本文關(guān)鍵詞：早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受與腸道菌群相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：早產(chǎn)兒由于消化系統(tǒng)尚未完全發(fā)育成熟,胃腸分泌能力低下、胃腸功能調(diào)節(jié)差等多種因素,在喂養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)喂養(yǎng)不耐受(feeding intolerance,FI)。相關(guān)研究顯示,腸道微生物異常定植在早產(chǎn)兒FI發(fā)病中可能起著至關(guān)重要的作用。目前臨床上治療新生兒FI的促動力藥以微量紅霉素(erythromycin,EM)副作用小而使用最為廣泛。近年有文獻(xiàn)報(bào)道長期使用EM可影響腸道正常菌群的定植,短期使用EM是否影響FI患兒的腸道菌群定植需進(jìn)一步研究。因此,本研究應(yīng)用變性梯度凝膠電泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技術(shù),從微生物學(xué)的角度分析比較FI早產(chǎn)兒與健康早產(chǎn)兒腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的多樣性及相似性;并采用SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),分析FI早產(chǎn)兒經(jīng)短期微量EM治療前后腸道菌群變化情況。為臨床醫(yī)生認(rèn)識腸道微生物變化在早產(chǎn)兒FI發(fā)病中的作用及合理使用EM治療FI提供理論依據(jù)。目的:分析比較FI早產(chǎn)兒與健康早產(chǎn)兒腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的多樣性及相似性;并觀察比較FI早產(chǎn)兒經(jīng)短期微量EM治療前后腸道乳酸桿菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌和糞腸球菌相對表達(dá)量水平。方法:1.以2013年11月至2014年9月在第四軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院兒科新生兒病房診斷為FI的早產(chǎn)兒為FI組。選擇與FI組胎齡、日齡、出生體重相匹配的非FI早產(chǎn)兒作為對照組。采集出現(xiàn)FI時(shí)和同時(shí)間段對照組的糞便標(biāo)本,進(jìn)行16Sr DNAV3區(qū)擴(kuò)增和DGGE,從而分析比較兩組間腸道菌群的多樣性及相似性;2.提取30例FI組和10例對照組的糞便,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析兩組腸道乳酸桿菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和糞腸球菌相對表達(dá)量水平;3.觀察比較FI組經(jīng)短期微量EM治療前后腸道四種細(xì)菌的相對表達(dá)水平。結(jié)果:1.細(xì)菌群落多樣性檢測顯示FI組的多樣性指數(shù)香農(nóng)-維納指數(shù)(Shannon-Wiener Index,H)、豐度(Richness,S)、均衡度指數(shù)(Evenness Index,E)和辛普森多樣性指數(shù)(Simpson's diversity Index,D)均低于對照組;相似性矩陣圖顯示組內(nèi)菌群相似性較組間高;2.FI組糞便乳酸桿菌和糞腸球菌相對表達(dá)量水平低于對照組(p0.01),大腸桿菌和肺炎克雷伯菌相對表達(dá)量水平高于對照組(p0.01);3.FI組經(jīng)短期微量EM治療后,其腸道大腸桿菌及肺炎克雷伯氏菌表達(dá)水平較治療前降低(p0.01),糞腸球菌和乳酸桿菌表達(dá)水平較治療前升高(p0.01)。結(jié)論:1.腸道微生物群落多樣性指數(shù)的降低及群落結(jié)構(gòu)紊亂可能是引起早產(chǎn)兒FI的重要因素;2.FI患兒存在腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào);3.短期微量EM的使用既能改善FI早產(chǎn)兒胃腸功能,又不影響生命早期腸道微生物定植。
【關(guān)鍵詞】：早產(chǎn)兒 喂養(yǎng)不耐受 DGGE 腸道菌群 紅霉素
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R722.6
【目錄】：

• 縮略詞表6-9
• 中文摘要9-11
• 英文摘要11-14
• 前言14-16
• 文獻(xiàn)回顧16-27
• 第一部分 應(yīng)用PCR-DGGE研究喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道微生物群落多樣性27-40
• 0 引言27-28
• 1 材料28-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對象28
• 1.2 糞便標(biāo)本的收集，處理28
• 1.3 主要試劑和材料28-29
• 1.4 主要儀器29-30
• 1.5 主要溶液及試劑配制30-32
• 2 方法32-35
• 2.1 糞便基因組DNA提取32-33
• 2.2 糞便基因組 16SrDNAV3 區(qū)PCR擴(kuò)增33
• 2.3 DGGE電泳步驟33-34
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法34-35
• 3 結(jié)果35-38
• 3.1 實(shí)驗(yàn)對象的臨床特征35
• 3.2 糞便基因組 16SrDNA V3 區(qū)PCR擴(kuò)增35-36
• 3.3 DGGE電泳圖36
• 3.4 泳道/條帶識別圖36-37
• 3.5 相似性矩陣圖37-38
• 3.6 細(xì)菌群落多樣性分析38
• 4 討論38-40
• 第二部分 應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群變化40-49
• 0 引言40-41
• 1 材料41
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對象41
• 1.2 主要試劑和儀器41
• 2 方法41-43
• 2.1 引物合成及溶解41-42
• 2.2 熒光實(shí)時(shí)定量PCR42-43
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法43
• 3 結(jié)果43-46
• 3.1 實(shí)驗(yàn)對象的臨床特征43
• 3.2 目的基因重復(fù)性檢驗(yàn)43-44
• 3.3 目的基因擴(kuò)增曲線及溶解曲線44-45
• 3.4 目的基因相對表達(dá)量比較45-46
• 4 討論46-49
• 第三部分 微量EM對喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群的影響49-52
• 0 引言49
• 1 材料49
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對象49
• 1.2 實(shí)驗(yàn)干預(yù)措施49
• 2 方法49
• 3 結(jié)果49-50
• 3.1 實(shí)驗(yàn)對象的臨床特征49-50
• 3.2 目的基因相對表達(dá)量比較50
• 4 討論50-52
• 小結(jié)52-53
• 參考文獻(xiàn)53-63
• 個(gè)人簡歷和研究成果63-64
• 致謝64

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受與腸道菌群相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：323918