microRNA let-7促進(jìn)腦白質(zhì)損傷中少突膠質(zhì)祖細(xì)胞遷移的體外研究
發(fā)布時間：2021-08-18 20:25
早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷（preterm white matter injury,PWMI）是早產(chǎn)兒出生后并發(fā)癥中腦損傷的主要類型。早產(chǎn)兒出生后由于反復(fù)缺血缺氧和炎癥反應(yīng)的發(fā)生,少突膠質(zhì)祖細(xì)胞（oligodendrocyte precursor cells,OPCs）在遷移和發(fā)育等方面受到嚴(yán)重干擾,進(jìn)一步造成髓鞘形成障礙,最終導(dǎo)致早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷。OPCs遷移受阻是已知許多脫髓鞘疾病的主要原因之一,因此確定早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷過程中的分子機(jī)制顯得尤為重要。小RNA（micro RNA）是內(nèi)源性非編碼小RNA,長度約為18–25個核苷酸,其在進(jìn)化中高度保守,在組織中高度特異,小RNA通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控在細(xì)胞遷移和代謝中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。OPCs的發(fā)育是一個高度協(xié)調(diào)的過程,受多種內(nèi)源因素和外源因素（如生長因子、遞質(zhì)受體和表觀遺傳）的調(diào)控,但對于調(diào)控OPCs遷移的分子機(jī)制的研究仍不明確。本文中,我們優(yōu)化了早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷小鼠模型中的OPCs體外培養(yǎng)流程,通過RNA測序和RT-PCR檢測,我們發(fā)現(xiàn)在PWMI模型中,micro RNA let-7家族表達(dá)水平下降,在體外過表達(dá)let-7可促進(jìn)OPCs的遷移。...
【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
PWMI模型優(yōu)化與檢測
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果 OPCs的培養(yǎng)方法，因Chen所用為轉(zhuǎn)基因胚胎期小鼠，而普通C57小鼠在出生后第3天才造模，其OPCs的培養(yǎng)較胚胎期困難，所以經(jīng)過反復(fù)探索我們改進(jìn)了若干條件（詳見實(shí)驗(yàn)方法），在體外建立了造模后小鼠OPCs的培養(yǎng)體系。在培養(yǎng)后第7天，大部分單個神經(jīng)干細(xì)胞聚集形成神經(jīng)干細(xì)胞球，自第7天至第31天（解離細(xì)胞球得到單細(xì)胞OPCs），Olig2-一種少突膠質(zhì)細(xì)胞譜系的標(biāo)記物-在上述階段的細(xì)胞球和單細(xì)胞的細(xì)胞核中均有表達(dá)，而干細(xì)胞標(biāo)記物SOX2在解離后第6天單細(xì)胞OPCs聚集成球后的陽性熒光成像，進(jìn)一步表明了OPCs干性的持續(xù)表達(dá)(圖3.2)。
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果16圖3.3PWMI中l(wèi)et-7a、let-7g表達(dá)降低A.對照組和PWMI組的樣品相關(guān)性熱圖矩陣（pearson相關(guān)系數(shù)均大于0.9）B.對照組和PWMI組的miRNAs差異聚類熱圖，表達(dá)量為log2(PWMI/Control)C.對照組和PWMI組中l(wèi)et-7a、let-7g差異聚類熱圖，表達(dá)量為log2(PWMI/Control)3.4PWMIOPCs中l(wèi)et-7前體轉(zhuǎn)錄水平變化我們通過RT-PCR檢測了PWMI模型OPCs中miRNAlet-7家族中幾個前體形式的表達(dá)，結(jié)果表明PWMI中l(wèi)et-7a1、let-7a2、let-7a3和let-7g的pri-miRNA表達(dá)量顯著降低（圖3.3）。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胎膜早破對胎齡<37周早產(chǎn)兒并發(fā)癥的影響[J]. 段順艷,孔祥永,徐鳳丹,呂紅艷,巨容,李占魁,曾淑娟,武輝,張雪峰,劉衛(wèi)鵬,劉芳,程紅斌,丁艷潔,陳鐵強(qiáng),許平,楊李紅,吳素靜,汪瑾,彭立,趙小林,丘惠嫻,溫偉溪,李瑩,李楠,文崢,郭果,王鳳,李改梅,李薇,趙曉英,許云波,陳文超,尹歡,王曉亮,單瑞艷,韓梅盈,楊春燕,封志純. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(07)
[2]Negative regulation of miRNA-9 on oligodendrocyte lineage gene 1 during hypoxic-ischemic brain damage[J]. Lijun Yang,Hong Cui,Ting Cao. Neural Regeneration Research. 2014(05)
本文編號：3350567
【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
PWMI模型優(yōu)化與檢測
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果 OPCs的培養(yǎng)方法，因Chen所用為轉(zhuǎn)基因胚胎期小鼠，而普通C57小鼠在出生后第3天才造模，其OPCs的培養(yǎng)較胚胎期困難，所以經(jīng)過反復(fù)探索我們改進(jìn)了若干條件（詳見實(shí)驗(yàn)方法），在體外建立了造模后小鼠OPCs的培養(yǎng)體系。在培養(yǎng)后第7天，大部分單個神經(jīng)干細(xì)胞聚集形成神經(jīng)干細(xì)胞球，自第7天至第31天（解離細(xì)胞球得到單細(xì)胞OPCs），Olig2-一種少突膠質(zhì)細(xì)胞譜系的標(biāo)記物-在上述階段的細(xì)胞球和單細(xì)胞的細(xì)胞核中均有表達(dá)，而干細(xì)胞標(biāo)記物SOX2在解離后第6天單細(xì)胞OPCs聚集成球后的陽性熒光成像，進(jìn)一步表明了OPCs干性的持續(xù)表達(dá)(圖3.2)。
浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果16圖3.3PWMI中l(wèi)et-7a、let-7g表達(dá)降低A.對照組和PWMI組的樣品相關(guān)性熱圖矩陣（pearson相關(guān)系數(shù)均大于0.9）B.對照組和PWMI組的miRNAs差異聚類熱圖，表達(dá)量為log2(PWMI/Control)C.對照組和PWMI組中l(wèi)et-7a、let-7g差異聚類熱圖，表達(dá)量為log2(PWMI/Control)3.4PWMIOPCs中l(wèi)et-7前體轉(zhuǎn)錄水平變化我們通過RT-PCR檢測了PWMI模型OPCs中miRNAlet-7家族中幾個前體形式的表達(dá)，結(jié)果表明PWMI中l(wèi)et-7a1、let-7a2、let-7a3和let-7g的pri-miRNA表達(dá)量顯著降低（圖3.3）。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胎膜早破對胎齡<37周早產(chǎn)兒并發(fā)癥的影響[J]. 段順艷,孔祥永,徐鳳丹,呂紅艷,巨容,李占魁,曾淑娟,武輝,張雪峰,劉衛(wèi)鵬,劉芳,程紅斌,丁艷潔,陳鐵強(qiáng),許平,楊李紅,吳素靜,汪瑾,彭立,趙小林,丘惠嫻,溫偉溪,李瑩,李楠,文崢,郭果,王鳳,李改梅,李薇,趙曉英,許云波,陳文超,尹歡,王曉亮,單瑞艷,韓梅盈,楊春燕,封志純. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(07)
[2]Negative regulation of miRNA-9 on oligodendrocyte lineage gene 1 during hypoxic-ischemic brain damage[J]. Lijun Yang,Hong Cui,Ting Cao. Neural Regeneration Research. 2014(05)
本文編號：3350567
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