目的:通過(guò)探索和比較不同的感染源、接種方式、檢測(cè)方法和其它輔助措施的感染效果,進(jìn)一步優(yōu)化新生期樹(shù)鼩感染HBV模型。方法:第一部分.優(yōu)化感染源,制備的多種感染源主要包括:1.乙肝患者單份血清或多份混合血清;2.已證實(shí)感染了HBV的樹(shù)鼩血清;3.分泌HBV顆粒的HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)液上清;4.含HBV基因組的質(zhì)粒pT-HBV1.3;5.經(jīng)過(guò)純化的乙肝患者血清。第二部分.優(yōu)選接種方式,主要的接種方式包括:1.單純皮下注射;2.單純腹腔注射;3.皮下+腹腔注射;4.靜脈+腹腔注射;5.經(jīng)皮直接肝注射;6.剖腹經(jīng)脾臟肝注射。第三部分.優(yōu)選適合檢測(cè)樹(shù)鼩體內(nèi)HBV感染標(biāo)志的方法,主要包括:1.應(yīng)用FQ-PCR檢測(cè)血清和肝組織HBV DNA;2.應(yīng)用ELISA定性檢測(cè)血清樣品的HBV免疫學(xué)標(biāo)志（乙肝兩對(duì)半）;3.應(yīng)用TRFIA定量檢測(cè)血清樣品HBsAg;4.應(yīng)用Dot blot方法檢測(cè)肝組織的HBV DNA;5.用電子顯微鏡觀(guān)察血清和肝組織的HBV顆粒;6.用免疫組化方法檢測(cè)肝組織的HBsAg和HBcAg;7.用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察肝組織病理變化。第四部分.探索提高感染效率的其它輔助措施,主要包括:... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

1.3HBV質(zhì)粒圖譜

加入 20ml 洗滌緩沖液（Wml 阻斷緩沖液（Blocking Bul 抗體液（Antibody Solution，37℃搖床孵育 30min。ml 洗滌緩沖液（Washing Bufl 檢測(cè)緩沖液（Detection Buf于兩層保鮮膜中，趕走氣泡7℃曝光 40min~1h，顯影。 等方法證實(shí)已感染 DHBV 的rn blot 檢測(cè)結(jié)果如圖 2。 →1 2 3 4 5

肝組織總 DNA），血清 HBsAg 偶現(xiàn)弱陽(yáng)性。本組動(dòng)物的血清未出現(xiàn) HBsAb。. 經(jīng)巢氏 PCR (nPCR) 法分析 HBV 基因型（A~F 型），結(jié)使用較多的單人血清的 HBV 基因型均為 B 型，所檢測(cè)的長(zhǎng)期感染動(dòng)物（其中1只為傳代感染）的血清，結(jié)果同樣顯。見(jiàn)圖 3。M 1 2 3 4 5 6 7

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]樹(shù)鮈資源的開(kāi)發(fā)利用與標(biāo)準(zhǔn)化研究——我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源建設(shè)發(fā)展戰(zhàn)略探討[J]. 角建林,劉汝文,陳麗玲,李波,何保麗,鄭紅,沈培清.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2009(07)
[2]Interaction of hepatitis C virus envelope glycoprotein E2 with the large extracellular loop of tupaia CD81[J]. Hubert E Blum,Thomas F Baumert.  World Journal of Gastroenterology. 2009(02)
[3]丙型肝炎病毒感染離體培養(yǎng)樹(shù)鼩肝細(xì)胞模型初探[J]. 閔峰,王素美.  肝臟. 2008(03)
[4]地高辛標(biāo)記探針Southern印跡雜交技術(shù)要點(diǎn)及改進(jìn)[J]. 劉立鴻,許璐,汪凱,張富春,馬正海.  生物技術(shù)通報(bào). 2008(03)
[5]用人工繁育的圍生期和幼年樹(shù)鼠句感染人乙型肝炎病毒的初步研究[J]. 梁亮,李瑗,楊春,曹驥,蘇建家,陳茂偉,班克臣,歐超,段小嫻,岳惠芬.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2006(08)
[6]隱匿性乙型肝炎病毒感染[J]. 陳常云,武堅(jiān)銳,朱新宇,王守義.  中華肝臟病雜志. 2005(11)
[7]丙型肝炎病毒體外可感染樹(shù)鼩肝細(xì)胞[J]. 趙西平,田展飛,陳義春,楊春,田德英,楊東亮,郝連杰.  中華肝臟病雜志. 2005(11)
[8]樹(shù)鼩實(shí)驗(yàn)室繁殖及育幼的探討[J]. 梁亮,李瑗,楊春,蘇建家,段小嫻,曹驥,歐超,班克臣,岳惠芬.  四川動(dòng)物. 2005(02)
[9]不同因素誘發(fā)的樹(shù)齮肝癌組織的基因表達(dá)差異[J]. 李瑗,蘇建家,曹驥,歐超,仇效坤,楊春,班克臣,岳惠芬,韋薇,歐勝敬,張麗生,萬(wàn)大方,顧健人.  癌癥. 2003(10)
[10]樹(shù)鼩實(shí)驗(yàn)感染乙型肝炎病毒的再評(píng)價(jià)[J]. 王海平,姚志強(qiáng),周永興,洪沙,李光玉.  中華肝臟病雜志. 1998(02)



本文編號(hào)：3214005