目的探討沉默膜聯(lián)蛋白A2（Anx A2）對肺炎支原體（MP）處理后人氣道上皮細(xì)胞H292表皮生長因子受體（EGFR）/核因子κB（NF-κB）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及黏蛋白表達(dá)的影響。方法將H292細(xì)胞分為對照組、MP組、NC-si RNA+MP組和Anx A2 si RNA+MP組。MP組上皮細(xì)胞采用5μg/m L MP抗原孵育2 h。NC-si RNA+MP組和Anx A2 si RNA+MP組細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染NC-si RNA和Anx A2 si RNA 24 h后用MP抗原刺激2 h。MTT法檢測各組細(xì)胞活性;實時熒光定量PCR（q RT-PCR）檢測各組細(xì)胞中Anx A2 m RNA的表達(dá)水平;Western blot法檢測各組細(xì)胞Anx A2、磷酸化EGFR（p-EGFR）、磷酸化p65 NF-κB（p-p65 NF-κB）的表達(dá)水平;酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測黏蛋白5AC（MUC5AC）和黏蛋白5B（MUC5B）的分泌。結(jié)果 MP組和NC-si RNA+MP組細(xì)胞活性低于對照組（P<0.05）,Anx A2 si RNA+MP組細(xì)胞活性高于MP組和NC-si RNA+MP組,但仍低于對照組... 

【文章來源】：中國當(dāng)代兒科雜志. 2017,19(07)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

MTT法檢測各組H292細(xì)胞活性（n=3）

圖3Westernblot檢測各組H292細(xì)胞AnxA2蛋白表達(dá)上圖為蛋白電泳條帶圖，下圖為統(tǒng)計圖（n=3）。a示與對照組比較，P<0.05；b示與MP組比較，P<0.05；c示與NC-siRNA+MP組比較，P<0.05。0.80.60.40.20a,b,c對照組MP組NC-siRNA+MP組AnxA2siRNA+MP組AnxA2β-actin對照組MP組NC-siRNA+MP組AnxA2siRNA+MP組38.6KD42KDnxA2A白相對表達(dá)量蛋p-EGFREGFRp-p65p65β-actin對照組MP組NC-siRNA+MP組AnxA2siRNA+MP組134.3kD134.3kD65kD65kD42kD圖4Westernblot檢測各組H292細(xì)胞p-EGFR和p-p65NF-κB蛋白表達(dá)電泳圖

光密度值計算相對表達(dá)量。實驗獨立重復(fù)3次。1.10統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組均數(shù)的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q法，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1AnxA2siRNA轉(zhuǎn)染對H292細(xì)胞存活的影響與對照組比較，MP組和NC-siRNA+MP組細(xì)胞活性明顯降低（P<0.05），AnxA2siRNA+MP組細(xì)胞活性均高于MP組和NC-siRNA+MP組，但仍低于對照組（P<0.05），NC-siRNA+MP組細(xì)胞活性與MP組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見圖1，表1。圖1MTT法檢測各組H292細(xì)胞活性（n=3）0.50.40.30.20.10DO值1234天數(shù)（d）對照組MP組NC-siRNA+MP組AnxA2siRNA+MP組


本文編號：3243752