目的應(yīng)用全反式維甲酸（all-trans-retinoic acid,ATRA）誘導(dǎo)建立小鼠神經(jīng)管畸形（neuraltube defects,NTDs）動物模型,研究骨形成蛋白4（Bone morphogenetic protein 4,BMP4）與受體的相互作用關(guān)系及其介導(dǎo)的信號通路對NTDs發(fā)生發(fā)展的影響,探討B(tài)MP4在ATRA致NTDs中的可能作用機(jī)制。方法選取健康成熟昆明種小鼠,通過孕7.25-7.5天（E7.25-7.5d）時一次性胃飼50mg/kgATRA誘導(dǎo)建立NTDs動物模型,肉眼及解剖顯微鏡下觀察胎鼠畸形情況;通過半定量RT-PCR技術(shù)及原位雜交方法,檢測BMP4及其受體BMPRⅠA、BMPRⅠB、BMPRⅡ各基因在神經(jīng)管閉合過程不同階段的表達(dá)情況;應(yīng)用Western-blot方法對BMPs通路中的關(guān)鍵信號分子進(jìn)行檢測,并對其進(jìn)行綜合分析。結(jié)果1.過量ATRA具有明顯的胚胎致畸性,可致孕鼠子宮明顯充血淤血,造成無腦、脊柱裂等NTDs形態(tài)表現(xiàn)。2.BMP4 mRNA在對照組和實驗組胚胎神經(jīng)管組織中的表達(dá)均存在時間依賴性,并呈現(xiàn)隨時間而逐漸降低的變化,其Ⅰ型受體BMPRI... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

對照組及實驗組胚胎觀察

呈現(xiàn)典型上皮增生表現(xiàn)，即核仁清晰，胞質(zhì)嗜堿性強(qiáng)，無空泡形成(圖卜3a所示)，而實驗組胚胎神經(jīng)上皮很薄，神經(jīng)管未完全閉合，光鏡下觀察到神經(jīng)上皮細(xì)胞排列不甚規(guī)則，核仁不清晰，胞質(zhì)內(nèi)可見空泡，細(xì)胞間隙增寬(圖1一3b所示)。a(對照組)圖1一3x200b(實驗組)x200對照組及實驗組胚胎神經(jīng)管HE染色觀察.4討論NTDs是發(fā)病率極高的先天畸形，其胚胎發(fā)育規(guī)律和病理演變過程尚未闡明，目前對于其病因?qū)W的研究主要采用兩種方法:體外培養(yǎng)，包括細(xì)胞培養(yǎng)和全胚胎培養(yǎng)臼’一，6];活體研究，即在實驗動物的母體子宮內(nèi)進(jìn)行的畸胎學(xué)研究。就研究趨勢來看，第二種方法近年來更多的被國內(nèi)外學(xué)者所采用。神經(jīng)管發(fā)生是一個多因素參與的非常復(fù)雜的胚胎學(xué)事件，其中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)差錯，都可能導(dǎo)致NTDs的發(fā)生。動物實驗證實，誘發(fā)NTDs的方法有很多，大致可分為孕期缺乏葉酸、糖尿病妊娠、高溫、被動吸煙、抗癲癰藥、抗腫瘤藥、維生素類等【”一】

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【參考文獻(xiàn)】：
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