[目的]探討Sortilin介導(dǎo)的proNGF凋亡前信號與大鼠神經(jīng)管畸形發(fā)育的關(guān)系。[方法]成年3.5～4月清潔級大鼠,體重200～220g,于下午18∶00按雌雄2∶1合籠,次日晨8∶00取出,作精子涂片、鏡檢并照相。查見精子者定為孕期胚胎第E1d,前一天18∶00為第E0d,依此類推。將孕鼠隨機分為2組:對照組和實驗組,其中對照組和實驗組又各自分為E14d、E15d、E16d、E17d、E18d、E19d、E20d和E21d組,每小組10只胎鼠,5只用于免疫組織化學(xué)實驗,另5只用于RT-PCR實驗。在實驗組,將全反式維甲酸溶于橄欖油內(nèi),按50mg/kg于孕期E10d時一次性胃飼孕鼠,造成孕鼠胚胎出現(xiàn)神經(jīng)管畸形;對照組孕鼠始終不作任何處理。對照組及實驗組大鼠在相應(yīng)時間點取材后,采用免疫組織化學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)檢測Sortilin、proNGF和p75在蛋白和基因水平的表達及變化情況。[結(jié)果]1.大鼠懷孕后10天以50mg/kg體重一次性灌服過量全反式維甲酸可導(dǎo)致神經(jīng)管畸形。2.Sortilin蛋白在E14d、E15d的正常對照組神經(jīng)管套層中有廣泛表達,陽性細胞呈小、圓形。E... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

畸形圖片

.5%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳檢測mRNA完整性結(jié)果(正常組14一21大)。鼠胚胎神經(jīng)管正常、畸形發(fā)育過程中各基因的表lin、proNGF、p75及內(nèi)參基因p一aetin的mRNA在正常組及維甲品中均有其mRNA的表達，得到目的基因片段在1%瓊脂糖凝膠擴增條帶，與預(yù)期的片段長度一致(圖3)。曰..目，，、二S。“‘二“一日口留{OOJ叩~


本文編號：3234302