小兒急性腸梗阻腸壞死A2B腺苷受體的表達(dá)及其臨床意義
本文關(guān)鍵詞:小兒急性腸梗阻腸壞死A2B腺苷受體的表達(dá)及其臨床意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:觀察并探討小兒急性腸梗阻腸壞死時(shí)腸黏膜上皮細(xì)胞A2B腺苷受體(A2B Adenosien Receptor,A2BAR)的表達(dá)變化及其可能的機(jī)制和臨床意義。方法:收集2014年9月-2015年10月以急性腸梗阻為首發(fā)癥狀急診入院的患兒42例,入院后急診行手術(shù)探查,術(shù)中見腸管顏色發(fā)黑、蠕動(dòng)消失考慮腸壞死,行腸切除腸吻合術(shù),術(shù)后病理均證實(shí)腸壞死,作為病變組;選擇20例消化道畸形患兒(如梅克爾憩室、腸重復(fù)畸形等),術(shù)前無發(fā)熱、感染及上呼吸道感染等其他原發(fā)病或合并癥,擇期行腸切除腸吻合術(shù),作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)技術(shù)檢測(cè)并觀察腸黏膜上皮細(xì)胞A2BAR及緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)情況,通過美國Aperio公司Scanscope數(shù)字病理掃描系統(tǒng)對(duì)圖像進(jìn)行半定量分析檢測(cè),檢測(cè)二者陽性反應(yīng)產(chǎn)物的平均灰度值。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)檢測(cè)兩組術(shù)前及術(shù)后7天的血清腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的濃度水平。通過蛋白印跡(Western Blot,WB)技術(shù)測(cè)定兩組腸黏膜上皮細(xì)胞p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen Activated Protein Kinase,p38MAPK)和磷酸化p38MAPK(phosphorylation of p38 Mitogen Activated Protein Kinase,p-p38MAPK)表達(dá)量。結(jié)果:1.病變組A2BAR染色強(qiáng)度強(qiáng)于對(duì)照組,陽性反應(yīng)產(chǎn)物較多,廣泛表達(dá)于腸黏膜上皮細(xì)胞頂端膜和基底膜上,對(duì)照組A2BAR表達(dá)極少,染色較淺,病變組平均灰度值明顯低于對(duì)照組(P0.001);2.病變組緊密連接蛋白Occludin陽性反應(yīng)產(chǎn)物較少,表現(xiàn)為染色較淺,表達(dá)水平下降,分布不均勻,連續(xù)性中斷,對(duì)照組緊密連接蛋白Occludin表達(dá)較多,染色較深,連續(xù)性完整,病變組平均灰度值明顯高于對(duì)照組(P0.001);3.病變組術(shù)前血清TNF-α濃度明顯高于對(duì)照組(P0.001);病變組經(jīng)手術(shù)治療原發(fā)病、術(shù)后積極抗感染補(bǔ)液對(duì)癥支持治療后,術(shù)后7天血清TNF-α濃度較術(shù)前明顯降低(P0.001);與對(duì)照組相比,病變組術(shù)后7天血清TNF-α濃度無明顯差異(P0.05)。4.與對(duì)照組相比,病變組腸黏膜上皮細(xì)胞中p38MAPK的表達(dá)量無明顯差異,而p-p38MAPK表達(dá)量明顯增高。5.相關(guān)性分析:病變組術(shù)前血清TNF-α濃度與A2BAR平均灰度值呈負(fù)相關(guān)(r=-0.694,P0.01),A2BAR平均灰度值與緊密連接蛋白Occludin平均灰度值呈負(fù)相關(guān)(r=-0.581,P0.01)。結(jié)論:1.小兒急性腸梗阻腸壞死時(shí),早期腸黏膜缺血缺氧引起TNF-α大量釋放,持續(xù)缺氧及高濃度TNF-α可繼發(fā)性誘導(dǎo)腸黏膜上皮細(xì)胞表面A2BAR表達(dá)量明顯增多;2.持續(xù)性腸缺血時(shí)A2BAR被激活后啟動(dòng)并活化細(xì)胞內(nèi)p38MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑,可能是緊密連接蛋白Occludin表達(dá)下降引起細(xì)菌和內(nèi)毒素移位的機(jī)制之一;3.A2BAR表達(dá)量增多可能參與了腸黏膜屏障功能損傷與破壞的病理生理過程,有望成為小兒急性腸梗阻潛在的治療靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:急性腸梗阻 腸壞死 A2B腺苷受體 Occludin TNF-α
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R725.7
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 常用縮寫詞中英文對(duì)照表10-12
- 前言12-15
- 1 材料和方法15-21
- 1.1 臨床資料研究對(duì)象15
- 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與實(shí)驗(yàn)儀器15-16
- 1.3 實(shí)驗(yàn)方法16-20
- 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
- 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-28
- 2.1 免疫組織化學(xué)觀察兩組腸黏膜上皮細(xì)胞 A2BAR 的表達(dá)情況21-22
- 2.2 免疫組織化學(xué)觀察兩組腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白 Occludin 的表達(dá)情況22-23
- 2.3 蛋白印記測(cè)定兩組腸黏膜上皮細(xì)胞 p38MAPK 和 p-p38MAPK 表達(dá)量23-24
- 2.4 兩組 A2BAR 與 Occludin 平均灰度值、血清 TNF-α濃度的比較24-27
- 2.5 相關(guān)性分析27-28
- 3 討論28-33
- 4 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-39
- 綜述39-51
- 參考文獻(xiàn)46-51
- 致謝51-52
- 在學(xué)期間研究成果52-53
- 個(gè)人簡歷53
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本文編號(hào):357776
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