發(fā)布時(shí)間：2021-06-05 23:06

　　目的：用柯薩奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）感染體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞,觀察CVB3感染對(duì)Hela細(xì)胞形態(tài)及凋亡變化的影響,以及對(duì)4EBP1表達(dá)的影響,探討細(xì)胞凋亡及4EBP1表達(dá)在CVB3感染中的意義。方法：以CVB3分別感染未饑餓及饑餓Hela細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,并以膜聯(lián)蛋白V （FITC-Annexin V）聯(lián)合PI染色雙參數(shù)技術(shù)（Annexin V/PI法）定量檢測(cè)饑餓Hela細(xì)胞凋亡變化,RT-PCR法及Real-time PCR法檢測(cè)未饑餓及饑餓Hela細(xì)胞中4EBP1的表達(dá),應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1.Hela細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化：CVB3感染Hela細(xì)胞后,可引起細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathic effect, CPE）,光鏡下細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,細(xì)胞變圓變暗,漂浮成空泡狀或呈葡萄串樣聚集。2.Hela細(xì)胞的凋亡變化：CVB3感染Hela細(xì)胞后,細(xì)胞出現(xiàn)凋亡變化,病毒組各時(shí)間點(diǎn)Hela細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組（P<0.05）,且在一定時(shí)間段內(nèi)凋亡程度隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加。3... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

病毒組與對(duì)照組細(xì)胞凋亡變化(灸光顯微鏡，/200)

碩十學(xué)位論文結(jié)果圖3一3病毒組及對(duì)照組不同時(shí)間點(diǎn)Hela細(xì)胞凋亡率比較a與相同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組比較，P<0.05，b與3h病毒組比較，尸<0.05 3.4RT一PCR檢測(cè)4EBPI的表達(dá)3.4.1饑餓法對(duì)照組不同時(shí)間點(diǎn)比較，4EBPI表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)，病毒組與對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)比較，4EBPI表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。6h病毒組與3h病毒組比較

組與3h病毒組比較，4EBPI表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.OS)，gh、12h、24h病毒組分別與3h病毒組比較，4EBPI表達(dá)減少，且隨病毒感染時(shí)間延長(zhǎng)，4EBPI表達(dá)下降(P<0.05)(圖3一7、3一8，表3一4)600bP4O0bP子88七呂圖3一6非饑俄法不同時(shí)間點(diǎn)CVB3感染 Hela細(xì)胞及對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)4EBPI表達(dá)(4EBPI/GAPDH，RT一PCR)M:Mark:l、3、5、7、9分別為3h、6h、gh、 1Zh、24h病毒組的4EBPI及GAPDHlllRNA條帶:2、4、6、8、10分別為3h、6h、gh、12h、24h對(duì)照組的4EBPI及GAPDHmRNA條帶。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]芪紅膠囊對(duì)柯薩奇病毒體外感染HeLa細(xì)胞的影響[J]. 宋曉東,劉哲,陳敬洲,孫凱,惠汝太.  中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(03)
[2]川芎嗪對(duì)柯薩奇B3病毒感染乳鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究[J]. 錢(qián)招昕,黃寒,林曉娟.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2009(08)
[3]P物質(zhì)與小鼠病毒性心肌炎機(jī)制研究[J]. 王勇,李覺(jué),徐亞偉,胡大一.  同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(03)
[4]雷帕霉素對(duì)柯薩奇病毒B3誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞mTOR和eIF-4E表達(dá)的調(diào)控作用[J]. 陳淳媛,孫躍女,楊作成,蔡姿麗,楊敏.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2008(07)
[5]BALB/c小鼠巨細(xì)胞病毒性心肌炎模型的特征[J]. 陳志堅(jiān),廖玉華,唐省三,高翔,劉坤,田苗,王敏,董繼華.  中國(guó)病理生理雜志. 2008(03)
[6]制備小鼠病毒性心肌炎模型最適柯薩奇病毒B3濃度的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 李岳春,任江華,曹茂銀,楊占秋.  浙江醫(yī)學(xué). 2007(11)
[7]mTOR信號(hào)通路與細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控[J]. 王志鋼,吳應(yīng)積,旭日干.  生物物理學(xué)報(bào). 2007(05)
[8]病毒性心肌炎心肌超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡的電鏡觀察[J]. 張松,楊春山,葛均波,饒邦復(fù).  中國(guó)心血管雜志. 2006(02)
[9]HSV-1心肌炎心肌凋亡細(xì)胞的檢測(cè)與分析[J]. 劉紅云,唐省三,姜益泉.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2005(18)
[10]柯薩奇病毒致病毒性心肌炎的細(xì)胞凋亡研究[J]. 宋曉東,王侖,劉玉清,辛穎,惠汝太.  病毒學(xué)報(bào). 2005(02)



本文編號(hào)：3213093