新生兒缺氧缺血性腦損傷（hypoxic ischemic brain damage, HIBD）是圍生期新生兒窒息引起的腦損傷,是新生兒死亡和導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的常見(jiàn)原因。HIBD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,缺氧是基礎(chǔ)病理生理改變,血流動(dòng)力學(xué)紊亂是并發(fā)多臟器功能衰竭的主要原因。由缺氧引起的HIBD是一個(gè)全身性病理過(guò)程,缺氧、酸性代謝產(chǎn)物蓄積導(dǎo)致心肌細(xì)胞能量代謝障礙,ATP減少,引起心肌損傷；目前對(duì)缺氧引發(fā)心肌損傷的研究表明,心肌細(xì)胞除發(fā)生壞死外還發(fā)生凋亡,且在缺氧、缺血早期凋亡細(xì)胞數(shù)多于壞死細(xì)胞。Calpains家族是一類(lèi)存在于細(xì)胞質(zhì)中的鈣依賴(lài)性半胱氨酸蛋白酶,底物眾多,Calpain的活化參與了HIBD的發(fā)生過(guò)程,其對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的作用主要表現(xiàn)在對(duì)凋亡途徑的調(diào)節(jié),并對(duì)某些凋亡相關(guān)基因的激活至關(guān)重要。本研究采用新生7日齡Wistar大鼠構(gòu)建缺氧缺血性腦損傷（HIBD）模型,觀察缺氧缺血（HI）對(duì)新生大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響情況,同時(shí)檢測(cè)心肌組織中Calpain -1 mRNA及蛋白質(zhì)水平的表達(dá)；凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Fas及Caspase-3mRNA表達(dá)的變化規(guī)律,以進(jìn)一步探討Calpain... 

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【部分圖文】：

圖1分離左側(cè)頸總動(dòng)脈

圖1分離左側(cè)頸總動(dòng)脈圖2乳鼠術(shù)后回鼠籠由母鼠喂養(yǎng)1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑主要儀器名稱(chēng)1)8%氧與92%氮的混合氣體2)缺氧艙3)液氮4)熒光倒置相差顯微鏡5)多功能酶標(biāo)儀6)病理切片機(jī)(RM2016)7)超凈工作臺(tái)8)凝膠成像系統(tǒng)Bio~Rad生產(chǎn)廠家天津華氧氣體供應(yīng)中心自制直徑40cm密閉玻璃艙天津華氧氣體供應(yīng)中心日本olympus公司美國(guó)BioRad公司德國(guó)LEICA公司美國(guó)BeckmanCouiter公司美國(guó)Bio一Rad公司

呼吸頻率波動(dòng)在104一124次/min，平均1缺氧環(huán)境5分鐘后開(kāi)始躁動(dòng)不安，呼吸頻率加快，10始倦怠，均趴伏于容器的一角，出現(xiàn)了不同程度的缺吸急促、抽搐、大小便失禁、意識(shí)喪失等。術(shù)后24h側(cè)旋轉(zhuǎn)，肢體抖動(dòng)。術(shù)后3d所有動(dòng)物仍只能原地向左向左側(cè)旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)是缺氧缺血引起大腦皮層下運(yùn)動(dòng)中樞扎側(cè)肢體癱瘓是模型成功的行為學(xué)改變)。大體形態(tài)觀察及TTC染色:建模后24h雙側(cè)大腦半球基本對(duì)稱(chēng)，形態(tài)飽滿;Hl后3d;Hl后7d組大鼠左側(cè)大腦半球輕度萎縮，可見(jiàn)明顯的大腦梗死情況，梗死組織呈白色而正常組織呈玫瑰紅左側(cè)大腦半球及相鄰部分染色呈白色，其余部分呈玫瑰己經(jīng)梗死。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺氧缺血性腦損傷新生大鼠心肌細(xì)胞凋亡及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表達(dá)的變化[J]. 劉英,郭世杰,孫景輝,于俠.  臨床兒科雜志. 2009(12)
[2]Fas在缺氧心肌細(xì)胞中的表達(dá)及其意義[J]. 栗競(jìng),王漢斌,馮全洲,張晉,王紅,王浩.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(10)
[3]新生大鼠重度缺氧缺血性腦損傷模型的建立[J]. 許曉霞,欒佐,古桂雄,張酈君.  中國(guó)新生兒科雜志. 2009(03)
[4]心肌缺血損傷大鼠心肌細(xì)胞凋亡與Fas、FasL基因表達(dá)的變化[J]. 張光謀,王文鋒,王興平,許重潔,張艷芬.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2009(01)
[5]缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)人肥大心肌細(xì)胞凋亡信號(hào)的變化[J]. 張華,劉惠亮,楊勝利,何作云,馮兵,王慧春,肖穎彬.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2009(01)
[6]新生兒缺氧缺血性腦病動(dòng)物模型的建立[J]. 莫國(guó)梁,余加林.  兒科藥學(xué)雜志. 2008(02)
[7]利多卡因?qū)θ毖?復(fù)氧后肝細(xì)胞鈣超載和細(xì)胞凋亡的影響[J]. 歐陽(yáng)文,段開(kāi)明,左新華.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(04)
[8]Caspase抑制劑對(duì)缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 趙軍,鄭世營(yíng),顧振綸,楊吉成,盛偉華.  蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(04)
[9]參麥注射液對(duì)缺氧心肌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 郝然,婁金麗,張?jiān)蕩X,鄭宏,黃啟福.  中國(guó)病理生理雜志. 2007(04)
[10]氧自由基、鈣超載與心肌缺血再灌注損傷[J]. 朱靜峰,黃冬.  云南醫(yī)藥. 2007(01)



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