本文關(guān)鍵詞：不同劑量的雌激素對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜損傷后修復(fù)的影響

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【摘要】：目的宮腔粘連(Intrauterine adhesion,IUA)是已成為育齡女性繼發(fā)不孕常見原因之一。目前對(duì)于IUA的形成機(jī)制仍不清楚,且尚無有效的治療手段。宮腔操作術(shù)后特別是刮宮術(shù)后預(yù)防IUA的發(fā)生具有重要意義,預(yù)防IUA及IUA術(shù)后再發(fā)生成為學(xué)界的研究熱點(diǎn)。雖然雌激素相關(guān)制劑在人工流產(chǎn)術(shù)后干預(yù)被普遍應(yīng)用,但是其對(duì)預(yù)防IUA形成的效果以及使用劑量等仍存在爭(zhēng)議。本課題小組前期已成功建立穩(wěn)定的大鼠宮腔粘連動(dòng)物模型,為研究提供良好的平臺(tái)。本研究期望在此動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ突A(chǔ)上,采用芳香化酶抑制劑(來曲唑)阻斷體內(nèi)雌激素的合成,在消除內(nèi)源性雌激素的基礎(chǔ)上,添加不同劑量的外源性雌激素,對(duì)雌激素預(yù)防宮腔粘連形成的效應(yīng)方面進(jìn)行初步研究,包括雌激素干預(yù)后對(duì)7天的近期組織效應(yīng)觀察,以及對(duì)受精卵著床后的遠(yuǎn)期內(nèi)膜容受性的功能效應(yīng)觀察。方法(1)不同劑量的雌激素干預(yù)大鼠宮腔粘連的近期效應(yīng)觀察:通過常規(guī)陰道涂片選擇動(dòng)情期Wistar大鼠,隨機(jī)分為5組。除正常對(duì)照組(Control組,C組)外,余4組均采用自制微型刮勺模擬機(jī)械刮宮術(shù),且均為左側(cè)子宮損傷處理,右側(cè)不予處理。根據(jù)不同觀察需求,余4組分為損傷組(Damage組,D組)、損傷+來曲唑組(Damage+Letrozole組,DL組)、損傷+來曲唑+10μg雌激素組(Damage+Letrozole+10μg E2組,DL-10組)、損傷+來曲唑+100μg雌激素組(Damage+Letrozole+100μg E2組,DL-100組)。于術(shù)前,術(shù)后3天、5天以及處死前收集各組大鼠血清待測(cè)。所有大鼠于術(shù)后7天下午四時(shí)斷頸處死,立即取材,收集子宮標(biāo)本。常規(guī)石蠟包埋切片后HE染色、及免疫組化檢測(cè)組織修復(fù)相關(guān)因子在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)。(2)不同劑量的雌激素預(yù)防大鼠宮腔粘連的遠(yuǎn)期效應(yīng)觀察:將動(dòng)情期Wistar大鼠隨機(jī)分為4組,分別為正常對(duì)照組(Control組,C組)、損傷組(Damage組,D組)、損傷+10μg雌激素組(Damage+10μg E2組,D-10組)、損傷+100μg雌激素組(Damage+100μg E2組,D-100組)。損傷及雌激素干預(yù)同前。在雌激素干預(yù)后21天予雌雄鼠交配,于孕5.5天及孕7天處死后取材。常規(guī)石蠟包埋切片后行HE染色及免疫組化檢測(cè)容受相關(guān)在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)。結(jié)果(1)本實(shí)驗(yàn)在大鼠宮腔粘連模型基礎(chǔ)上,使用芳香化酶抑制劑和外源性雌激素添加對(duì)模型進(jìn)行干預(yù)。從HE組織形態(tài)染色及粘連相關(guān)因子、血管生成相關(guān)因子、炎性相關(guān)因子、增殖細(xì)胞等方面觀察,隨著體內(nèi)雌激素水平的升高,子宮內(nèi)膜纖維化面積有所縮小,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P.05)。但在高雌激素環(huán)境下,大鼠子宮內(nèi)膜腺上皮呈現(xiàn)不同程度的鱗狀上皮化生。(2)大鼠子宮內(nèi)膜損傷給予不同劑量的雌激素干預(yù)后對(duì)內(nèi)膜容受的效應(yīng)觀察,C組和D-10組雌激素組腺體豐富,實(shí)質(zhì)細(xì)胞多,D組和D-100組腺體數(shù)目明顯減少,實(shí)質(zhì)細(xì)胞減少。損傷各組與C組比較,內(nèi)膜αvβ3、LIF表達(dá)量顯著下降(P.05);D-10組與D組、D-100組比較,αvβ3、LIF表達(dá)量顯著增多(P.05);D組與D-100組比較,αvβ3表達(dá)量相當(dāng)(P.05),而LIF表達(dá)量下降(P.05)。與C組及各組自身對(duì)照側(cè)比較,損傷各組損傷側(cè)著床點(diǎn)個(gè)數(shù)顯著減少(P.05);損傷各組間比較,D-10組著床個(gè)數(shù)較D組、D-100組稍增多,D-100組與D組比較,著床個(gè)數(shù)略增加,均無顯著性差異。結(jié)論(1)提示雌激素可在一定程度預(yù)防子宮腔粘連,降低內(nèi)膜纖維化的發(fā)生率,但是高雌激素的使用會(huì)帶來高風(fēng)險(xiǎn)及副作用;(2)雌激素干預(yù)可在一定程度上促進(jìn)子宮內(nèi)膜修復(fù),改善子宮內(nèi)膜容受功能,其中10μg劑量(相當(dāng)于大鼠生理劑量)效果最佳,大劑量的雌激素可能導(dǎo)致子宮內(nèi)膜容受性的下降。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜 機(jī)械損傷 宮腔粘連和(或)纖維化 雌二醇 大鼠
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R711.74
【目錄】：

• 英文縮略詞表(ABBREVIATIONS)6-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 第1章 不同劑量的雌激素對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)的近期影響12-40
• 1 引言12-14
• 2 材料與方法14-22
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 2.2 試劑及配制14-16
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-22
• 3 結(jié)果22-35
• 3.1 大鼠子宮模擬刮宮術(shù)后大體形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果22
• 3.2 各實(shí)驗(yàn)組常規(guī)HE染色結(jié)果22-23
• 3.3 各組大鼠血清雌二醇、孕酮水平結(jié)果23-25
• 3.4 細(xì)胞因子在各組大鼠子宮內(nèi)膜中的表達(dá)結(jié)果25-35
• 4 討論35-40
• 第2章 不同劑量的雌激素對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)的遠(yuǎn)期影響40-50
• 1 引言40-41
• 2 材料與方法41-43
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物41
• 2.2 試劑及配制41
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法41-43
• 3 結(jié)果43-47
• 3.1 孕 5.5 D子宮內(nèi)膜組織HE染色結(jié)果43
• 3.2 孕 5.5 D血清雌二醇、孕酮水平結(jié)果比較43-44
• 3.3 子宮內(nèi)膜組織免疫組化染色結(jié)果44-46
• 3.4 孕 7 D胚胎著床點(diǎn)情況46-47
• 4 討論47-50
• 第3章 結(jié)論50-51
• 結(jié)論50
• 創(chuàng)新之處50
• 不足及下一步實(shí)驗(yàn)50-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 附錄57-58
• 本人簡(jiǎn)歷57
• 在校期間研究成果目錄57-58
• 致謝58-59
• 綜述59-69
• 參考文獻(xiàn)65-69

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本文編號(hào)：1068961