本文關(guān)鍵詞：S100A12在新生大鼠膿毒血癥中的表達(dá)及意義

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【摘要】：目的：S100A12是小分子鈣結(jié)合蛋白，被認(rèn)為在感染性疾病中發(fā)揮重要的生物學(xué)作用。本課題擬通過(guò)建立新生大鼠膿毒血癥模型，觀察血清中S100A12蛋白在膿毒血癥中的動(dòng)態(tài)變化水平，分析肝臟組織中S100A12與促炎因子晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（Receptor for advanced glycation end-products，RAGE）、核轉(zhuǎn)錄因子-κB（Nucleartranscription factor kappa B，NF-κB）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）mRNA之間的關(guān)系，探討S100A12在新生大鼠膿毒血癥發(fā)病機(jī)制中的作用，從而為膿毒血癥的早期診斷提供方向。 方法：選用7日齡新生Sprague-Dawley（SD）大鼠，隨機(jī)分為兩組，即膿毒血癥實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組。采用腹腔注射脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）建立膿毒血癥模型組，對(duì)照組經(jīng)腹腔注射相同容積的生理鹽水。兩組動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)后2h、4h、8h、16h、24h、48h分為6個(gè)亞組，戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，心臟采血（約1.5ml），取血清，留取肝臟組織，-80℃保存。采用ELISA法檢測(cè)血清S100A12的蛋白水平。采用RT-PCR測(cè)定肝臟組織中S100A12、RAGE、NF-κB及TNF-α、IL-6mRNA的相對(duì)表達(dá)量。肝臟標(biāo)本HE染色，進(jìn)行病理學(xué)觀察和評(píng)分。 結(jié)果：1.血清S100A12檢測(cè)結(jié)果：大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清S100A12水平實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組顯著升高（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組相鄰兩亞組間比較存在明顯差異（P＜0.05）。血清S100A12于2h迅速升高，，12h達(dá)到高峰，48h仍維持較高水平。 2.肝臟病理組織觀察及評(píng)分：實(shí)驗(yàn)組大鼠24h、48h可見(jiàn)肝細(xì)胞廣泛變性、壞死，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。肝臟病理組織評(píng)分實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），2h（Median：1Vs0）、4h、8h（Median：2Vs0）、12h、48h（Median：3Vs0）、24h（Median：4Vs0），實(shí)驗(yàn)組病理評(píng)分2h開(kāi)始升高，24h達(dá)最高值。 3.實(shí)驗(yàn)組大鼠血清S100A12與肝臟病理學(xué)評(píng)分呈正相關(guān)（rs=0.659，P＜0.01）。 4.肝臟促炎因子mRNA檢測(cè)結(jié)果：1）與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟組織S100A12、REGE、NF-κB p65及TNF-α、IL-6mRNA水平均呈現(xiàn)高表達(dá)；2）大鼠肝臟S100A12mRNA水平實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組相鄰兩亞組間存在明顯差異（P＜0.05）。S100A12基因于2h迅速升高，8h達(dá)到高峰，直至48h仍保持高表達(dá)；3）肝臟S100A12基因水平與血清S100A12蛋白水平呈正相關(guān)（r=0.599，P＜0.05）；4）兩組大鼠肝臟RAGEmRNA水平，2h、4h無(wú)明顯差異（P＞0.05），其余時(shí)間點(diǎn)存在顯著差異。實(shí)驗(yàn)組8h Vs4h，12h Vs8h，24h Vs12h，48hVs24h亞組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。RAGE基因水平4h內(nèi)表達(dá)不明顯，至8h緩慢升高，12h達(dá)到峰值，至48h仍高于對(duì)照組；5）兩組大鼠肝臟NF-κB p65mRNA水平，48h無(wú)明顯差異（P＞0.05），其余時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組相鄰兩亞組間存在明顯差異（P＜0.05）。NF-κB基因于2h開(kāi)始升高，4h明顯升高，至8h達(dá)最高峰，48h基本降至正常；6）大鼠肝臟TNF-α mRNA水平實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組相鄰兩亞組間比較，存在明顯差異（P＜0.05）。TNF-a基因于2h迅速升高，8h達(dá)到高峰，48h仍稍高于對(duì)照組；7）兩組大鼠肝臟IL-6mRNA水平，2h無(wú)明顯差異（P＞0.05），其余時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組相鄰兩亞組間存在明顯差異（P＜0.05）。IL-6基因于4h開(kāi)始升高，至24h出現(xiàn)高峰，48h表達(dá)仍高于對(duì)照組；8）肝組織S100A12mRNA與促炎因子mRNA之間呈正相關(guān)：S100A12/RAGE（rs=0.511, P＜0.01）、S100A12/NF-κB（rs=0.468, P＜0.01）、S100A12/TNF-α（rs=0.881, P＜0.01）、S100A12/IL-6（rs=0.521, P＜0.01）。 結(jié)論：1.LPS誘導(dǎo)的新生大鼠膿毒血癥過(guò)程中，隨著病情進(jìn)展，肝臟組織病理?yè)p傷逐漸加重，引起S100A12、RAGE、NF-κB、TNF-α及IL-6促炎因子基因表達(dá)的增加，表明促炎因子的過(guò)度表達(dá)是造成膿毒血癥的重要原因。 2.實(shí)驗(yàn)組新生大鼠血清S100A12蛋白水平和肝臟組織S100A12基因水平的變化趨勢(shì)一致，提示S100A12可能在機(jī)體促炎反應(yīng)中起到重要的作用。 3.實(shí)驗(yàn)組大鼠血清S100A12與肝臟損傷程度呈正相關(guān)，肝臟組織S100A12mRNA與促炎因子RAGE、NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA呈正相關(guān)，提示血清S100A12可能與促炎因子產(chǎn)生協(xié)同作用，可能成為膿毒血癥早期診斷的生物學(xué)標(biāo)記物。
【關(guān)鍵詞】：新生大鼠 膿毒血癥 S100A12 RAGE NF-κB TNF-α IL-6
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R720.597
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)材料和方法12-22
• 結(jié)果22-29
• 討論29-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 附圖40-41
• 綜述41-54
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 中英文對(duì)照縮略詞表54-56
• 致謝56-57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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本文編號(hào)：766926