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Smad4介導(dǎo)TGF-β2/BMP2信號(hào)對(duì)心臟發(fā)育相關(guān)基因組蛋白乙;揎椪{(diào)控作用

發(fā)布時(shí)間:2024-01-09 07:43
  第一部分: Smad4低表達(dá)對(duì)H9C2心肌細(xì)胞心臟發(fā)育相關(guān)轉(zhuǎn) 錄因子表達(dá)及其組蛋白乙;揎椀挠绊 目的 構(gòu)建Smad4低表達(dá)的細(xì)胞模型,檢測(cè)Smad4對(duì)心臟核心轉(zhuǎn)錄因子GATA4,MEF2c,Tbx5,Nkx2.5的表達(dá)的影響,并檢測(cè)其對(duì)組蛋白H3乙酰化及這些基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3乙;降挠绊。以證實(shí)我們的科學(xué)假設(shè):Smad4對(duì)組蛋白乙酰化修飾具有調(diào)節(jié)作用。 方法: (1)構(gòu)建3條低表達(dá)Smad4的慢病毒載體,轉(zhuǎn)染H9C2心肌細(xì)胞建立Smad4干擾的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,然后從蛋白水平檢測(cè)Smad4蛋白的表達(dá),檢測(cè)其干擾效果,篩選出干擾效果最好的細(xì)胞株進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。 (2)實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組,陰性對(duì)照組(空載慢病毒組)和Smad4干擾組,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)三組心臟發(fā)育相關(guān)基因GATA4,NKX2.5,MEF2c,Tbx5,以及組蛋白乙酰化酶(HATs)亞型p300和GCN5的mRNA表達(dá)情況,Western-blotting檢測(cè)乙;M蛋白H3(acH3)的表達(dá), ChIP-Real-Time Q-PCR檢測(cè)各處理組細(xì)胞GATA4,Nkx2.5,MEF2c,Tbx5啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3乙...

【文章頁數(shù)】:129 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對(duì)照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Smad4 低表達(dá)對(duì) H9C2 心肌細(xì)胞心臟核心轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)及其組蛋白乙;揎椀挠绊
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 Smad4 介導(dǎo) BMP2 信號(hào)通路對(duì)心肌細(xì)胞組蛋白乙;揎椀恼{(diào)控作用及其機(jī)制研究
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 Smad4介導(dǎo)TGF-β2信號(hào)通路對(duì)心肌細(xì)胞組蛋白乙;揎椀恼{(diào)控作用及其機(jī)制研究
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間科研情況



本文編號(hào):3877670

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