組蛋白在兒童膿毒癥發(fā)病中的作用研究
發(fā)布時間:2023-02-25 20:46
1 研究背景膿毒癥是感染引起的以高炎癥反應(yīng)、免疫系統(tǒng)失調(diào)、內(nèi)環(huán)境紊亂及臟器功能障礙為主要表現(xiàn)的綜合征,是兒科重癥監(jiān)護(hù)室(pediatric intensive care unit,PICU)中患兒死亡的主要原因之一,在全球范圍內(nèi)均有較高的發(fā)病率,尋找早期診斷及判斷預(yù)后的生物標(biāo)記物具有重要意義。組蛋白是一種高度保守的生物蛋白,具有豐富的生物學(xué)功能。近年來研究發(fā)現(xiàn),組蛋白在炎癥狀態(tài)下的濃度升高,并具有促炎及細(xì)胞毒作用,其中,以組蛋白hH4(histone H4,hH4)作用最為顯著。2 研究目的分析膿毒癥患兒血清組蛋白hH4的濃度變化,探討組蛋白與兒童膿毒癥發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的相關(guān)性,并通過體外細(xì)胞實驗初步探討組蛋白在膿毒癥炎癥反應(yīng)及細(xì)胞毒作用中的可能機(jī)制。3 研究方法回顧性分析2016年11月至2017年12月收入我院PICU的1月至1歲膿毒癥患兒,入組患兒以入院24小時內(nèi)首次小兒危重病例評分(PCIS)結(jié)果,分為非危重組(n=21)、危重組(n=11)和極危重組(n=8)三個亞組,隨機(jī)選取相同年齡組別健康兒童為對照組。整理實驗組一般臨床資料、第3天PCIS再評分結(jié)果,按觀察終點(diǎn)日臨床結(jié)局(...
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 膿毒癥患兒血清組蛋白濃度測定
1 研究目的
2 材料與方法
2.1 研究對象
2.2 入組及排除標(biāo)準(zhǔn)
2.3 實驗材料
2.3.1 主要儀器
2.3.2 主要試劑
2.4 研究方法
2.4.1 樣本采集
2.4.2 組蛋白濃度檢測
2.4.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 患兒基線資料及分組
3.2 血清組蛋白濃度
3.2.1 病例組入院24小時內(nèi)血清hH4濃度與對照組比較
3.2.2 血清hH4濃度的組內(nèi)比較
3.2.3 不同預(yù)后組血清hH4濃度的比較
3.2.4 預(yù)后與血清hH4濃度相關(guān)性分析
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 組蛋白介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌及細(xì)胞損傷作用研究
1 研究目的
2 實驗材料與儀器
2.1 實驗細(xì)胞
2.2 主要實驗儀器
2.3 主要實驗試劑
3 實驗方法
3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
3.1.1 人血管內(nèi)皮細(xì)胞 (human dermal microvascular endothelial cells,HMEC)
3.1.2 人單核細(xì)胞(THP-1細(xì)胞)
3.2 組蛋白介導(dǎo)THP-1細(xì)胞因子產(chǎn)生作用研究
3.2.1 組蛋白刺激實驗
3.2.2 測定IL-1β、1L- 10、TNF-α水平
3.3 組蛋白致THP-1及HMEC損傷作用研究
3.2.1 組蛋白刺激(兩種細(xì)胞方法相同)及抗體處理
3.3.2 測定兩種細(xì)胞上清液LDH值
3.4 數(shù)據(jù)處理與分析
4 結(jié)果
4.1 不同濃度組蛋白環(huán)境中THP-1上清液各細(xì)胞因子水平分析
4.2 組蛋白體外細(xì)胞毒性作用分析
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
參考文獻(xiàn)
成果
致謝
本文編號:3749167
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 膿毒癥患兒血清組蛋白濃度測定
1 研究目的
2 材料與方法
2.1 研究對象
2.2 入組及排除標(biāo)準(zhǔn)
2.3 實驗材料
2.3.1 主要儀器
2.3.2 主要試劑
2.4 研究方法
2.4.1 樣本采集
2.4.2 組蛋白濃度檢測
2.4.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 患兒基線資料及分組
3.2 血清組蛋白濃度
3.2.1 病例組入院24小時內(nèi)血清hH4濃度與對照組比較
3.2.2 血清hH4濃度的組內(nèi)比較
3.2.3 不同預(yù)后組血清hH4濃度的比較
3.2.4 預(yù)后與血清hH4濃度相關(guān)性分析
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 組蛋白介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌及細(xì)胞損傷作用研究
1 研究目的
2 實驗材料與儀器
2.1 實驗細(xì)胞
2.2 主要實驗儀器
2.3 主要實驗試劑
3 實驗方法
3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
3.1.1 人血管內(nèi)皮細(xì)胞 (human dermal microvascular endothelial cells,HMEC)
3.1.2 人單核細(xì)胞(THP-1細(xì)胞)
3.2 組蛋白介導(dǎo)THP-1細(xì)胞因子產(chǎn)生作用研究
3.2.1 組蛋白刺激實驗
3.2.2 測定IL-1β、1L- 10、TNF-α水平
3.3 組蛋白致THP-1及HMEC損傷作用研究
3.2.1 組蛋白刺激(兩種細(xì)胞方法相同)及抗體處理
3.3.2 測定兩種細(xì)胞上清液LDH值
3.4 數(shù)據(jù)處理與分析
4 結(jié)果
4.1 不同濃度組蛋白環(huán)境中THP-1上清液各細(xì)胞因子水平分析
4.2 組蛋白體外細(xì)胞毒性作用分析
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
參考文獻(xiàn)
成果
致謝
本文編號:3749167
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