本文關(guān)鍵詞：miR-200a，miR-200b和上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中的研究

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【摘要】：目的本研究旨在探討卵巢子宮內(nèi)膜異位癥是否發(fā)生了上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象,以及miR-200家族重要成員miR-200a,miR-200b在內(nèi)異癥中的表達情況及與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系,意義在于從分子水平上進一步闡明內(nèi)異癥侵襲轉(zhuǎn)移的機制。方法1.標(biāo)本采集病例組:2014.5-2014.7在天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院就診并行手術(shù)治療的卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者的異位內(nèi)膜及其在位內(nèi)膜組織各80例,患者的平均年齡為36.74±7.56歲,術(shù)后病理診斷全部是子宮內(nèi)膜異位癥。根據(jù)1997年美國生育學(xué)會修正的子宮內(nèi)膜異位癥分期標(biāo)準(zhǔn)(r-ASRM)進行分期,I-II期21例,III期30例,IV期29例。對照組:收集在同一家醫(yī)院同期因卵巢單純性囊腫行手術(shù)患者的子宮內(nèi)膜組織43例,患者的平均年齡為38.57±5.02歲,均經(jīng)病理證實是正常子宮內(nèi)膜組織,所有的宮腔內(nèi)膜均處于分泌期。所有患者均月經(jīng)周期正常,近六個月未接受過性激素治療,并且未經(jīng)過內(nèi)異癥藥物治療,無其他內(nèi)外科疾病,無惡性腫瘤史。2.方法2.1病例組與對照組標(biāo)本離體后,即刻放入凍存管中,保存于液氮罐中,存以備用。2.2 RNA和蛋白提取:將病例組與對照組標(biāo)本各取出50-100mg,在液氮中研磨,提取組織RNA和蛋白。2.3采用RT-PCR方法檢測miR-200a、miR-200b在各組織中的表達情況。2.4采用Western blot方法檢測EMT相關(guān)蛋白ZEB1、ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、Snail和Slug蛋白在各組織中的表達情況。2.5數(shù)據(jù)分析:實驗數(shù)據(jù)用SPSS軟件分析結(jié)果1.病例組與對照組中miR-200a,miR-200b的表達情況在不同內(nèi)膜組織中,miR-200a,miR-200b均有不同程度的表達。與正常子宮內(nèi)膜組織相比,在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中的表達水平明顯降低,且異位內(nèi)膜中表達水平較在位內(nèi)膜組織下調(diào)。2.病例組與對照組中EMT相關(guān)蛋白的表達情況在不同內(nèi)膜組織中,ZEB1,ZEB2,N-cadherin,Snail,Slug,E-cadherin均有不同程度的表達。與正常內(nèi)膜組織相比,在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜中的E-cadherin表達水平明顯降低,且異位內(nèi)膜中E-cadherin表達水平明顯低于在位內(nèi)膜。相反,與正常內(nèi)膜組織相比,在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜中ZEB1/2,N-cadherin,Snail,Slug表達量明顯升高,且異位內(nèi)膜中的表達水平明顯高于在位內(nèi)膜組織。3.miR-200a,mi R-200b的表達量與E-cadherin,ZEB1/2表達量的相關(guān)性分析經(jīng)Pearson Correlation Coefficients檢驗方法統(tǒng)計,miR-200a,miR-200b的表達量和其對應(yīng)組織中的E-cadherin的表達呈顯著的正相關(guān),與ZEB1/2的表達量呈顯著的負相關(guān)。4.miR-200a,mi R-200b與內(nèi)異癥rASRM分期及評分的關(guān)系病例組異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜中miR-200a,miR-200b與內(nèi)異癥rASRM分期及評分無顯著性相關(guān)。結(jié)論1內(nèi)異癥在位及異位內(nèi)膜中miR-200a/b表達下調(diào),而ZEB1/2的表達增加,提示它們可能參與了內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展過程。2 miR-200a/b在內(nèi)異癥中的表達與ZEB1/2的表達之間存在明顯相關(guān)性,在miR-200a/b表達上調(diào)時,會出現(xiàn)ZEB1/2的低表達,提示ZEB1/2可能是miR-200a/b的靶基因,它們共同參與了內(nèi)異癥的EMT過程。3內(nèi)異癥在位內(nèi)膜中miR-200a/b表達較正常內(nèi)膜明顯下調(diào),進一步證實了在位內(nèi)膜決定論,通過檢測和靶向改變在位內(nèi)膜中mi R-200a/b的表達有助于內(nèi)異癥的診斷和治療。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜異位癥 子宮內(nèi)膜 microRNA-200 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 ZEB1/2
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.71
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 對象與方法13-24
• 1 試驗儀器與設(shè)備13
• 2 主要耗材13
• 3 主要試劑與配制13-17
• 4 研究對象17
• 5 實驗方法17-22
• 6 統(tǒng)計學(xué)分析22-24
• 結(jié)果24-36
• 1 miR-200a, miR-200b在各組織中的表達24-28
• 2 E-cadherin、N-cadherin、ZEBs、Snail、Slug在不同內(nèi)膜組織中的表達28-32
• 3 miR-200a，miR-200b的表達量與E-cadherin，ZEB1/2 表達量的相關(guān)性分析32-34
• 4 miR-200a、miR-200b與內(nèi)異癥rASRM分期及評分的關(guān)系34-36
• 討論36-43
• 1 子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機制36
• 2 微小RNA-200家族36-37
• 3 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化37-40
• 4 miR-200a、miR-200b與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系40-41
• 5 局限性及展望41-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-49
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明49-50
• 綜述 miRNA-200家族與婦科腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究進展50-62
• 綜述參考文獻57-62
• 致謝62-63

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6 王建華,周馥貞,董e，

本文編號：1053962