本文關(guān)鍵詞：Tie2信號(hào)系統(tǒng)激活對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景:微血管內(nèi)皮損傷是急性腎損傷和慢性腎臟疾病共同的病理改變,貫穿于它們的發(fā)生、發(fā)展過程。與腎小管上皮細(xì)胞相比,腎微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏有效的再生能力,當(dāng)腎功能恢復(fù)到正常水平以后,腎周微血管密度的降低或丟失的病變?nèi)詫㈤L(zhǎng)期存在,最終將導(dǎo)致慢性腎小管間質(zhì)纖維化。Tie2信號(hào)系統(tǒng)被認(rèn)為在血管內(nèi)皮的保護(hù)方面起著重要的作用,研究中該信號(hào)系統(tǒng)的激活多應(yīng)用Ang-1,但也有研究顯示Ang-1促進(jìn)急性腎損傷,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),后期促進(jìn)腎纖維化。因而我們集中研究Tie2信號(hào)對(duì)血管內(nèi)皮的保護(hù)作用。目的:本研究建立脂多糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,探討Tie2信號(hào)系統(tǒng)激活對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞是否具有保護(hù)作用。為后期進(jìn)一步研究提供依據(jù)。方法:第一部分離體培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC,以4×104接種于96孔板,200ul/孔。分別以濃度0ug/ml,0.125 ug/ml,0.25 ug/ml,0.5 ug/ml,1 ug/ml,2 ug/ml,5 ug/ml,10 ug/ml的LPS刺激損傷細(xì)胞。孵育24小時(shí),采用cck8法測(cè)定細(xì)胞活性。根據(jù)結(jié)果選擇適宜的LPS濃度,建立細(xì)胞損傷模型。第二部分根據(jù)第一部分結(jié)果選擇LPS刺激濃度為10 ug/ml。細(xì)胞分為三組:正常對(duì)照組;LPS組;LPS+Tie2單抗組。應(yīng)用Elisa技術(shù)檢測(cè)孵育24小時(shí)后各組細(xì)胞上清s VCAM-1的表達(dá)水平。應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)孵育6h后各組細(xì)胞VCAM-1 m RNA的水平變化。應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)孵育6h后各組細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2的水平變化。應(yīng)用WESTERN BLOT技術(shù)檢測(cè)孵育24、48小時(shí)后,各組細(xì)胞α-SMA的表達(dá)水平的變化。結(jié)果:第一部分cck8結(jié)果顯示,內(nèi)皮細(xì)胞被不同濃度LPS損傷刺激后,各濃度LPS均對(duì)細(xì)胞增殖活性產(chǎn)生抑制作用,與正常細(xì)胞比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。第二部分采用10 ug/ml LPS刺激損傷細(xì)胞后,LPS組細(xì)胞上清s VCAM-1分泌量與VCAM-1 m RNA較空白對(duì)照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。孵育6h后,LPS組細(xì)胞Baxm RNA與Baxm RNA/Bcl-2m RNA較空白對(duì)照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。各組Bcl-2基因水平無明顯差異(P0.05)。孵育24h及48h后,LPS組細(xì)胞α-SMA水平較空白對(duì)照組明顯升高(P0.05)。加入Tie2激發(fā)單抗后水平下降(P0.05)。結(jié)論:1.LPS可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞不同程度損傷,Bax基因表達(dá)增加提示細(xì)胞凋亡增加,VCAM-1表達(dá)增加提示細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng),α-SMA水平升高,提示細(xì)胞發(fā)生了轉(zhuǎn)分化。2.加入Tie2激發(fā)單抗后,細(xì)胞VCAM-1蛋白與基因水平低表達(dá)、Bax/Bcl-2下降說明Tie2信號(hào)系統(tǒng)激活對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有抗炎、抗凋亡的作用。3.加入Tie2激發(fā)單抗后,細(xì)胞α-SMA表達(dá)水平下降,說明Tie2激發(fā)單抗可以抑制細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞方向轉(zhuǎn)分化。
【關(guān)鍵詞】：Tie2信號(hào) 微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷 炎癥反應(yīng) 凋亡 Endo-MT
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R726.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 研究背景9-13
• 參考文獻(xiàn)11-13
• 材料和方法13-20
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 不足與展望33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述37-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 中英文對(duì)照縮略詞46-47
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文47-48
• 本課題資助項(xiàng)目48-49
• 致謝49-50

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 古麗麗;劉立亞;馬芹芹;朱丹;王慧曄;黃秀蘭;;白藜蘆醇對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2012年06期

2 鄧?yán)?陳慎仁;細(xì)胞凋亡的調(diào)控與Ⅰ型糖尿病[J];中國(guó)病理生理雜志;2002年09期

3 李軍;王國(guó)榮;張秀芹;王燕;牟艷玲;姚慶強(qiáng);;二苯乙烯苷對(duì)同型半胱氨酸誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及bcl-2、bax、caspase-3表達(dá)的影響[J];中國(guó)病理生理雜志;2013年04期

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本文編號(hào)：408190