本文關(guān)鍵詞：孕前及孕期母鼠高脂喂養(yǎng)對仔鼠生長的影響

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【摘要】：目的 1.通過給予母鼠高脂喂養(yǎng),觀察母鼠早期(孕前期及孕期)暴露于高脂環(huán)境對仔鼠生長的影響。 2.觀察高脂環(huán)境下新生仔鼠肝臟的脂肪沉積和IGF-I的分泌。 3.進(jìn)一步明確IGF-I受體后信號通路AKT1/PI3K、MAKP的變化。 方法 40只3周齡SD雌性大鼠分為兩組,高脂組(High fat,HF組)和對照組(Control,C組)。20只高脂組雌鼠喂養(yǎng)35%高脂飼料,20只對照雌鼠組及24只雄鼠普通維持飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)8周后,HF組和C組各取8只觀察母鼠肝臟病理,其余按雌雄比例1：1合籠交配,孕期3周。仔鼠出生后處死,分別進(jìn)行以下檢測：(1)新生仔鼠出生24小時內(nèi)測量體重及身長；(2)新生仔鼠斷頭取血,ALT、AST、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO)高密度脂蛋白(HDL)低密度脂蛋白(LDL)、血糖(GLU)采用全自動生化分析儀檢測。IGF-1采用酶聯(lián)免疫法檢測；(3)母鼠肝臟及新生仔鼠肝臟組織切片蘇木素-伊紅染色觀察肝臟病理形態(tài)；(4)免疫組織化EnVision法染色,顯示左下肢脛骨、股骨胰島素底物(IRS1)其磷酸化(Phospho-IRS1)的表達(dá)；(5)Western blot檢測新生仔鼠肝細(xì)胞中IGF-1的蛋白表達(dá)量及新生鼠左下肢長骨的PI3K/Phospho-PI3K AKT1/Phospho-AKT1、 MAKP/Phospho-MAKP蛋白表達(dá)量。 結(jié)果 高脂組產(chǎn)95只新生仔鼠,對照組產(chǎn)128只新生仔鼠,HF組出生體重較C組低[(6.11±1.17)g對比(6.75±0.81)g,P0.05],體長較C組短[(66.71±3.94)mm對比(76.9±3.76)mm,P0.05]； HF組新生仔鼠血清IGF-I較C組下降20.1%[(43.35±17.02)pg/ml對比(54.29±12.34)pg/m1,P0.05]；HF組新生仔鼠AST高于C組[(345.86±135.62)對比(225.89±47.64),P0.05],ALT、TG、CHO、HDL、LDL、GLU組間未見差異(P0.05)；肝臟組織病理學(xué)顯示,HF組母鼠及仔鼠肝臟都有明顯的脂質(zhì)沉積,肝細(xì)胞漿內(nèi)有較多小而密的脂質(zhì)沉積,肝胞漿呈透明的空泡狀；免疫組化結(jié)果顯示, HF組的IRS以及Phospho--IRS在脛骨軟骨細(xì)胞呈陽性表達(dá),積分光密度及平均光密度結(jié)果提示組間無明顯差異；HF組肝臟IGF-I蛋白表達(dá)量高于對照組[(1.45±0.33)對比(0.65±0.22),P0.05]。HF組長骨軟骨細(xì)胞MAPK表達(dá)高于C組[(1.13±0.12)對比(0.88±0.13),P0.05],而PI3K[(1.19±0.44)對比(0.83±0.26,P0.05)]、AKT1/Phospho-AKT1[(0.97±0.14對比1.18±0.44,PO.05)]與C組無差異,Phospho-PI3K、Phospho-MAPK受技術(shù)因素影響,未檢測到相應(yīng)蛋白條帶。 結(jié)論1.早期暴露于高脂環(huán)境使仔鼠出生時身長短、體重低,宮內(nèi)發(fā)育障礙。 2.高脂環(huán)境下,新生仔鼠肝臟脂質(zhì)沉積明顯,肝功能受損。血清IGF-I含量下降,但肝細(xì)胞IGF-I的蛋白表達(dá)量并未降低。 3.IGF-I的受體后信號通路PI3K、AKT1并未受損。且總的MAPK表達(dá)量顯示其信號通路增強(qiáng),IGF-I作用于軟骨細(xì)胞的效能并未降低。早期暴露于高脂環(huán)境引起新生仔鼠生長障礙的機(jī)制仍需進(jìn)一度探索。
【關(guān)鍵詞】：機(jī)制 母鼠 生長障礙 早期高脂喂養(yǎng) 仔鼠
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R723.14;R714.256
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮略詞對照表9-11
• 綜述一：早期暴露于高脂環(huán)境生長發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究11-20
• 1. 早期高脂飲食對體重的影響11-13
• 2. 早期高脂飲食對體長的影響13-14
• 3. 早期高脂飲食對性發(fā)育的影響14-15
• 4. 結(jié)語15-17
• 參考文獻(xiàn)17-20
• 綜述二：宮內(nèi)發(fā)育遲緩的研究進(jìn)展20-34
• 1. 母體營養(yǎng)狀況對妊娠的影響20-21
• 2. 環(huán)境對妊娠的影響21-23
• 2.1 飲食21-22
• 2.2 飲酒和吸煙22-23
• 2.3 空氣和食品污染23
• 2.4 社會因素23
• 3. 胎兒宮內(nèi)生長遲緩的遺傳易感性23-25
• 參考文獻(xiàn)25-34
• 綜述三：中醫(yī)藥對宮內(nèi)發(fā)育遲緩的認(rèn)識34-38
• 參考文獻(xiàn)36-38
• 實(shí)驗(yàn)一：孕前和孕期母鼠高脂喂養(yǎng)對仔鼠肝臟及生長的影響38-50
• 前言38
• 材料與方法38-42
• 1. 材料38-39
• 1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑38
• 1.2 主要儀器38-39
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動物39
• 2. 方法39-42
• 2.1 動物造模及分組39
• 2.2 體重及身長測量39-40
• 2.3 血清學(xué)檢測40
• 2.4 病理組織學(xué)及免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)40-41
• 2.5 Western blot提取蛋白41-42
• 2.6 統(tǒng)計學(xué)分析42
• 結(jié)果42-46
• 1. 雌鼠體重改變42-43
• 2. 各組新生仔鼠出生體重及體長43
• 3. 各組新生仔鼠血清IGF-I水平43
• 4. 雌鼠血清肝功能及血脂43-44
• 5. 各組新生仔鼠血清肝功能及血脂44
• 6. 肝臟組織病理形態(tài)44-45
• 7. Western Blot檢測結(jié)果45-46
• 討論46-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 實(shí)驗(yàn)二：孕前及孕期母鼠高脂喂養(yǎng)對新生仔鼠骨骼的影響50-61
• 前言50
• 材料與方法50-54
• 1. 材料50-52
• 1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑50-51
• 1.2 主要儀器51
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動物51-52
• 2. 方法52-54
• 2.1 動物造模及分組52
• 2.2 免疫組織化學(xué)法檢測52-53
• 2.3 Western blot提取蛋白53-54
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)分析54
• 結(jié)果54-57
• 1. 兩組間仔鼠軟骨細(xì)胞的IRS-1、Phospho-IRS1表達(dá)比較54-55
• 2. 兩組間仔鼠軟骨細(xì)胞的Phospho-IRS1表達(dá)比較55-56
• 3. 兩組間PI3K、AKT1/Phospho-AKT1、MAPK的表達(dá)比較56-57
• 討論57-59
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 致謝61-62
• 個人簡歷62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：893084