目的:構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體,在新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型水平,探討NgR特異性siRNA慢病毒重組體干擾大鼠NgR mRNA表達(dá)及其對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷的修復(fù)作用。方法:1、建立P3新生SD大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型,從生物行為學(xué)、組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行驗(yàn)證。2、設(shè)計(jì)、構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體并鑒定。3、Western Blot方法外源篩靶、內(nèi)源篩靶,選擇最有效的靶點(diǎn),并包裝成慢病毒。4、40只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、空病毒組、慢病毒組（每組10只）,新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷3天后（P6）經(jīng)側(cè)腦室注射給藥,觀察大鼠的行為學(xué)改變。5、80只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、空病毒組、慢病毒組（每組20只）,新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷3天后（P6）經(jīng)側(cè)腦室注射給藥,RT-PCR檢測(cè)P6、P7、P9、P13 SD大鼠NgR mRNA表達(dá)情況。結(jié)果:1、結(jié)扎P3新生SD大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈建立缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型,從生物行為學(xué)、組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行驗(yàn)證,模型組都出現(xiàn)了有意義的改變。2、設(shè)計(jì)、構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體經(jīng)PCR鑒定、... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

動(dòng)物模型制作a結(jié)扎頸總動(dòng)脈b造模術(shù)后ab

臺(tái)上休息 30s。大鼠休息 2min 后進(jìn)入下一個(gè)象限訓(xùn)練。2.3.3 測(cè)試階段訓(xùn)練 2d 后的第 3d 進(jìn)行正式測(cè)試。用微機(jī)追蹤系統(tǒng)記錄整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程，應(yīng)系統(tǒng)軟件進(jìn)行視頻記錄及數(shù)據(jù)分析。分析大鼠找到平臺(tái)的時(shí)間（平均逃避潛期）、距離靶心的距離，檢測(cè)大鼠空間學(xué)習(xí)能力。在第 5d 第四象限結(jié)束后，撤平臺(tái)，觀察 60s 內(nèi)大鼠在平臺(tái)附近停留的情況，檢測(cè)大鼠空間記憶能力，見圖

結(jié) 果驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后情況前大鼠全身粉嫩，吸吮有力，術(shù)后大鼠全身變得蒼白，自發(fā)運(yùn)動(dòng)減少，多數(shù)于 48h 后恢復(fù)正常。Sham 組術(shù)中死亡 1 只，可能是術(shù)中麻醉術(shù)后 48h 內(nèi)無死亡。WMD 組術(shù)中死亡 3 只，1 只可能是剝離動(dòng)脈和神干凈，誤把迷走神經(jīng)與頸總動(dòng)脈一起結(jié)扎造成死亡；2 只是用力過猛拉扯斷，引起大出血死亡，術(shù)后 48h 內(nèi)死亡 2 只，估計(jì)與手術(shù)創(chuàng)傷及力差有關(guān)。物行為學(xué)觀察重比較MD 組大鼠平均體重（31.094±1.285 g）明顯低于相應(yīng)日齡 Sham 組大（36.256±1.363 g），兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩組平均圖 3，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析見表 1。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NgR在新生大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞系的表達(dá)和缺氧缺血后變化的意義[J]. 唐軍,姚裕家,鐘琳.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2007(05)
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[3]Nogo-66受體在成年大鼠脊髓白質(zhì)內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞的分布[J]. 胡澤嵐,劉瑩瑩,金衛(wèi)林,劉惠玲,鞠躬.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(16)



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