發(fā)布時間：2021-06-18 10:42

　　目的:培養(yǎng)、純化以獲得較高純度的大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞（O2A）,觀察各個時期細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;在模擬缺氧條件下培養(yǎng)不同的時間,觀察O2A在缺氧條件下的形態(tài)學(xué)變化,采用免疫組化和Western blot等技術(shù),測定各個缺氧時間段Tau蛋白的強度,探索缺氧對O2A Tau蛋白的影響。方法:采用兩次恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)法培養(yǎng)、純化O2A,A2B5免疫熒光染色法進行細(xì)胞鑒定,倒置熒光顯微鏡拍照,并觀察計算細(xì)胞純度。以低糖缺氧環(huán)境模擬體內(nèi)缺氧缺血狀態(tài),建立大鼠O2A體外缺氧模型,觀察O2A在各個時間點的形態(tài)學(xué)變化,并開展Western blot和免疫組化實驗,利用激光共聚焦顯微鏡測定熒光強度,反映Tau蛋白量的變化。結(jié)果:純化后O2A細(xì)胞胞體呈圓形,有單極或雙極突起,形成克隆球,A2B5標(biāo)記陽性,免疫熒光鑒定細(xì)胞純度可達85%以上。隨著暴露在低糖缺氧環(huán)境中時間的延長,O2A細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,突起逐漸縮短,免疫熒光強度和灰度值均逐漸減弱,Tau蛋白量呈減少趨勢。結(jié)論: 1.通過體外進行純化、培養(yǎng),可以獲得較高純度的O2A細(xì)胞;2.隨著低糖缺氧時間的延長,O2A形態(tài)發(fā)生變化;到缺氧12小時,大部分的O2... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重懸后混合膠質(zhì)細(xì)胞大多數(shù)細(xì)胞為單細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞較透亮

混合培養(yǎng)第2d細(xì)胞貼滿培養(yǎng)瓶底壁，部分細(xì)胞開始鋪展成片

混合培養(yǎng)第3d細(xì)胞開始出現(xiàn)分層現(xiàn)象

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3236520