發(fā)布時(shí)間：2017-04-17 18:10

  本文關(guān)鍵詞：新生大鼠高氧性肺損傷肺組織中Smad3及PPAR-γ的蛋白和mRNA表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:選擇新生大鼠建立急性高氧性的肺損傷模型并使用羅格列酮進(jìn)行干預(yù)且和正常新生大鼠進(jìn)行對(duì)比:1.觀察與比較各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物其一般情況以及肺組織的病理改變;2.探究各實(shí)驗(yàn)組的肺組織內(nèi)Smad3及PPAR-γ表達(dá)的變化,從而探討Smad3及PPAR-γ于急性高氧性的肺損傷其發(fā)病機(jī)制中的作用;3.探討羅格列酮是否發(fā)揮對(duì)急性高氧性的肺損傷起到的保護(hù)作用,對(duì)臨床防治新生兒高氧性肺損傷來說可以提供理論依據(jù)。方法:將108只出生滿48小時(shí)的新生SD大鼠(雌雄均可),按照隨機(jī)原則分為三組:I組--空氣組;II組--高氧組(高氧+生理鹽水);III組--羅格列酮干預(yù)組(高氧+羅格列酮);I組新生大鼠置于常壓空氣中飼養(yǎng)。II組、III組新生大鼠置于氧濃度維持在90-95%的氧箱中飼養(yǎng)。III組于實(shí)驗(yàn)第一天起每日灌喂羅格列酮(3mg/kg)。I組與II組于實(shí)驗(yàn)第一天起每日灌喂等量生理鹽水。每組按實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)分為1天、3天、7天三個(gè)亞組,每組于各實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)分別隨機(jī)選取12只實(shí)驗(yàn)鼠,處死后取材并完成下述指標(biāo)的檢測(cè):(1)肺泡灌洗液中的總蛋白含量;(2)選取左肺并稱其濕重和干重,算出肺濕/干重比;(3)觀察肺組織病理學(xué)情況:選取右上肺對(duì)其進(jìn)行病理切片以觀察肺組織的病理改變;(4)肺組織Smad3及PPAR-γ蛋白及m RNA的含量測(cè)定:選取肺組織勻漿并提取蛋白,采用western blotting法對(duì)其蛋白含量分別加以測(cè)定;另選取取部分肺組織進(jìn)行RNA提取,采用RT-PCR法對(duì)其m RNA含量分別進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果:1.各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況觀察:I組中的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精神狀態(tài)佳,皮毛光澤正常,飲食正常,活動(dòng)靈活,無死亡。II組中的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物高氧暴露1天時(shí)精神狀態(tài)好,皮毛光澤可,進(jìn)食可,離氧后無呼吸困難表現(xiàn)。高氧暴露三天后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精神尚可,皮毛光澤較前變差,進(jìn)食較差,脫離氧氣后呼吸頻率加快。高氧暴露七天時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精神萎靡,皮毛光澤差,少吃少動(dòng),離氧后出現(xiàn)呼吸急促,個(gè)別死亡。III組的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況較II組有改善。2.肺組織病理學(xué)改變:I組大鼠各時(shí)相肺組織結(jié)構(gòu)規(guī)整,肺泡大小均一、肺泡腔內(nèi)無炎癥反應(yīng)。II組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于高氧暴露1天時(shí)可見肺泡結(jié)構(gòu)完整,肺泡內(nèi)可見少許紅細(xì)胞,無明顯滲出;3天后可見肺血管擴(kuò)張充血,肺泡內(nèi)可見紅細(xì)胞、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肺間質(zhì)水腫,肺間隔斷裂,肺泡腔擴(kuò)大;7天時(shí)則肺組織出現(xiàn)明顯液體滲出及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡內(nèi)出血,肺間質(zhì)水腫明顯加重,部分肺間隔增寬變形,結(jié)構(gòu)紊亂。III組的肺組織病理改變,肺泡腔內(nèi)液體滲出,紅細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較II組明顯減輕。3.肺組織濕/干重比(W/D):實(shí)驗(yàn)1天時(shí),各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肺組織W/D無明顯差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)3天、7天時(shí),II組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肺組織W/D較Ⅰ組有升高(P0.01),III組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肺組織W/D較II組有降低(P0.01)。4.支氣管肺泡灌洗液(BLAF)中總蛋白(TP)含量測(cè)定:實(shí)驗(yàn)1天時(shí),三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物BLAF中TP含量無明顯差異(P0.05)。而實(shí)驗(yàn)3天及7天時(shí),II組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的BLAF中TP含量明顯高于Ⅰ組(P0.01),而III組的BLAF中TP含量則明顯低于II組(P0.01)。5.肺組織中Smad3及PPAR-γ蛋白表達(dá)水平的變化:western blotting檢測(cè)結(jié)果表明:各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺組織中的Smad3、PPAR-γ的蛋白表達(dá)水平在實(shí)驗(yàn)第1天無顯著差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)第3天及第7天時(shí),II組Smad3的蛋白表達(dá)水平較I組有明顯升高(P0.01),II組PPAR-γ的蛋白表達(dá)水平較I組有明顯下降(P0.01)。III組肺組織中的PPAR-γ的蛋白表達(dá)明顯高于II組,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。6.肺組織中Smad3及PPAR-γ的m RNA表達(dá)水平的變化:在本實(shí)驗(yàn)中,通過RT-PCR方法檢測(cè)顯示:各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺組織中的Smad3、PPAR-γ的m RNA表達(dá)水平在實(shí)驗(yàn)第1天無顯著差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)第3天及第7天時(shí),II組Smad3的m RNA表達(dá)水平較I組有明顯升高(P0.01),II組PPAR-γ的m RNA表達(dá)水平較I組有明顯下降(P0.01)。III組肺組織中的PPAR-γ的m RNA表達(dá)水平明顯高于II組,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:(1)暴露于高濃度氧氣中一定時(shí)間對(duì)新生大鼠肺組織有損傷作用,主要的病理表現(xiàn)為肺組織局部充血水腫、炎癥滲出、肺組織結(jié)構(gòu)紊亂、肺泡數(shù)目減少、呼吸功能受損、氧依賴性增強(qiáng)。(2)急性高氧性的肺損傷新生大鼠模型,其肺組織中Smad3的蛋白及m RNA的表達(dá)水平較之正常肺組織出現(xiàn)明顯的升高,與肺損傷的程度相符;而PPAR-γ的蛋白及m RNA表達(dá)水平較之正常肺組織表現(xiàn)出明顯下降,與肺損傷的程度負(fù)相關(guān)。(3)羅格列酮(RGZ)可經(jīng)過上調(diào)PPAR-γ的蛋白及m RNA的表達(dá)水平,達(dá)到肺損傷程度減輕的目的,使其對(duì)高氧性的肺損傷起到保護(hù)作用,但其具體機(jī)制和在臨床中應(yīng)用價(jià)值還需進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：急性高氧性肺損傷 新生大鼠 羅格列酮 Smad3 PPAR-γ
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R722.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-29
• 討論29-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 附錄41-46
• 綜述46-56
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 英漢雙解縮略詞表56-57
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文57-58
• 致謝58-59

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;The Effects of Aerosolized STAT1 Antisense Oligodeoxynucleotides on Rat Pulmonary Fibrosis[J];Cellular & Molecular Immunology;2009年01期

2 胡瑜;劉雪雁;富建華;薛辛東;;高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺組織中ERK1/2變化的研究[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2011年07期

  本文關(guān)鍵詞：新生大鼠高氧性肺損傷肺組織中Smad3及PPAR-γ的蛋白和mRNA表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：314019