目的:探討Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在H9c2心肌細(xì)胞慢性缺氧適應(yīng)中的作用及可能機(jī)制。方法:將37℃、5%O₂、5%CO₂、90%N₂條件下培養(yǎng)的H9c2細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,低氧培養(yǎng)6、12、24、36、48、72 h時收集細(xì)胞;將37℃、21%O₂、5%CO₂條件下培養(yǎng)的細(xì)胞作為對照組。采用Western blot和real-time PCR技術(shù)檢測β-catenin、抗凋亡因子bcl-2和survivin在不同培養(yǎng)時間點(diǎn)的表達(dá)變化。結(jié)果:5%O₂培養(yǎng)的H9c2細(xì)胞與對照組相比,β-catenin蛋白在缺氧6、12、24、36 h時表達(dá)明顯增加(P=0.000,P=0.018,P=0.001,P=0.000),bcl-2及survivin表達(dá)較對照組明顯增加(P=0.000,P=0.000)。結(jié)論:Wnt/β-catenin信號通路激活可能是H9c2心肌細(xì)胞慢性缺氧的適應(yīng)機(jī)制之一,其部分可能通過上調(diào)抗凋亡因子bcl-2及survivin表達(dá)起作用...

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【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 H9c2心肌細(xì)胞
        1.1.2 主要試劑及儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 H9c2心肌細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.3 Real-time PCR檢測β-catenin、bcl-2和survivin m RNA表達(dá)水平
        1.2.4 Western blot檢測β-catenin蛋白表達(dá)水平
        1.2.5 免疫熒光檢測β-catenin在H9c2心肌細(xì)胞內(nèi)定位
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 5%O2條件下培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞不同時間細(xì)胞形態(tài)變化
    2.2 5%O2條件下培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞不同時間點(diǎn)β-catenin在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)部位
    2.3 5%O2條件下培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞不同時間β-catenin的表達(dá)變化
    2.4 5%O2條件下培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞不同時間抗凋亡因子bcl-2及survivin表達(dá)變化
3 討論



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