目的:探討EV快速病原學(xué)診斷和基因分型方法;分析VP1序列變異與小兒中樞感染的關(guān)系。 方法:通過RT-PCR方法,采用通用引物檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒腦脊液中EV RNA;采用分型引物擴(kuò)增并測(cè)序EV的VP1部分序列并對(duì)比GENBANK的相關(guān)序列進(jìn)行型別鑒定,同時(shí)用NCBI上的BLAST軟件,對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析;采用型特異引物擴(kuò)增檢測(cè)臨床標(biāo)本中EV71的感染情況。 結(jié)果:腸道病毒在無菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染急性期CSF檢出率為74.6%,仍為小兒中樞感染的第一位病原體;利用分型引物可以擴(kuò)增分型其中62.0%陽性標(biāo)本,隨機(jī)抽取7條片斷進(jìn)行克隆測(cè)序并利用GENBANK分型全部成功,相關(guān)序列同源性均在97%以上;本研究測(cè)序獲得的VP1序列與GENBANK上記載的相關(guān)序列相比發(fā)生了1%～3%的變異,分析得到的4例定型為COXB3的VP1片斷序列,與基因序列最接近的strain Nancy（AF231764）相比,發(fā)現(xiàn)在第856氨基酸位點(diǎn)上由谷氨酰胺變異為組氨酸。中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒中2例由EV71引起,手、足、口病患兒中1例由EV71引起。 結(jié)論:①采用通用引物,RT-PCR可以快... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
引言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
論文參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào)：3544100