目的:TBX1基因是心臟發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,課題組前期研究發(fā)現(xiàn)其可能通過影響下游TGF-β2基因的表達(dá)參與先天性心臟病的發(fā)生。miRNA可通過與靶mRNA特異性結(jié)合,抑制其翻譯過程或使其降解,在轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行基因調(diào)控,與多種心臟疾病密切相關(guān)。生物信息學(xué)預(yù)測發(fā)現(xiàn)miR-193a-3p、miR-141-3p和miR-200a-3p可能與TGF-β2基因存在靶向結(jié)合。本研究通過靶向干擾TBX1基因的表達(dá),檢測miR-193a-3p、miR-141-3p及miR-200a-3p的表達(dá)變化,探討TBX1基因在先天性心臟病發(fā)病的可能分子途徑。方法:1.將TBX1-siRNA和Negative control分別轉(zhuǎn)染至大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2中,根據(jù)不同處理因素,分為TBX1-siRNA組與NC組,Western Blot檢測法檢測轉(zhuǎn)染48h后H9C2細(xì)胞TBX1的蛋白表達(dá)水平;2.收集轉(zhuǎn)染TBX1-siRNA或Negative control RNA 48h后的H9C2細(xì)胞,RT-PCR檢測miR-193a-3p、miR-141-3p、miR-200a-3p的表達(dá)水平。3.應(yīng)用SPSS21.0軟件... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

WB檢測TBX1-siRNA轉(zhuǎn)染H9C2細(xì)胞后TBX1的蛋白表達(dá)

RT-PCR檢測TBX1-siRNA轉(zhuǎn)染H9C2細(xì)胞后miRNA的表達(dá)，P＜0.05.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]遺傳和表觀遺傳機(jī)制在先天性心臟病中的研究進(jìn)展[J]. 田廣烽,高慧,胡莎莎,舒強(qiáng).  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(03)
[2]孕期母血清miRNA-19b診斷胎兒先天性心臟病的初步評價(jià)[J]. 沙莉,朱莎莎,余章斌,韓樹萍.  心臟雜志. 2015(05)
[3]T-box基因家族與先天性心臟病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 王紅剛,李曉梅.  醫(yī)學(xué)綜述. 2013(14)
[4]miRNA調(diào)節(jié)心臟發(fā)育的信號網(wǎng)絡(luò)[J]. 劉懷鈺.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(19)
[5]TBX1與心臟發(fā)育[J]. 姚金翠,胡婭莉.  中國產(chǎn)前診斷雜志(電子版). 2008(02)



本文編號：3483516