本文關(guān)鍵詞：卡介苗多糖核酸對哮喘大鼠肺組織STAT3、IL-21表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 通過建立大鼠慢性哮喘模型，觀察卡介苗多糖核酸（polysaccharid nucleicacidfraction of BCG, BCG-PSN）對哮喘大鼠肺組織信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3（SignalTransducer and Activator of Transc, STAT3）及白細(xì)胞介素-21（Interleukin, IL-21）表達(dá)的影響。 方法 1.40只清潔健康，約1月齡，體重150-170克的雄性SD大鼠，隨機分配為以下四個組別：正常對照組（Control組）、哮喘模型組（Model組）、地塞米松干預(yù)治療組（Dexamethasone，，DXM組），布地奈德混懸液干預(yù)治療組（Budesonide，BUD組），每組各10只。 2. Model組、DXM組、BCG-PSN組大鼠分別于實驗第1天、第15天腹腔注射10㳠卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)溶液1毫升，包含免疫佐劑氫氧化鋁100毫克，實驗第22天，用2㳠卵清蛋白溶液4毫升對大鼠進(jìn)行霧化吸入激發(fā)，每次約20分鐘，隔天霧化1次，連續(xù)共9周。 3.DXM組（0.3mg/kg）、BCG-PSN組（0.45mg/kg）在實驗開始后腹腔注射，3次/周，時間共為12周；Control組及Model組給予生理鹽水腹腔注射，3次/周，時間共為12周。 4.實驗第12周末，四組大鼠分別予以水合氯醛腹腔注射麻醉后用肺功能檢測氣道阻力變化，檢測完成后用腹主動脈放血方法處死大鼠，分別取各組左右兩側(cè)肺組織，其中左肺組織作實時熒光定量聚合酶連鎖反應(yīng)法（quantitative real-time PCR，qPCR）來檢測肺組織STAT3與IL-21mRNA的轉(zhuǎn)錄水平，并通過Western Blot檢測方法檢測大鼠肺組織中STAT3的蛋白表達(dá)水平；右側(cè)肺組織通過病理HE染色方法對各組大鼠肺組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，分析四組大鼠中氣道炎癥的變化情況。 結(jié)果 1.慢性哮喘大鼠模型的建立：實驗第22天開始予以2㳠卵清蛋白溶液霧化吸入后逐漸出現(xiàn)以下哮喘發(fā)作癥狀：面部搔抓、呼吸頻率加快、點頭呼吸、面部紫紺，大小便失禁等，于實驗第12周末予動物肺功能檢測其氣道阻力變化，結(jié)果提示Model組大鼠氣道阻力明顯增高，與Control組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；病理HE染色肺組織切片形態(tài)學(xué)發(fā)現(xiàn)：Model組肺組織中支氣管與肺泡周圍炎癥細(xì)胞明顯增高，嗜酸性粒細(xì)胞增多，氣道內(nèi)有較多粘性分泌物，支氣管管壁增厚導(dǎo)致管腔狹窄，提示慢性哮喘大鼠模型構(gòu)建成功。 2.BCG-PSN干預(yù)后大鼠肺組織病理學(xué)與氣道阻力測定：哮喘大鼠經(jīng)BCG-PSN干預(yù)后病理組織學(xué)改變，BCG-PSN組仍可見炎癥反應(yīng)，與Model組比較炎癥減輕；與DXM比較，差異不顯著；但與Control組比較仍可見炎癥反應(yīng)。四組大鼠均以不同濃度鹽酸組胺激發(fā)。相同濃度鹽酸組胺激發(fā)下， BCG-PSN組氣道阻力與Model組比較，氣道阻力明顯下降，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與Control組比較，氣道阻力仍然增高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義。 3.BCG-PSN干預(yù)后肺組織STAT3和IL-21表達(dá)量的變化：BCG-PSN干預(yù)后哮喘大鼠肺組織STAT3、IL-21mRNA轉(zhuǎn)錄較Model組下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；但較Control組明顯增高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。BCG-PSN干預(yù)組STAT3蛋白表達(dá)量較Model組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；但較Control組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與DXM比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 1.通過OVA致敏，激發(fā)，能成功構(gòu)建大鼠慢性哮喘模型。STAT3、IL-21在大鼠肺組織中高表達(dá)，參與了哮喘發(fā)病。 2.BCG-PSN能降低哮喘大鼠氣道高反應(yīng)性、減輕氣道炎癥。 3.BCG-PSN能抑制哮喘大鼠STAT3、IL-21蛋白表達(dá)，提示BCG-PSN的干預(yù)作用與下調(diào)肺組織STAT3、IL-21的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：卡介苗多糖核酸 哮喘 動物模型 IL-21 STAT3
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R725.6
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-10
• 英文縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 1 實驗材料與實驗方法13-24
• 1.1 實驗材料13-15
• 1.2 實驗方法15-24
• 2 結(jié)果24-33
• 2.1 大鼠哮喘樣癥狀的觀察24
• 2.2 大鼠氣道阻力測定24-25
• 2.3 各組大鼠肺組織的病理變化25-26
• 2.4 qPCR 檢測大鼠肺組織中 STAT3 mRNA 轉(zhuǎn)錄的表達(dá)26-28
• 2.5 qPCR 檢測大鼠肺組織中 IL-21 mRNA 轉(zhuǎn)錄的表達(dá)28-31
• 2.6 Western Blotting 檢測大鼠肺組織 STAT3 蛋白的表達(dá)31-33
• 3 討論33-37
• 3.1 大鼠慢性哮喘模型的構(gòu)建33-34
• 3.2 STAT3 對哮喘大鼠發(fā)病過程的影響34-35
• 3.3 IL-21 對哮喘大鼠發(fā)病過程的影響35-36
• 3.4 BCG-PSN 對哮喘大鼠的免疫調(diào)節(jié)作用36-37
• 4 結(jié)論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 致謝52-53
• 攻讀學(xué)位期間主要研究成果53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：494694