本文關(guān)鍵詞：不同輔助孵化方式對(duì)小鼠囊胚孵化率的影響

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【摘要】：輔助孵化(Assisted Hatching, AH)是一種能夠幫助胚胎從透明帶中孵出的技術(shù)。體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)過程中的著床率低下現(xiàn)象,一直是困擾人們的問題。臨床上,運(yùn)用AH技術(shù)能夠有效提高囊胚孵化率以及胚胎著床率。目前,人工輔助孵化的方法主要有機(jī)械法、化學(xué)法、酶消化法、激光法以及壓電脈沖(piezo)顯微操作法。AH的具體操作方法包括對(duì)卵母細(xì)胞的透明帶進(jìn)行打孔或削薄等方法,進(jìn)行輔助孵化處理時(shí)所選擇的胚胎發(fā)育時(shí)期也各不相同。然而,究竟哪種AH方法最有效,選擇哪一發(fā)育時(shí)期的胚胎進(jìn)行AH操作能夠得到最理想的效果,還沒有具體研究。本實(shí)驗(yàn)利用piezo顯微操作法,針對(duì)小鼠成熟卵母細(xì)胞及著床前各時(shí)期胚胎進(jìn)行不同方式的AH處理,統(tǒng)計(jì)各種方法處理后胚胎的發(fā)育率和囊胚的孵化率,以探明最佳的AH處理方式。本研究采用的AH方法分別為：(1)透明帶打小孔(small hole, SH),開孔長(zhǎng)度約為10μm；(2)透明帶打大孔(large hole, LH),開孔長(zhǎng)度約為50μm；(3)透明帶削薄小區(qū)域(small length thinner, ST),削薄區(qū)域直徑約為50μm；(4)透明帶削薄大區(qū)域(large length thinner, LT),削薄區(qū)域直徑約為120μm。選擇不同發(fā)育時(shí)期的卵母細(xì)胞或胚胎分別進(jìn)行AH處理,各時(shí)期分別為：(1)MⅡ期卵母細(xì)胞；(2)IVF體外培養(yǎng)得到的2-cell胚胎；(3)IVF體外培養(yǎng)得到的4-cell胚胎；(4)IVF體外培養(yǎng)得到的桑椹期胚胎。我們的研究結(jié)果表明：不同AH方法中,SH處理后囊胚孵化率較高,且多數(shù)胚胎為不完全孵出；LT處理后胚胎完全孵化率較高。我們的結(jié)果還表明在桑椹胚期進(jìn)行AH處理效果最好。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論為：利用piezo對(duì)小鼠著床前胚胎進(jìn)行輔助孵化處理,在桑椹胚期進(jìn)行SH處理可以獲得最高的囊胚孵化率。該研究將為臨床上人類胚胎的輔助孵化技術(shù)提供基本依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：輔助孵化 piezo 透明帶打孔 透明帶削薄
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 縮略詞表11-12
• 第一章 實(shí)驗(yàn)研究12-45
• 1.1 引言12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13-14
• 1.2.2 主要設(shè)備14
• 1.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法14-18
• 1.3.1 卵母細(xì)胞的采集14-15
• 1.3.2 孤雌激活和體外受精15
• 1.3.3 AH處理15-17
• 1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析17-18
• 1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析18-37
• 1.4.1 相同的胚胎時(shí)期進(jìn)行不同的AH方式18-27
• 1.4.2 不同的胚胎時(shí)期進(jìn)行相同的AH方式27-37
• 1.5 討論37-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 第二章 文獻(xiàn)綜述45-59
• 輔助孵化的研究進(jìn)展45
• 2.1 透明帶的結(jié)構(gòu)和功能45-46
• 2.2 囊胚孵化46
• 2.3 輔助孵化的機(jī)理46
• 2.4 AH的種類46-52
• 2.4.1 機(jī)械法47-49
• 2.4.2 機(jī)械性的擴(kuò)大透明帶49
• 2.4.3 化學(xué)法49-50
• 2.4.4 蛋白酶消化法50
• 2.4.5 激光法50
• 2.4.6 piezo顯微操作法50-52
• 2.5 AH適用對(duì)象52-53
• 2.6 AH作用的時(shí)間53
• 2.7 AH潛在的危險(xiǎn)53
• 2.8 展望53-55
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 附錄59-62
• 致謝62-64
• 攻讀學(xué)位期間已發(fā)表學(xué)術(shù)論文64

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 徐瑜;輔助孵化在IVF-ET中的應(yīng)用進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(計(jì)劃生育分冊(cè));2003年01期

2 劉吉;程?hào)|凱;李寶山;于洪君;孫曉玲;胡煜;宮立國(guó);;激光輔助孵化對(duì)凍融胚胎種植潛力的影響[J];中外醫(yī)療;2012年10期

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本文編號(hào)：1032718