發(fā)布時(shí)間：2017-07-01 01:01

  本文關(guān)鍵詞：超極化激活電流對(duì)新生大鼠海馬缺氧缺血性神經(jīng)損傷的保護(hù)作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:運(yùn)用免疫組化和全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察超極化激活的環(huán)核苷酸門控(HCN)通道在海馬CA1區(qū)的分布,研究缺氧缺血前后Ih的變化以及HCN通道阻斷劑對(duì)缺氧缺血后神經(jīng)元的作用,為治療新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)尋找新靶點(diǎn)提供理論基礎(chǔ)。方法:1.免疫組化染色選取新生SD大鼠,對(duì)海馬HCN通道1-4亞型進(jìn)行免疫組化染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察HCN通道在海馬CA1區(qū)及椎體神經(jīng)元上的分布情況。對(duì)急性分離的腦片進(jìn)行To-pro-3染色以標(biāo)記死亡的神經(jīng)元數(shù)目,觀察缺氧缺血(HI)前后及應(yīng)用HCN通道阻斷劑Cs Cl前后海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元死亡數(shù)目的變化情況。2.電生理記錄利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù),記錄新生SD大鼠急性分離腦片海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元的Ih,并觀察HI前后Ih及其激活動(dòng)力學(xué)、自發(fā)放電等電生理特性的變化。結(jié)果:1.免疫組化染色結(jié)果顯示HCN1-4通道在海馬CA1區(qū)均存在熒光染色。2.海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元可記錄到呈電壓依賴相關(guān)的超極化快速激活、緩慢去活的內(nèi)向電流Ih。3.HI使椎體神經(jīng)元Ih振幅增大,自發(fā)放電的頻率減少,而HCN通道阻斷劑使自發(fā)放電頻率增加。4.海馬椎體神經(jīng)元隨著HI時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸死亡,HCN通道阻斷劑顯著增加了死亡神經(jīng)元的數(shù)量。結(jié)論:新生大鼠海馬CA1區(qū)表達(dá)HCN通道,HI增大椎體神經(jīng)元的Ih,減少自發(fā)放電的頻率,而HCN通道阻斷劑增加自發(fā)放電的頻率并顯著增加死亡神經(jīng)元的數(shù)量,表明HI后Ih的增大對(duì)神經(jīng)元具有保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：新生大鼠 缺氧缺血 超極化激活電流 海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R722.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-13
• 1.1 新生兒缺氧缺血性腦損傷及其機(jī)制10-11
• 1.2 海馬11
• 1.3 HCN通道11-13
• 第2章 材料與方法13-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備及儀器13-14
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑14-16
• 2.4 實(shí)驗(yàn)溶液配制16-17
• 2.4.1 蔗糖解剖液16
• 2.4.2 人工腦脊液16
• 2.4.3 氧-糖剝奪液16-17
• 2.4.4 電極內(nèi)液17
• 2.4.5 其它溶液17
• 2.5 實(shí)驗(yàn)分組17-18
• 2.6 電生理記錄18-21
• 2.6.1 腦片制備18-19
• 2.6.2 電極制備19
• 2.6.3 記錄前準(zhǔn)備19
• 2.6.4 目標(biāo)神經(jīng)元全細(xì)胞膜片鉗記錄19-20
• 2.6.5 海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元體外缺氧缺血模型的制作20
• 2.6.6 全細(xì)胞膜片鉗記錄20-21
• 2.6.7 Ih激活動(dòng)力學(xué)特性的記錄21
• 2.6.8 Ih反轉(zhuǎn)電位的測(cè)定21
• 2.6.9 電流鉗記錄自發(fā)放電21
• 2.7 免疫組化染色21-23
• 2.7.1 海馬HCN通道的免疫組化染色21-22
• 2.7.2 海馬神經(jīng)元To-pro-3 染色22-23
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-37
• 3.1 HCN通道在海馬CA1區(qū)的分布24-25
• 3.2 椎體神經(jīng)元的Ih記錄25-28
• 3.3 椎體神經(jīng)元受到缺氧缺血性損傷后的電生理變化28-35
• 3.3.1 缺氧缺血后Ih的變化28-31
• 3.3.2 缺氧缺血損傷對(duì)Ih的激活曲線和反轉(zhuǎn)電位沒有影響31-33
• 3.3.3 缺氧缺血時(shí)椎體神經(jīng)元自發(fā)放電減少33-35
• 3.4 缺氧缺血后海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元的死亡情況35-37
• 第4章 討論37-41
• 4.1 HIE的治療現(xiàn)狀及研究意義37-38
• 4.2 大鼠海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元的Ih38
• 4.3 Ih在椎體神經(jīng)元缺氧缺血時(shí)的保護(hù)作用38-40
• 4.4 小結(jié)40-41
• 第5章 結(jié)論與展望41-42
• 5.1 結(jié)論41
• 5.2 展望41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果47-48
• 綜述48-54
• 參考文獻(xiàn)52-54

【相似文獻(xiàn)】

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1 杜蘭芳;杜永平;徐暉;王文挺;胡三覺;;延胡索乙素對(duì)大鼠慢性壓迫背根節(jié)神經(jīng)元自發(fā)放電的影響[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年04期

2 亓代麟;段松生;周會(huì)舉;周群鳳;;嗎啡與安定對(duì)清醒sn猴前額葉皮層神經(jīng)元自發(fā)放電話動(dòng)的影響[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1981年03期

3 殷松生;易必達(dá);梁正英;N４，

本文編號(hào)：504025