目的胚胎心臟發(fā)育和先心病的發(fā)生受多種遺傳因素共同調(diào)節(jié),TBX1（T-box factor1）基因、轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）信號通路都已被證實(shí)是其中較為重要的環(huán)節(jié)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),TBX1基因表達(dá)下調(diào)對TGF-β2及其通路的靶向調(diào)控可能是通過下調(diào)miR-193a-3p的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的,但這條通路如何實(shí)現(xiàn)細(xì)胞水平的調(diào)控、對細(xì)胞功能有何影響目前仍不明確。鑒于許多miRNA對相關(guān)生物學(xué)活動(dòng)的調(diào)控都依賴于對細(xì)胞的增殖或凋亡的調(diào)節(jié),本研究將從miR-193a-3p對大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2增殖和凋亡的影響入手,推斷其參與心臟發(fā)育和先天性心臟病發(fā)病的可能作用機(jī)制。方法（1）將miR-193a-3p mimics,miR-193a-3p inhibitor分別轉(zhuǎn)染至大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2,qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)染效率。（2）以CCK-8法分別檢測miR-193a-3p過表達(dá)和表達(dá)減低后細(xì)胞增殖能力的變化。（3）流式細(xì)胞術(shù)（Annexin V-FITC/PI雙染法）檢測轉(zhuǎn)染48h后心肌細(xì)胞的凋亡水平。（4）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS19.0軟件分析... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1miR-193a-3pmimics致miR-193a-3p表達(dá)增高（**P<0.01，n=3）

2miR-193a-3pinhibitor致miR-193a-3p表達(dá)減低（**P<0.01，n=3）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士論文10圖3.1.2miR-193a-3pinhibitor致miR-193a-3p表達(dá)減低（**P<0.01，n=3）3.2CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性3.2.1miR-193a-3p過表達(dá)抑制H9C2細(xì)胞增殖依據(jù)細(xì)胞生長曲線形態(tài)，可見在大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2中，NC組H9C2心肌細(xì)胞的增殖水平與empty組大致相當(dāng)；而與NC組相比，轉(zhuǎn)染miR-193a-3pmimics后的細(xì)胞增殖能力減低(第48h減低40.8%，P＜0.01；72h減低39.2%，P＜0.01；96h減低35.9%，P＜0.01)(圖3.2.1)。說明miR-193a-3p過表達(dá)對H9C2細(xì)胞的增殖有抑制作用。圖3.2.1miR-193a-3p過表達(dá)致H9C2細(xì)胞增殖受抑制（**P<0.01，n=3）********

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微小RNA-21-5p促進(jìn)梗死心肌纖維化加重心力衰竭的作用及機(jī)制[J]. 孟華,安松濤,劉軍,李文博,陳巖.  中國心血管雜志. 2019(06)
[2]微小RNA-760在H9c2細(xì)胞中的表達(dá)及對凋亡的影響[J]. 衛(wèi)訓(xùn),汪鳳儀,趙茂林.  中國心血管雜志. 2019(06)
[3]循環(huán)非編碼RNA作為生物標(biāo)志物在心血管疾病中作用的研究進(jìn)展[J]. 馬建君,黃萍.  新醫(yī)學(xué). 2019(10)
[4]MicroRNA標(biāo)志物在早期診斷室間隔缺損中的價(jià)值[J]. 紀(jì)龍,王小卉,劉雪貞,劉華民,張倩倩,楊偉麗,韓東洋,李棟.  中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2019(21)
[5]先天性心臟病胎兒母體血清中的microRNA表達(dá)譜及其診斷意義[J]. 顧卉,陳驪珠,薛佳,黃天楚,袁正偉.  發(fā)育醫(yī)學(xué)電子雜志. 2019(01)
[6]TBX1基因可能通過調(diào)控Tgfb2基因的表達(dá)參與心臟發(fā)育及先天性心臟病的發(fā)生[J]. 程菲,姜紅堃.  中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué). 2018(01)

碩士論文
[1]靶向干擾TBX1基因使miR-193a-3p、miR-141-3p及miR-200a-3p的表達(dá)下調(diào)[D]. 謝美君.中國醫(yī)科大學(xué) 2019
[2]miR-193a-3p、miR-200a-3p、miR-141-3p對大鼠H9C2心肌細(xì)胞中TGF-β2基因表達(dá)的影響[D]. 朱斌路.中國醫(yī)科大學(xué) 2019



本文編號：3287659