本文關(guān)鍵詞：益生菌對(duì)輪狀病毒性腹瀉小鼠腸道屏障的影響及機(jī)制的探討

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【摘要】：目的：通過(guò)輪狀病毒(rotavirus，RV)感染新生小鼠，觀察益生菌對(duì)RV感染小鼠腸道粘膜的作用，探討益生菌對(duì)腸道粘膜屏障的影響及機(jī)制。 方法：用MA104細(xì)胞培養(yǎng)輪狀病毒株，并進(jìn)行蝕斑實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RV毒力。將80只昆明乳鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(20只)、模型組(30只)、益生菌組(30只)。益生菌組及模型組乳鼠禁食6小時(shí)后給予0.2ml(2×108PFU)的KU株輪狀病毒。病毒吸附24h后，益生菌組給予酪酸梭菌二聯(lián)活菌制劑108CFU/kg(0.1ml/只)灌服，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，對(duì)照組和模型組分別每天給予0.1ml生理鹽水灌胃。每天觀察乳鼠，記錄乳鼠的腹瀉只數(shù)及體重；分別于灌服益生菌后第1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d處死相應(yīng)組乳鼠3~4只。取小鼠小腸組織，用光鏡和電鏡觀察腸粘膜的病理變化；通過(guò)免疫組化方法(SABC法)檢測(cè)小腸粘膜中緊密連接蛋白ZO-1(zonula occludens-1)、Occludin的分布和表達(dá)；取頸部動(dòng)脈血液作TNF-α檢測(cè)；取小腸液體作sIgA檢測(cè)。提取小腸組織核蛋白，用ELISA法檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的含量。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：1.觀察期間，乳鼠腹瀉率及體重變化顯示，與正常對(duì)照組相比，模型組和益生菌組均出現(xiàn)腹瀉，，其中模型組在第3d腹瀉乳鼠率達(dá)到高峰，體重明顯下降(P0.05)；同時(shí)間點(diǎn)益生菌組與模型組比較，乳鼠腹瀉率下降，體重增長(zhǎng)。 2.腸粘膜病理改變的光鏡和電鏡觀察結(jié)果顯示，正常對(duì)照組腸粘膜絨毛形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，模型組腸粘膜上皮細(xì)胞空泡樣變、絨毛結(jié)構(gòu)紊亂；益生菌組腸粘膜病理改變較模型組明顯減輕。 3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，模型組和益生菌組ZO-1, Occludin表達(dá)明顯降低(P0.05)，第3d其值降到最低；益生菌組與模型組同時(shí)間點(diǎn)相比較，益生菌組的ZO-1、Occludin表達(dá)量顯著增加(P0.05)。 4..腸道內(nèi)sIgA結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，模型組和益生菌組sIgA有明顯減低(P0.05)，模型組在第3d其值降到最低，以后逐漸恢復(fù)。同時(shí)間點(diǎn)益生菌組與模型組比較，sIgA顯著增加(P0.05)。 5.對(duì)照組血清TNF-α、小腸組織NF-κB值一直處于較低水平，模型組與益生菌組血清TNF-α、NF-κB值均顯著升高(P0.05)，給藥后第2天出現(xiàn)明顯升高，第3天達(dá)到高峰，隨后緩慢降低；而同時(shí)間點(diǎn)的益生菌組TNF-α、NF-κB較模型組顯著降低(P0.05)。 結(jié)論：益生菌能夠改善輪狀病毒腹瀉乳鼠的腸黏膜的組織病理學(xué)變化，增加上皮細(xì)胞間緊密連接蛋白ZO-1和Occludin的表達(dá)分布；增加腸道sIgA的產(chǎn)生，減少炎癥因子TNF-α, NF-κB的產(chǎn)生，從而有利于保護(hù)腸道粘膜屏障，促進(jìn)粘膜屏障的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：益生菌 輪狀病毒 乳鼠 腸道粘膜屏障 sIgA
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-20
• 結(jié)果20-27
• 討論27-32
• 小結(jié)32-33
• 參考文獻(xiàn)33-43
• 綜述43-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 縮略詞對(duì)照表52-53
• 附錄53-54
• 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 楊蒙蒙;羅佳波;陳文;;止瀉退熱片治療輪狀病毒感染性腹瀉的實(shí)驗(yàn)研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2008年11期

2 鄧朝暉;許春娣;陳舜年;;新生小鼠輪狀病毒腹瀉模型建立及病理學(xué)致病機(jī)制研究[J];臨床兒科雜志;2008年10期

3 蔡寶珍,黃志華;微生態(tài)調(diào)節(jié)劑干預(yù)母乳性黃疸臨床觀察和機(jī)制探討[J];新生兒科雜志;2002年04期

本文編號(hào)：928976