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腺病毒介導(dǎo)野生型p53基因轉(zhuǎn)染左向右流型肺動脈高壓大鼠的試驗研究

發(fā)布時間:2023-04-01 15:14
  目的研究重組腺病毒介導(dǎo)的野生型p53基因轉(zhuǎn)染左向右分流型先心病肺動脈高壓大鼠,觀察轉(zhuǎn)染后目的基因的表達情況,及其對肺動脈高壓的抑制作用和對肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。 方法將pCMVp53重組轉(zhuǎn)移載體經(jīng)BamH1和NheI酶切,得到p53基因cDNA,然后將cDNA片段克隆到轉(zhuǎn)移載體pCMV5GFP,使其受CMV5啟動子的調(diào)控,獲得pCMV5p53重組轉(zhuǎn)移載體,用該線狀重組轉(zhuǎn)移載體與腺病毒右臂DNA經(jīng)磷酸鈣共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞獲得重組腺病毒,經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定p53蛋白含量,證明外源p53基因在含重組腺病毒的293細(xì)胞中得到表達。同法創(chuàng)建對照組病毒Adeno-lacZ。48只大鼠隨機分為4組:Ⅰ組(n=10)為空白對照組,僅做假手術(shù)處理;Ⅱ組(n=13)為模型對照組,通過套管法建立左向右分流型PH模型;Ⅲ組(n=14)為實驗組,建立PH模型,并通過氣管吸入法轉(zhuǎn)染Adeno-p53重組腺病毒;Ⅳ組(n=11)為實驗對照組,建立PH模型,并通過氣管吸入法轉(zhuǎn)染Adeno-lacZ重組腺病毒。16周后右心導(dǎo)管法測量各組大鼠右室平均壓(mRVP)和肺動脈平均壓(mPAP),計算...

【文章頁數(shù)】:39 頁

【學(xué)位級別】:碩士

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英文摘要
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材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
致謝
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