本文關(guān)鍵詞：卡介苗多糖核酸對(duì)哮喘大鼠肺組織STAT3、IL-21表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 通過(guò)建立大鼠慢性哮喘模型，觀察卡介苗多糖核酸（polysaccharid nucleicacidfraction of BCG, BCG-PSN）對(duì)哮喘大鼠肺組織信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3（SignalTransducer and Activator of Transc, STAT3）及白細(xì)胞介素-21（Interleukin, IL-21）表達(dá)的影響。 方法 1.40只清潔健康，約1月齡，體重150-170克的雄性SD大鼠，隨機(jī)分配為以下四個(gè)組別：正常對(duì)照組（Control組）、哮喘模型組（Model組）、地塞米松干預(yù)治療組（Dexamethasone，，DXM組），布地奈德混懸液干預(yù)治療組（Budesonide，BUD組），每組各10只。 2. Model組、DXM組、BCG-PSN組大鼠分別于實(shí)驗(yàn)第1天、第15天腹腔注射10㳠卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)溶液1毫升，包含免疫佐劑氫氧化鋁100毫克，實(shí)驗(yàn)第22天，用2㳠卵清蛋白溶液4毫升對(duì)大鼠進(jìn)行霧化吸入激發(fā)，每次約20分鐘，隔天霧化1次，連續(xù)共9周。 3.DXM組（0.3mg/kg）、BCG-PSN組（0.45mg/kg）在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后腹腔注射，3次/周，時(shí)間共為12周；Control組及Model組給予生理鹽水腹腔注射，3次/周，時(shí)間共為12周。 4.實(shí)驗(yàn)第12周末，四組大鼠分別予以水合氯醛腹腔注射麻醉后用肺功能檢測(cè)氣道阻力變化，檢測(cè)完成后用腹主動(dòng)脈放血方法處死大鼠，分別取各組左右兩側(cè)肺組織，其中左肺組織作實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶連鎖反應(yīng)法（quantitative real-time PCR，qPCR）來(lái)檢測(cè)肺組織STAT3與IL-21mRNA的轉(zhuǎn)錄水平，并通過(guò)Western Blot檢測(cè)方法檢測(cè)大鼠肺組織中STAT3的蛋白表達(dá)水平；右側(cè)肺組織通過(guò)病理HE染色方法對(duì)各組大鼠肺組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，分析四組大鼠中氣道炎癥的變化情況。 結(jié)果 1.慢性哮喘大鼠模型的建立：實(shí)驗(yàn)第22天開(kāi)始予以2㳠卵清蛋白溶液霧化吸入后逐漸出現(xiàn)以下哮喘發(fā)作癥狀：面部搔抓、呼吸頻率加快、點(diǎn)頭呼吸、面部紫紺，大小便失禁等，于實(shí)驗(yàn)第12周末予動(dòng)物肺功能檢測(cè)其氣道阻力變化，結(jié)果提示Model組大鼠氣道阻力明顯增高，與Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；病理HE染色肺組織切片形態(tài)學(xué)發(fā)現(xiàn)：Model組肺組織中支氣管與肺泡周?chē)装Y細(xì)胞明顯增高，嗜酸性粒細(xì)胞增多，氣道內(nèi)有較多粘性分泌物，支氣管管壁增厚導(dǎo)致管腔狹窄，提示慢性哮喘大鼠模型構(gòu)建成功。 2.BCG-PSN干預(yù)后大鼠肺組織病理學(xué)與氣道阻力測(cè)定：哮喘大鼠經(jīng)BCG-PSN干預(yù)后病理組織學(xué)改變，BCG-PSN組仍可見(jiàn)炎癥反應(yīng)，與Model組比較炎癥減輕；與DXM比較，差異不顯著；但與Control組比較仍可見(jiàn)炎癥反應(yīng)。四組大鼠均以不同濃度鹽酸組胺激發(fā)。相同濃度鹽酸組胺激發(fā)下， BCG-PSN組氣道阻力與Model組比較，氣道阻力明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與Control組比較，氣道阻力仍然增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.BCG-PSN干預(yù)后肺組織STAT3和IL-21表達(dá)量的變化：BCG-PSN干預(yù)后哮喘大鼠肺組織STAT3、IL-21mRNA轉(zhuǎn)錄較Model組下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但較Control組明顯增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BCG-PSN干預(yù)組STAT3蛋白表達(dá)量較Model組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但較Control組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 1.通過(guò)OVA致敏，激發(fā)，能成功構(gòu)建大鼠慢性哮喘模型。STAT3、IL-21在大鼠肺組織中高表達(dá)，參與了哮喘發(fā)病。 2.BCG-PSN能降低哮喘大鼠氣道高反應(yīng)性、減輕氣道炎癥。 3.BCG-PSN能抑制哮喘大鼠STAT3、IL-21蛋白表達(dá)，提示BCG-PSN的干預(yù)作用與下調(diào)肺組織STAT3、IL-21的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：卡介苗多糖核酸 哮喘 動(dòng)物模型 IL-21 STAT3
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R725.6
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-10
• 英文縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法13-24
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-24
• 2 結(jié)果24-33
• 2.1 大鼠哮喘樣癥狀的觀察24
• 2.2 大鼠氣道阻力測(cè)定24-25
• 2.3 各組大鼠肺組織的病理變化25-26
• 2.4 qPCR 檢測(cè)大鼠肺組織中 STAT3 mRNA 轉(zhuǎn)錄的表達(dá)26-28
• 2.5 qPCR 檢測(cè)大鼠肺組織中 IL-21 mRNA 轉(zhuǎn)錄的表達(dá)28-31
• 2.6 Western Blotting 檢測(cè)大鼠肺組織 STAT3 蛋白的表達(dá)31-33
• 3 討論33-37
• 3.1 大鼠慢性哮喘模型的構(gòu)建33-34
• 3.2 STAT3 對(duì)哮喘大鼠發(fā)病過(guò)程的影響34-35
• 3.3 IL-21 對(duì)哮喘大鼠發(fā)病過(guò)程的影響35-36
• 3.4 BCG-PSN 對(duì)哮喘大鼠的免疫調(diào)節(jié)作用36-37
• 4 結(jié)論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 致謝52-53
• 攻讀學(xué)位期間主要研究成果53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：494694