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小鼠腸上皮細胞巖藻糖基化與新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎發(fā)生的關系

發(fā)布時間:2022-01-09 07:59
  目的:觀察新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)小鼠模型中腸上皮細胞巖藻糖基化水平的變化,對其中可能的機制進行探討。方法:將42只日齡10天的C57BL/6新生小鼠按隨機數(shù)字表法分為NEC組(n=21,通過人工喂養(yǎng)+缺氧+冷刺激方法建立NEC模型)和對照組(n=21,由母鼠喂養(yǎng),不做其他處理),建模3d后處死新生鼠。采用NEC病理損傷評分評估NEC建模效果;采用流式細胞技術檢測巖藻糖基化腸上皮細胞(F-ECs)和腸道固有層3型天然淋巴細胞(ILC3s)的比例;采用QPCR檢測固有層淋巴細胞白細胞介素-22(IL-22)、腸上皮細胞白細胞介素-22受體(IL-22R)、巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶2(Fut2)的mRNA表達水平;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測固有層淋巴細胞IL-22的蛋白表達水平。結(jié)果:成功建立NEC小鼠模型。流式細胞技術結(jié)果顯示,NEC模型組F-ECs百分比低于對照組(28.41%±8.28%vs.43.60%±13.58%),差異有統(tǒng)計數(shù)意義(P<0.05);NEC模型組腸道固有層ILC3s百分比也明顯低于對照組(11.59%±2.25%vs.20.14%±4.27%),... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

小鼠腸上皮細胞巖藻糖基化與新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎發(fā)生的關系


新生鼠建模期間一般情況

新生鼠,體重,對照組


圖 2 NEC 組、對照組新生鼠體重分析Fig.2 Weight comparison of NEC group and control group(3) P<0.001; (2) P<0.01compared with control group2.3 腸組織大體形態(tài)、病理形態(tài)觀察及病理損傷評分肉眼觀察,對照組腸管色澤粉嫩,彈性較好,無腸道積氣等表現(xiàn);NEC 模型組色澤暗淡,彈性較差,回盲部及以上呈串珠樣積氣改變。光鏡下觀察,對照組腸道結(jié)構完整連續(xù),絨毛高聳整齊,腺體排列規(guī)則;NEC 組固有層和黏膜下層斷裂分離,肌層變薄甚至斷裂,部分絨毛脫落消失,腺體排列紊亂,雙盲法病理學評分2.76±0.42 分(圖 3)。

病理形態(tài),流式細胞計數(shù),流式,百分比


18圖 3 對照組、NEC 組肉眼形態(tài)和病理形態(tài)比較Fig.3 Comparison of morphology and pathology of the control group and NEC group2.4 腸道上皮細胞 F-ECs 流式檢測流式細胞計數(shù)結(jié)果顯示,NEC 模型組 F-ECs 百分比(28.41%±8.28%)低于照組(43.60%±13.58%),差異有統(tǒng)計數(shù)意義(P<0.05,CD45 陰性、UEA-1 陽群為目標細胞,圖 4、圖 5)。


本文編號:3578292

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