目的:環(huán)境內(nèi)分泌干擾物鄰苯二甲酸二（2-乙己基）酯（Di-2-ethylhexylphosphate,DEHP）及氟他胺（Flutamide,Flu）構(gòu)建隱睪模型和未成熟睪丸損傷模型,探究內(nèi)分泌干擾物暴露致睪丸發(fā)育異常和功能障礙的分子機制,并探討自噬信號通路在其中的作用。方法:第一部分:Sprague-Dawley rat（SD）孕鼠隨機分為3組:第一組:不予任何處理作為對照組,Ⅱ組:孕11-19天予以Flu 25mg/kg/bw/d注射,III組:孕7-19天予以DEHP 750 mg/kg/bw/d灌胃。篩選隱睪模型后代并采集睪丸,通過分析凋亡相關(guān)蛋白Fas,細胞色素C和caspase-3以及自噬信號通路中關(guān)鍵信號分子LC3I/II、p62、Beclin-1的表達情況,探討凋亡和自噬信號通路在內(nèi)分泌干擾物孕期暴露誘導隱睪所致的睪丸損傷中的作用。第二部分:SD大鼠于生后（postnatal day,PND）1-35天分別予以0、250、500 mg/kg DEHP灌胃,于PND35天取睪丸組織,探究LC3I/II、p62、Beclin-1以及睪丸血睪屏障連接蛋白β-catenin、C... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

氟他胺誘導和DEHP誘導的隱睪大鼠的附睪精子異常對照組雄性大鼠精子（100）（A）

正常對照組 氟他胺誘導單側(cè)隱睪組氟他胺誘導雙側(cè)隱睪組DEHP 誘導單側(cè)隱睪組DEHP 誘導雙側(cè)隱睪組血清睪酮(nmol/L)19.26±2.56 8.84±2.61 * 3.02±1.78 *# 7.46±3.52 * 5.582.5 隱睪致雄性大鼠睪丸組織形態(tài)學變化通過 HE 染色觀察 3 組大鼠睪丸的組織形態(tài)變化。如圖 1.2 所示，與對照組相比（圖 1.2.A 和 D），DEHP 組管腔直徑變小，生殖細胞顯著減少且細胞核深染（圖1.2.C 和 F）。所有種類的生殖細胞，包括未分化的精原細胞，分化的精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞和長形精子細胞均受到影響。同時，睪丸支持細胞也受到破壞，該鏡下改變在氟他胺誘導隱睪組表現(xiàn)更明顯（圖 1.2.B 和 E）。表 1. 7. 隱睪對大鼠血清睪丸水平的影響Table 1. 7. Effects of cryptorchidism on serum testosterone in rats.

(200 and 400 ) (Fig 1. 2. A and D). Compared with control group, abnormalities of germcells and sertoli cells were in DEHP-induced group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. C and F) andFlu-exposure group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. B and E) with cells types not identifiable,hyperchromaticnuclei,greatlyreducedtubulediametersandspermatogeniccellsdramaticallydecreased. Detachment and sloughing of spermatogenic cells into the lumen were alsoobviously seen (arrows).2.6 隱睪所致大鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)異常與正常組相比，隱睪組睪丸組織生精小管發(fā)生嚴重損傷，出現(xiàn)空泡化樣的結(jié)構(gòu)，線粒體也發(fā)生腫脹變性（圖 1. 3.D-I）。在 DEHP 誘導隱睪大鼠的睪丸生精細胞胞質(zhì)內(nèi)，可見許多自噬樣小體結(jié)構(gòu)（里面包裹著線粒體和其他破損細胞器成分）（Fig1. 3. D-F）。有趣的是，在氟他胺誘導隱睪大鼠睪丸生精細胞內(nèi)未見這樣的自噬體結(jié)構(gòu)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Uchl1及其關(guān)聯(lián)蛋白參與小鼠實驗性隱睪中精母細胞凋亡(英文)[J]. 杜平,姚余衛(wèi),石燕,顧正,王健,孫兆貴,左嘉客.  生理學報. 2014(05)



本文編號：2934872