目的:TBX1基因是心臟發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,課題組前期研究發(fā)現(xiàn)其可能通過影響下游TGF-β2基因的表達參與先天性心臟病的發(fā)生。miRNA可通過與靶mRNA特異性結(jié)合,抑制其翻譯過程或使其降解,在轉(zhuǎn)錄后水平進行基因調(diào)控,與多種心臟疾病密切相關(guān)。生物信息學(xué)預(yù)測發(fā)現(xiàn)miR-193a-3p、miR-141-3p和miR-200a-3p可能與TGF-β2基因存在靶向結(jié)合。本研究通過靶向干擾TBX1基因的表達,檢測miR-193a-3p、miR-141-3p及miR-200a-3p的表達變化,探討TBX1基因在先天性心臟病發(fā)病的可能分子途徑。方法:1.將TBX1-siRNA和Negative control分別轉(zhuǎn)染至大鼠胚胎心肌細胞H9C2中,根據(jù)不同處理因素,分為TBX1-siRNA組與NC組,Western Blot檢測法檢測轉(zhuǎn)染48h后H9C2細胞TBX1的蛋白表達水平;2.收集轉(zhuǎn)染TBX1-siRNA或Negative control RNA 48h后的H9C2細胞,RT-PCR檢測miR-193a-3p、miR-141-3p、miR-200a-3p的表達水平。3.應(yīng)用SPSS21.0軟件... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

WB檢測TBX1-siRNA轉(zhuǎn)染H9C2細胞后TBX1的蛋白表達

RT-PCR檢測TBX1-siRNA轉(zhuǎn)染H9C2細胞后miRNA的表達，P＜0.05.

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3483516