目的：脆性X綜合征（Fragile X syndrome,FXS）是一種最常見的智力障礙神經(jīng)發(fā)育疾病,Fmr1基因沉默導致其編碼產(chǎn)物脆性X智力低下蛋白（Fragile X mental retardation protein,FMRP）表達減少或者缺失,罹患者出現(xiàn)以樹突棘發(fā)育障礙為主的特征性神經(jīng)病理表現(xiàn)和相關臨床癥狀。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF）是腦內(nèi)調(diào)控神經(jīng)元生存、分化、突觸可塑功能形成和維持的最重要神經(jīng)生長因子,它的這些作用主要通過激活其高親和力受體酪氨酸激酶B（tropomyosin-related kinase B,TrkB）及其下游信號通路來完成,但是BDNF-TrkB信號通路在FXS是否改變?其改變是否參與FXS樹突棘發(fā)育障礙和病理行為產(chǎn)生?是否可以作為矯正FXS樹突棘發(fā)育障礙和相關行為異常的靶點?目前尚未得知。本文重點研究FXS動物模型Fmr1基因敲除小鼠（Fmr1 KO）出生后發(fā)育期多個關鍵時間節(jié)點的BDNF/TrkB信號通路改變,及與Fmr1 KO樹突棘發(fā)育和異常行為之間的聯(lián)系,并嘗試用BDNF模擬... 

【文章來源】：武漢科技大學湖北省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

WT和Fmr1KO小鼠發(fā)育期隨年齡依賴的BDNF、TrkB的蛋白水平以及BDNFmRNA水平A:WT、KO鼠P7,P10,P14,P21,P30天海馬區(qū)BDNF和TrkBwesternblot結果圖示例

17圖 3.2 WT 和 Fmr1 KO 小鼠發(fā)育期隨年齡依賴的 TrkB 信號通路關鍵蛋白水平變化A: WT、KO 鼠 P7, P10, P14, P21, P30 天海馬區(qū) PLCγ1 信號通路關鍵蛋白 western blot 結果圖示例。B: p-PLCγ1/ PLCγ1 及 p-CaMKⅡ/ CaMKⅡ水平，在 P7-P30，KO 小鼠 p-PLCγ1/ PLCγ1顯著下降，在 P14-P30， p-CaMKⅡ/ CaMKⅡ顯著下降。C: WT、KO 鼠 P7, P10, P14, P21, P30天海馬區(qū) PI3K 信號通路關鍵蛋白 western blot 結果圖示例。D: p-PI3K/PI3K 及 p-Akt/Akt 水平，KO 與 WT 比無顯著差異。E: WT、KO 鼠 P7, P10, P14, P21, P30 天海馬區(qū) Erk 信號通路關鍵蛋白及 CREB 的 western blot 結果圖示例。F: p-Erk/Erk 水平，無顯著差異。G:p-CREB/CREB 水平，無顯著差異。WT 為對照組，n=5，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。3.3 Fmr1 KO 小鼠出生后發(fā)育期海馬中出現(xiàn)大量不成熟樹突絲為了研究 Fmr1 KO 小鼠出生后發(fā)育關鍵期神經(jīng)元樹突棘的生長發(fā)育情況，我們通過高爾基染色分別檢測了 Fmr1 KO 小鼠和 WT 對照組小鼠在 P7，P10，P14，

武漢科技大學碩士學位論文P21，P30 天海馬中樹突棘的形態(tài)和數(shù)量變化。實驗結果顯示，在 Fmr1 KO 小鼠P14-P30 天，海馬中樹突棘的密度顯著升高（圖 3.3A-B）, 單個樹突棘的平均長度也隨年齡的變化而增加（圖 3.3C），進一步對樹突棘的形態(tài)進行分析，分別統(tǒng)計每種形態(tài)的樹突棘所占的比例，發(fā)現(xiàn)在 Fmr1 KO 小鼠 P14-P30 天中短粗狀樹突棘數(shù)量無顯著改變，蘑菇狀樹突棘的數(shù)量較 WT 小鼠顯著降低，而細絲狀樹突棘數(shù)量較WT 小鼠顯著升高（圖 3.3D）。以上結果說明出生后發(fā)育關鍵期 Fmr1 KO 小鼠的海馬區(qū)樹突棘發(fā)育異常，表現(xiàn)為未成熟樹突絲數(shù)量增多，長度增加，形態(tài)幼稚，成熟樹突棘數(shù)量減少。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]突觸后致密蛋白95（PSD95）和突觸小泡蛋白在神經(jīng)元成熟過程中的分布[J]. 柴繼俠,王元元,李徽徽,賀文欣,鄒維艷,周艷梅,胡小冬,柴強.  細胞與分子免疫學雜志. 2016(12)
[2]長時程抑制在學習記憶中的作用及其分子機制的研究進展[J]. 占祖兵,杜嚴華.  生物物理學報. 2004(05)



本文編號：3339907