目的:采用新生SD大鼠建立高氧肺損傷動物模型,動態(tài)觀察肺組織濕干重質(zhì)量比和病理改變,檢測高氧暴露各時相點(diǎn)新生大鼠肺組織中S r c抑制的蛋白激酶C的底物（Src suppressed C kinase substrate,SSeCKS）的表達(dá),闡述SSeCKS蛋白與高氧肺損傷的關(guān)系;觀察高氧刺激肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中SSeCKS蛋白的表達(dá)及對細(xì)胞骨架的影響,探討SSeCKS蛋白參與高氧肺損傷的病理機(jī)制。方法:1.64只出生12 h內(nèi)的SD清潔級大鼠,隨機(jī)分為2組:空氣對照組、高氧暴露組,每組8只。高氧暴露組置于常壓高氧艙中,保持氧濃度>95%,空氣對照組置于同一室內(nèi),于12 h、24 h、48 h和72 h處死動物后分別進(jìn)行肺組織濕干重質(zhì)量比（W/D）、肺組織病理HE染色、Western blot法及間接免疫酶標(biāo)法檢測肺組織中SSeCKS蛋白的表達(dá),間接免疫熒光雙重標(biāo)記法明確SSeCKS蛋白在肺組織的細(xì)胞定位。2.128只出生12 h內(nèi)的SD清潔級大鼠,隨機(jī)分為4組:I):空氣對照組;II):高氧暴露組;III):高氧露+R031-8220（蛋白激酶C抑制劑）組;IV):高氧暴露+... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

高氧暴露各時相點(diǎn)肺組織病理變化(HE×100)

圖3 SSeCKS在空氣對照組(A)與高氧暴露組(B)中的表達(dá)Fig. 3 The expression of SSeCKS in the air control andhyperoxia—induced lung injury groupNote: 1：12 h ；2：24 h； 3：48 h； 4：72 h疫組化法檢測肺組織中SSeCKS蛋白的表達(dá) 間接免疫組化法檢測肺組織中SSeCKS蛋白的定位過間接免疫組化法，以堿性磷酸酶為示蹤酶，通過BCIP/NBT顯色，核氣對照中未發(fā)現(xiàn)SSeCKS蛋白的特異性著色，在高氧暴露12 h起,肺蛋白出現(xiàn)表達(dá)，主要表達(dá)在肺泡間隔(圖4A)。

圖3 SSeCKS在空氣對照組(A)與高氧暴露組(B)中的表達(dá)Fig. 3 The expression of SSeCKS in the air control andhyperoxia—induced lung injury groupNote: 1：12 h ；2：24 h； 3：48 h； 4：72 h疫組化法檢測肺組織中SSeCKS蛋白的表達(dá)間接免疫組化法檢測肺組織中SSeCKS蛋白的定位間接免疫組化法，以堿性磷酸酶為示蹤酶，通過BCIP/NBT顯色氣對照中未發(fā)現(xiàn)SSeCKS蛋白的特異性著色，在高氧暴露12 h白出現(xiàn)表達(dá)，主要表達(dá)在肺泡間隔(圖4A)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新生鼠高濃度氧肺損傷臨界值的初步研究[J]. 徐洪濤,李華強(qiáng),余健,聶國明.  華南國防醫(yī)學(xué)雜志. 2006(06)
[2]新生鼠高氧肺損傷中p38MAPK的磷酸化[J]. 羅莉漫,李華強(qiáng),余健.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2006(23)
[3]γ-干擾素對新生大鼠高氧肺纖維化的影響[J]. 趙錦寧,李華強(qiáng),唐仕芳.  重慶醫(yī)學(xué). 2004(04)



本文編號：3035861