目的:先天性肛門直腸畸形是小兒外科常見的復(fù)雜消化道畸形,分型及病理改變復(fù)雜,治療困難,嚴重影響患兒生命及預(yù)后�，F(xiàn)階段對于該疾病的研究多集中在基因水平,而對于基因的具體調(diào)控機制尚待進一步發(fā)現(xiàn)。本研究利用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)誘導(dǎo)先天性肛門直腸畸形大鼠模型,對末端后腸組織進行高通量測序,探索差異表達的lncRNA AARB07048878.1在肛門直腸畸形大鼠中的表達水平變化,通過對其進行干擾及過表達探索其在IEC-6細胞中的功能,推測其疾病發(fā)生中的作用。研究方法:①Wistar孕鼠42只分為ARM組和正常組,孕GD10分別按125mg/kg給予ETU及等量生理鹽水灌胃,孕GD16、GD17、GD19剖宮取胎,轉(zhuǎn)移至無菌操作環(huán)境下取材,GD16、GD17于顯微鏡下,GD19于肉眼下觀察胎鼠骶尾部形態(tài),計算胎鼠畸形率,對存在肛門閉鎖、短尾或無尾畸形的胎鼠收集末端后腸組織。②利用熒光定量PCR技術(shù)檢測ARM組及正常組胎鼠末段肛門直腸組織中的lncRNA AARB07048878.1表達水平差異。③設(shè)計lncRNAAARB07048878.1的特異性干擾序列Ribo...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1前言
2 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 細胞系
        2.1.3 實驗主要試劑
        2.1.4 實驗主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物模型制備及樣品收集
        2.2.2 qRT-PCR檢測組織中l(wèi)ncRNA AARB07048878.1 表達量
        2.2.3 質(zhì)粒提取
        2.2.4 細胞培養(yǎng)
        2.2.5 細胞轉(zhuǎn)染
        2.2.6 qRT-PCR檢測細胞中l(wèi)ncRNA AARB07048878.1 表達量
        2.2.7 細胞增殖能力檢測
        2.2.8 細胞凋亡檢測
        2.2.9 Western blot檢測細胞Wnt5a蛋白表達量
        2.2.10 統(tǒng)計學方法
3 結(jié)果
    3.1 動物模型制作和標本收集
    3.2 測序結(jié)果差異表達分析及篩選
    3.3 大鼠肛門直腸組織中l(wèi)nc RNA AARB07048878.1 的表達
    3.4 lncRNA AARB07048878.1 干擾試劑及過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率
    3.5 lncRNA AARB07048878.1對IEC-6 細胞增殖能力的作用
    3.6 lncRNA AARB07048878.1對IEC-6 細胞凋亡的作用
    3.7 lncRNA AARB07048878.1對Wnt5a表達的作用
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3825506