發(fā)布時間：2021-05-11 19:47

　　目的:探討microRNA （miR）-146a對新生大鼠缺氧缺血性腦病（HIE）的影響及分子機(jī)制。方法:將SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、HIE組、HIE+NC agomir組（新生HIE大鼠靜脈注射NC agomir）和HIE+miR-146a agomir組（新生HIE大鼠靜脈注射miR-146a agomir）4組,每組8只。利用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）檢測腦組織中miR-146a mRNA表達(dá)水平,蘇木精-伊紅（HE）染色檢測腦損傷程度,酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（iNOS）、白介素-1β（IL-1β）的表達(dá)水平;將小膠質(zhì)細(xì)胞均勻地分為4組:對照組、LPS組（LPS 10 mg/L誘導(dǎo)活化小膠質(zhì)細(xì)胞4 h）、LPS+NC mimic組（用NC mimic轉(zhuǎn)染LPS誘導(dǎo)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞）、LPS+miR-146a mimic組（用miR-146a mimic轉(zhuǎn)染LPS誘導(dǎo)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞）。qPCR檢測BV2細(xì)胞中miR-146a和Smad4 mRNA表達(dá)水平,MTT法檢測BV2細(xì)胞活性,ELISA檢測BV... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,37(07)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物及細(xì)胞
    1.2 試驗試劑
    1.3 試驗儀器
    1.4 方法
        1.4.1 分組及新生HIE大鼠模型制備
        1.4.2 qPCR檢測腦組織中miR-146a和Smad4 mRNA表達(dá)水平
        1.4.3 蘇木精-伊紅（HE）染色觀察腦組織損傷情況
        1.4.4 ELISA檢測TNF-α、iNOS、IL-1b水平
        1.4.5 BV2細(xì)胞的處理
        1.4.6 qPCR檢測BV2細(xì)胞中miR-146a和Smad4mRNA表達(dá)水平
        1.4.7 MTT法檢測BV2細(xì)胞活性
        1.4.8 ELISA檢測BV2細(xì)胞中TNF-α、iNOS、IL-1b水平
        1.4.9 雙熒光素酶報告驗證miR-146a和Smad4的靶向關(guān)系
        1.4.1 0 Western blot檢測BV2細(xì)胞中Smad4水平
    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 miR-146a過表達(dá)對TNF-α、iNOS、IL-1β水平及對腦組織的影響
    2.2 miR-146a過表達(dá)對BV2細(xì)胞存活率的影響
    2.3 miR-146a過表達(dá)對BV2細(xì)胞中炎癥因子的影響
    2.4 HIE中miR-146a和Smad4的靶向關(guān)系
3 討論



本文編號：3181999