目的先天性巨結(jié)腸（HD）發(fā)病率高，居先天性消化道畸形第二位，是小兒外科領(lǐng)域研究的熱點。病理學研究發(fā)現(xiàn)病變段有神經(jīng)節(jié)細胞缺乏、多種類型的神經(jīng)纖維異常增生以及腸壁起搏細胞的異常，這些形態(tài)上的異常表明腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育缺陷可能是先天性巨結(jié)腸發(fā)病的原因，但如何出現(xiàn)腸神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育異常，其病因并不明確。本課題采用免役組織化學方法研究層粘連蛋白（LN）、層粘連蛋白受體（LNR）、纖維粘連蛋白（FN）在先天性巨結(jié)腸病兒狹窄段、移行段、正常段的表達；通過RT-PCR、熒光定量PCR對層粘連蛋白基因、RET基因在先天性巨結(jié)腸病兒狹窄段、移行段、正常段的表達以及層粘連蛋白基因與RET基因表達的相關(guān)性進行研究，探討先天性巨結(jié)腸腸壁微環(huán)境改變對腸道神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的影響，以及這些改變與RET基因的相關(guān)性，旨在探討先天性巨結(jié)腸的病因。方法標本取自山東大學齊魯醫(yī)院小兒外科2004年均經(jīng)病理證實的27例HD病兒，以狹窄段為無神經(jīng)節(jié)細胞段，查見有神經(jīng)節(jié)細胞的移行段為有神經(jīng)節(jié)細胞段，擴張段近端為正常段，分別取200mg新鮮標本放入無菌試管中于負84℃冰箱中保存，另取新鮮組織用10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋。用二步法對27例H... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

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山東大學博士學位論文圖ZLN的免疫組化染色(標尺=50切口)A狹窄段傲膜及粘膜下層基底膜棕黃色顆粒多，片狀，色深)B移行段(基底膜棕黃色顆粒減少，點線狀)C正常段(染色點少，色淺)Fig.2加叨unohistoche而stlystainingofLN偽ar=50切m)Aaganglioulcseg叮entB加勸siti。耐朋gme爪Cdilatedseg口eni

因的產(chǎn)物亮度依次下降，即其表達水平有依次下降趨勢;RET基因的產(chǎn)物亮度依次上升，即其表達水平則依次升高(圖4)。卜actin317bP枷叮ininalPha1I86bPRET10IbP圖4Rl’-pCR檢測l出九ininalphal，既T，p一actin基因mRNA在三段組織的表達，1、2、3:狹窄段、移行段、正常段1別舊ininalphal;4、5、6:狹窄段、移行段、正常段RET.(3)由alpha990()凝膠分析系統(tǒng)分別得到larni址n吻hal基因、RET基因與p一actin基因灰度值的直方圖(圖5、圖6)。密度值

【參考文獻】：
期刊論文
[1]先天性巨結(jié)腸與其同源病的RET基因突變的研究[J]. 鈄金法,李民駒,李繼承,管濤,馮志剛.  中華小兒外科雜志. 2004(02)
[2]實時熒光定量PCR技術(shù)及其應用[J]. 歐陽松應,楊冬,歐陽紅生,馬鶴雯.  生命的化學. 2004(01)
[3]先天性巨結(jié)腸c-kit+腸間質(zhì)細胞分布的免疫組織化學研究[J]. 劉興攀,張文同,董志行,張金哲.  中華小兒外科雜志. 2003(02)
[4]先天性巨結(jié)腸癥腸壁微環(huán)境改變的免疫組織化學研究[J]. 趙雅男,聶紹發(fā),魏明發(fā),朱桂寶.  中華小兒外科雜志. 2003(02)
[5]先天性巨結(jié)腸分子遺傳學研究最新進展[J]. 舒曉鋼.  醫(yī)學理論與實踐. 2003(01)
[6]先天性巨結(jié)腸相關(guān)基因研究進展[J]. 柳宏,陳克能.  國外醫(yī)學.遺傳學分冊. 2002(04)
[7]先天性巨結(jié)腸病腸壁NOS陽性神經(jīng)元光鏡和電鏡觀察[J]. 章明,潘劍威,任天榮,韓永堅,章鎖江,鐘海玲,熊啟明.  解剖學報. 2001(03)
[8]先天性巨結(jié)腸癥C-fos原癌基因表達的研究[J]. 高紅,白玉作,劉紅宇,孔娟,景士兵.  中華消化雜志. 2000(04)
[9]ECM,MMPs/TIMPs及其調(diào)節(jié)研究進展[J]. 袁發(fā)煥,王海燕,李驚子.  國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊). 2000(02)
[10]先天性巨結(jié)腸RET基因轉(zhuǎn)錄水平的研究[J]. 詹江華,房志勤,谷繼卿.  中華小兒外科雜志. 1999(01)



本文編號：3057891