期影響12-40
• 1 引言12-14
• 2 材料與方法14-22
• 2.1 實驗動物14
• 2.2 試劑及配制14-16
• 2.3 實驗方法16-21
• 2.4 統(tǒng)計學處理21-22
• 3 結果22-35
• 3.1 大鼠子宮模擬刮宮術后大體形態(tài)學觀察結果22
• 3.2 各實驗組常規(guī)HE染色結果22-23
• 3.3 各組大鼠血清雌二醇、孕酮水平結果23-25
• 3.4 細胞因子在各組大鼠子宮內膜中的表達結果25-35
• 4 討論35-40
• 第2章 不同劑量的雌激素對大鼠子宮內膜損傷修復的遠期影響40-50
• 1 引言40-41
• 2 材料與方法41-43
• 2.1 實驗動物41
• 2.2 試劑及配制41
• 2.3 實驗方法41-43
• 3 結果43-47
• 3.1 孕 5.5 D子宮內膜組織HE染色結果43
• 3.2 孕 5.5 D血清雌二醇、孕酮水平結果比較43-44
• 3.3 子宮內膜組織免疫組化染色結果44-46
• 3.4 孕 7 D胚胎著床點情況46-47
• 4 討論47-50
• 第3章 結論50-51
• 結論50
• 創(chuàng)新之處50
• 不足及下一步實驗50-51
• 參考文獻51-57
• 附錄57-58
• 本人簡歷57
• 在校期間研究成果目錄57-58
• 致謝58-59
• 綜述59-69
• 參考文獻65-69

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本文編號：1068961