目的:為了明確糖皮質(zhì)激素局部注射治療方法的具體機理,我們前期完成的動物實驗證實地塞米松對體外培養(yǎng)的大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞的增殖和分化無明顯的直接影響,但在成纖維細(xì)胞和成肌細(xì)胞混合培養(yǎng)中能夠減少成纖維細(xì)胞對成肌細(xì)胞分化的抑制,間接促進成肌細(xì)胞分化。本實驗是在熟悉動物成肌細(xì)胞培養(yǎng)、分離方法的基礎(chǔ)上,進一步探索臨床人源性正常肌肉及先天性肌性斜頸患者病變攣縮肌肉標(biāo)本成肌細(xì)胞的培養(yǎng)方法,為后續(xù)實驗做準(zhǔn)備。 方法:第一部分,應(yīng)用胰蛋白酶和膠原酶兩步消化法和差速貼壁法,從出生后4-7天的大鼠四肢骨骼肌中進行原代成肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的分離和培養(yǎng),在倒置相差顯微鏡下觀察他們的生長和分化特性,觀察多核肌管的形成過程。第二、三部分,標(biāo)本來源于臨床先天性肌性斜頸患者正常肌肉和病變攣縮肌肉,同樣應(yīng)用胰蛋白酶和膠原酶兩步消化法和差速貼壁法,在倒置相差顯微鏡下觀察他們的增殖和分化特性,對第二部分培養(yǎng)的成肌細(xì)胞應(yīng)用肌動蛋白抗體進行免疫細(xì)胞學(xué)方法予以鑒定。 結(jié)果:在動物實驗中可觀察到4-5天成肌細(xì)胞增殖融合形成多核的肌管,核位于肌管的中心,呈長軸排列成串珠樣。第二部分實驗,13-14天成肌細(xì)胞增殖融合形成多核的肌管,核位于...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

本文編號：3881471