目的:探討人腎小管上皮細胞（HK-2細胞）發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時,NGAL表達情況及相關(guān)調(diào)控機制。方法:將HK-2細胞隨機分為6組,即對照組（正常生長的HK-2細胞）,TG（毒胡蘿卜素,thapsigargin）組（5umol/L TG處理8 h）,單純轉(zhuǎn)染組（si RNA-ATF4試劑轉(zhuǎn)染24h）,轉(zhuǎn)染+TG組（siRNA-ATF4試劑轉(zhuǎn)染24h后,5umol/L TG處理8 h）,陰性對照組（siRNA-陰性對照物轉(zhuǎn)染24h）,DMSO組（5umol/L DMSO處理8h）。采用Western blot技術(shù)檢測各6組細胞中CHOP、GRP78、NGAL、ATF4的表達情況,采用Real-time PCR方法測得ATF4mRNA、NGALm RNA表達量。結(jié)果:1.TG組與對照組相比:TG組細胞中NGAL（1.4367±0.8522）、ATF4（1.2124±0.6959）、CHOP（1.6902±1.0668）、GRP78（1.4277±1.0393）較對照組（NGAL 0.4908±0.4086,ATF4 0.3763±0.3252,CHOP 0.1471±0.1477,GRP780.... 

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料及試劑
    2.2 細胞培養(yǎng)
    2.3 實驗方法
        2.3.1 構(gòu)建內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型
        2.3.2 轉(zhuǎn)染及構(gòu)建轉(zhuǎn)染后TG處理細胞模型
        2.3.3 免疫印跡檢測(Western-blot)ATF4、CHOP、GRP78和NGAL蛋白的表達
        2.3.4 實時定量PCR技術(shù)(Real-time PCR)檢測ATF4m RNA和 NGALm RNA的表達
        2.3.5 數(shù)據(jù)處理
    2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對正常HK-2細胞的影響(見圖2-15,見表1)
    3.2 轉(zhuǎn)染ATF4-si RNA試劑對正常HK-2 細胞的影響(見圖2-15,見表1)
    3.3 轉(zhuǎn)染ATF4-si RNA試劑對應(yīng)激HK-2 細胞的影響(見圖2-15,見表1)
    3.4 溶劑DMSO對正常HK-2 細胞的影響(見圖2-15,見表1)
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3691348