第一部分人偏肺病毒在不同細(xì)胞的復(fù)制動(dòng)力學(xué)目的尋找出適合培養(yǎng)和分離hMPV的細(xì)胞。方法采用hMPV A亞型標(biāo)準(zhǔn)株hMPV/NL/1/00和B亞型標(biāo)準(zhǔn)株hMPV/NL/1/99分別接種于Vero細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、A549細(xì)胞和HEp-2細(xì)胞,接種后逐日觀察CPE,并于第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天從細(xì)胞中提取RNA并作逆轉(zhuǎn)錄,所獲得的cDNA采用hMPV型特異性的探針及引物進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR的檢測(cè)。結(jié)果接種病毒后3天可在Vero細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞和A549細(xì)胞中觀察到CPE,不同亞型的hMPV所致的CPE沒有差別,但在Vero-E6細(xì)胞中CPE更易觀察。hMPV可以在Vero細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞和LLC-MK2細(xì)胞中穩(wěn)定有效地復(fù)制,不能在A549細(xì)胞和HEp-2細(xì)胞中穩(wěn)定傳代,兩種亞型的hMPV病毒載量均在Vero細(xì)胞中達(dá)到最高。結(jié)論Vero細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞和Vero-E6細(xì)胞均是適合培養(yǎng)和分離hMPV的細(xì)胞。A549細(xì)胞和HEp-2細(xì)胞不適合作為常規(guī)培養(yǎng)hMPV的細(xì)胞。第二部分用不同細(xì)胞從鼻咽分... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

hMPV感染細(xì)胞后病變(×200)

18圖 1-2 hMPV 在不同細(xì)胞的復(fù)制動(dòng)力學(xué)Figure 1-2 replication kinetics of hMPV in different cell lines3 討論hMPV 自 2001 年首次從呼吸道感染患兒分離距今已有九年，全球范圍內(nèi)的流行病學(xué)資料顯示，hMPV 是一種常見的呼吸道病毒病原，可致各年齡階段人群呼吸

27圖 2－1 標(biāo)本接種細(xì)胞后表現(xiàn)(×200)Figure 2-1 appearance after specimen inoculating cells(×200)ock Vero cells;B,C:3 days after specimen inoculating cells ;D:mock Vero-E6 cells;E,F:3ys after specimen inoculating cells;G:mock LLC-MK2 cells;H,I:3 days after specimenculating cells;J:mock A549 cells;K,L:3 days after specimen inoculating cells;M:mock-2 cells;N,O:3 days after specimen inoculating cells.No CPE was observed in five cells.


本文編號(hào)：3287149