目的:本實(shí)驗(yàn)旨在研究染色質(zhì)重構(gòu)復(fù)合物核心催化亞基（Brg1）對(duì)哮喘小鼠氣道黏液高分泌的影響及探討其可能作用機(jī)制。方法:將6⁸周齡SPF級(jí)雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1^-/-小鼠（AEC2s上特異性條件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）隨機(jī)分為四組:Control（正常對(duì)照組）、Asthma（哮喘組）、Brg1^-/-（Brg1敲低對(duì)照組）和Brg1^-/-+Asthma（Brg1敲低后構(gòu)建哮喘模型組）,每組10只。Asthma組和Brg1^-/-+Asthma組用雞卵清蛋白OVA制備過敏性哮喘模型,對(duì)照組用生理鹽水代替。于最后一次霧化后24h內(nèi)收取建模標(biāo)本。PAS染色檢測(cè)各組小鼠氣道杯狀細(xì)胞的增生情況和黏液分泌量;ELISA檢測(cè)小鼠支氣管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC和細(xì)胞因子IL-13水平;熒光定量PCR檢測(cè)肺組織勻漿黏蛋白MUC5AC水平;免疫組化檢測(cè)各組小鼠氣道黏蛋白MUC5AC和STAT6的表達(dá)和定量;Western blot檢測(cè)各組小鼠肺組織中STAT6、p-STA... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠肺組織PAS染色Fig.1PASstainingofeachgroup（A為各組小鼠肺組織PAS染色，B為其統(tǒng)計(jì)結(jié)果，*P<0.01與Control組比較，#P<0.01與Asthma組比較）

圖 2 各組小鼠 BALF 上清液中 MUC5AC、IL-13 含量Fig.2 Expression of MUC5AC and IL-13 in BALF of each group（A 為 BALF 中 MUC5AC 表達(dá)統(tǒng)計(jì)，B 為 BALF 中 IL-13 表達(dá)統(tǒng)計(jì)，*P<0.01 與 Control 組比較，#P<0.01 與 Asthma 組比較）2.3 各組小鼠氣道上皮黏蛋白 MUC5AC 表達(dá)情況MUC5AC 免疫組化染色的陽(yáng)性信號(hào)為氣道上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜顯示出黃色或黃棕色顆粒。與 Control 組（12.29±3.336）比較，免疫組化染色顯示 Asthma組（44.62±11.76）氣道上皮細(xì)胞中 MUC5AC 高表達(dá)（P<0.01），而 Brg1-/-+Asthma組（22.71±3.510）氣道上皮細(xì)胞中 MUC5AC 較 Asthma 組表達(dá)顯著減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。（A）Control Asthma（B）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文圖 3 各組小鼠氣道上皮黏蛋白 MUC5AC 表達(dá)情況（200×）Fig.3 Expression of mucin MUC5AC in each group(magnification: ×200).（A為MUC5AC免疫組化染色，B為其統(tǒng)計(jì)結(jié)果，*P<0.01 與Control組比較，#P<0.01 與組比較）2.4 各組小鼠肺組織 MUC5AC mRNA 表達(dá)情況通過 q-PCR 檢測(cè)黏蛋白 MUC5AC mRNA 的表達(dá)發(fā)現(xiàn)：Asthma 組小鼠中黏蛋白 MUC5AC mRNA 與 Control 組比較，表達(dá)明顯增高，差異具有統(tǒng)義( P<0.01) 。與 Asthma 組比較，Brg1-/-+Asthma 組 MUC5AC mRNA 表降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.01)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]針刺對(duì)哮喘模型大鼠肺組織中TGF-β1表達(dá)的調(diào)控[J]. 韓君萍,李雙,趙葉,楊金華,虞躍躍,孫娜,崔建美.  中國(guó)針灸. 2017(07)
[2]Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞Brg1基因條件敲低小鼠的基因型鑒定[J]. 司道祝,彭單伊,張榮,夏耘秋,牛超,茍好,劉姜,王莉佳,田代印,劉恩梅,鄒琳,符州.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2017(03)



本文編號(hào)：3289773