本文關鍵詞：Tie2信號系統(tǒng)激活對血管內(nèi)皮細胞的保護作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景:微血管內(nèi)皮損傷是急性腎損傷和慢性腎臟疾病共同的病理改變,貫穿于它們的發(fā)生、發(fā)展過程。與腎小管上皮細胞相比,腎微血管內(nèi)皮細胞缺乏有效的再生能力,當腎功能恢復到正常水平以后,腎周微血管密度的降低或丟失的病變?nèi)詫㈤L期存在,最終將導致慢性腎小管間質纖維化。Tie2信號系統(tǒng)被認為在血管內(nèi)皮的保護方面起著重要的作用,研究中該信號系統(tǒng)的激活多應用Ang-1,但也有研究顯示Ang-1促進急性腎損傷,炎癥細胞浸潤,后期促進腎纖維化。因而我們集中研究Tie2信號對血管內(nèi)皮的保護作用。目的:本研究建立脂多糖誘導的血管內(nèi)皮細胞損傷,探討Tie2信號系統(tǒng)激活對血管內(nèi)皮細胞是否具有保護作用。為后期進一步研究提供依據(jù)。方法:第一部分離體培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞HUVEC,以4×104接種于96孔板,200ul/孔。分別以濃度0ug/ml,0.125 ug/ml,0.25 ug/ml,0.5 ug/ml,1 ug/ml,2 ug/ml,5 ug/ml,10 ug/ml的LPS刺激損傷細胞。孵育24小時,采用cck8法測定細胞活性。根據(jù)結果選擇適宜的LPS濃度,建立細胞損傷模型。第二部分根據(jù)第一部分結果選擇LPS刺激濃度為10 ug/ml。細胞分為三組:正常對照組;LPS組;LPS+Tie2單抗組。應用Elisa技術檢測孵育24小時后各組細胞上清s VCAM-1的表達水平。應用PCR技術檢測孵育6h后各組細胞VCAM-1 m RNA的水平變化。應用PCR技術檢測孵育6h后各組細胞凋亡相關基因Bax、Bcl-2的水平變化。應用WESTERN BLOT技術檢測孵育24、48小時后,各組細胞α-SMA的表達水平的變化。結果:第一部分cck8結果顯示,內(nèi)皮細胞被不同濃度LPS損傷刺激后,各濃度LPS均對細胞增殖活性產(chǎn)生抑制作用,與正常細胞比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。第二部分采用10 ug/ml LPS刺激損傷細胞后,LPS組細胞上清s VCAM-1分泌量與VCAM-1 m RNA較空白對照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。孵育6h后,LPS組細胞Baxm RNA與Baxm RNA/Bcl-2m RNA較空白對照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。各組Bcl-2基因水平無明顯差異(P0.05)。孵育24h及48h后,LPS組細胞α-SMA水平較空白對照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。結論:1.LPS可引起血管內(nèi)皮細胞不同程度損傷,Bax基因表達增加提示細胞凋亡增加,VCAM-1表達增加提示細胞發(fā)生炎癥反應,α-SMA水平升高,提示細胞發(fā)生了轉分化。2.加入Tie2激發(fā)單抗后,細胞VCAM-1蛋白與基因水平低表達、Bax/Bcl-2下降說明Tie2信號系統(tǒng)激活對血管內(nèi)皮細胞具有抗炎、抗凋亡的作用。3.加入Tie2激發(fā)單抗后,細胞α-SMA表達水平下降,說明Tie2激發(fā)單抗可以抑制細胞向肌成纖維細胞方向轉分化。
【關鍵詞】：Tie2信號 微血管內(nèi)皮細胞損傷 炎癥反應 凋亡 Endo-MT
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R726.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 研究背景9-13
• 參考文獻11-13
• 材料和方法13-20
• 實驗結果20-28
• 討論28-32
• 結論32-33
• 不足與展望33-34
• 參考文獻34-37
• 綜述37-46
• 參考文獻42-46
• 中英文對照縮略詞46-47
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文47-48
• 本課題資助項目48-49
• 致謝49-50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 古麗麗;劉立亞;馬芹芹;朱丹;王慧曄;黃秀蘭;;白藜蘆醇對過氧化氫誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的調(diào)控作用[J];時珍國醫(yī)國藥;2012年06期

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3 李軍;王國榮;張秀芹;王燕;牟艷玲;姚慶強;;二苯乙烯苷對同型半胱氨酸誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡及bcl-2、bax、caspase-3表達的影響[J];中國病理生理雜志;2013年04期

  本文關鍵詞：Tie2信號系統(tǒng)激活對血管內(nèi)皮細胞的保護作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：408190