白血病兒童骨髓間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及其生物學特性和免疫調節(jié)功能的初步研究
發(fā)布時間:2021-01-11 14:09
目的通過體外實驗研究白血病兒童骨髓來源的間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物學特性及其免疫調節(jié)作用,從而探討白血病兒童骨髓來源的MSCs在白血病兒童化療后實行自體回輸的可行性及可能出現的免疫重建作用。方法通過Ficoll-Hypaque梯度密度離心法分離出白血病兒童骨髓單個核細胞,貼壁法體外純化擴增MSCs,獲得第3~4(P34)代細胞用于實驗。光鏡觀察細胞生長形態(tài),瑞氏染色觀察細胞核漿比例及形態(tài),MTT法檢測細胞增殖,流式細胞術(flow cytometry,FCM)檢測免疫表型,油紅O染色及茜素紅染色檢測其向脂肪及骨細胞分化等觀察其生物學特性。取外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cells, PB-MNCs),用植物凝集素(PHA)及白細胞介素2(IL-2)進行刺激后將MSCs按照不同比例(1/51/1000)加入MNCs中,進行細胞相互接觸的共培養(yǎng)、transwell體系的細胞非接觸性共培養(yǎng),在培養(yǎng)第5天后收集懸浮細胞,用LDH法檢測各組中MNCs的增殖情...
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學廣東省
【文章頁數】:58 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
骨髓單個核細胞接種于塑料培養(yǎng)瓶,24h后部分細胞開始貼壁,形成集落
CD34、CD14雙陰性表達率98%以上;HLA-DR表達陰性;CD29、CD105、CD13陽性表達率99%
【參考文獻】:
期刊論文
[1]自體骨髓間充質干細胞輸注支持長期反復化療急性白血病的療效觀察[J]. 楊桂玲,岳軍峰,汪清銘,石慶之,李劍,湯愛萍. 實用臨床醫(yī)學. 2008(07)
[2]間充質干細胞不抑制體內T淋巴細胞的增殖[J]. 王恒湘,邊素艷,陳金龍,汪勁松,郭子寬. 組織工程與重建外科雜志. 2006(05)
[3]Ad/IFNγ轉染的骨髓基質細胞的體內抗白血病作用[J]. 徐海鵬,呂躍,李曉青,譚銀多,耿其榮,陳曉勤. 廣東醫(yī)學. 2006(06)
[4]不同年齡段人骨髓間充質干細胞生物學特性的研究[J]. 黃科,周敦華,黃紹良,梁舜華. 中國實驗血液學雜志. 2005(06)
[5]化療聯合自體細胞因子誘導殺傷細胞治療急性白血病的臨床觀察[J]. 江浩,劉開彥,童春容,江濱,陸道培. 中華內科雜志. 2005(03)
[6]間充質干細胞對T淋巴細胞轉化的影響[J]. 江小霞,張毅,李秀森,吳英,于曉妉,唐佩弦,毛寧. 解放軍醫(yī)學雜志. 2005(02)
[7]兒童急性淋巴細胞白血病患者T淋巴細胞免疫功能的研究[J]. 鞠秀麗,孫念政,劉繼玲,段春紅. 臨床血液學雜志. 2004(02)
[8]自體細胞因子誘導的殺傷細胞治療急性B淋巴細胞白血病22例臨床觀察[J]. 周曉宏,童春容. 河北醫(yī)學. 2003(04)
[9]骨髓微環(huán)境的病理觀察(附血液腫瘤性疾病36例分析)[J]. 中國病理生理雜志. 2001(11)
[10]白血病T淋巴細胞亞群和NK細胞功能分析[J]. 李姍,王冠軍,姚程,易永林,劉晶. 中國實驗診斷學. 1998(03)
本文編號:2970913
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學廣東省
【文章頁數】:58 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
骨髓單個核細胞接種于塑料培養(yǎng)瓶,24h后部分細胞開始貼壁,形成集落
CD34、CD14雙陰性表達率98%以上;HLA-DR表達陰性;CD29、CD105、CD13陽性表達率99%
【參考文獻】:
期刊論文
[1]自體骨髓間充質干細胞輸注支持長期反復化療急性白血病的療效觀察[J]. 楊桂玲,岳軍峰,汪清銘,石慶之,李劍,湯愛萍. 實用臨床醫(yī)學. 2008(07)
[2]間充質干細胞不抑制體內T淋巴細胞的增殖[J]. 王恒湘,邊素艷,陳金龍,汪勁松,郭子寬. 組織工程與重建外科雜志. 2006(05)
[3]Ad/IFNγ轉染的骨髓基質細胞的體內抗白血病作用[J]. 徐海鵬,呂躍,李曉青,譚銀多,耿其榮,陳曉勤. 廣東醫(yī)學. 2006(06)
[4]不同年齡段人骨髓間充質干細胞生物學特性的研究[J]. 黃科,周敦華,黃紹良,梁舜華. 中國實驗血液學雜志. 2005(06)
[5]化療聯合自體細胞因子誘導殺傷細胞治療急性白血病的臨床觀察[J]. 江浩,劉開彥,童春容,江濱,陸道培. 中華內科雜志. 2005(03)
[6]間充質干細胞對T淋巴細胞轉化的影響[J]. 江小霞,張毅,李秀森,吳英,于曉妉,唐佩弦,毛寧. 解放軍醫(yī)學雜志. 2005(02)
[7]兒童急性淋巴細胞白血病患者T淋巴細胞免疫功能的研究[J]. 鞠秀麗,孫念政,劉繼玲,段春紅. 臨床血液學雜志. 2004(02)
[8]自體細胞因子誘導的殺傷細胞治療急性B淋巴細胞白血病22例臨床觀察[J]. 周曉宏,童春容. 河北醫(yī)學. 2003(04)
[9]骨髓微環(huán)境的病理觀察(附血液腫瘤性疾病36例分析)[J]. 中國病理生理雜志. 2001(11)
[10]白血病T淋巴細胞亞群和NK細胞功能分析[J]. 李姍,王冠軍,姚程,易永林,劉晶. 中國實驗診斷學. 1998(03)
本文編號:2970913
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