目的:檢測核因子-κB ( nuclear factor-кB,NF-κB )在社區(qū)獲得性肺炎( community-acquired pneumonia,CAP )患兒外周血、支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的表達(dá);探討外周血NF-κB-mRNA的表達(dá)水平是否可作為評價CAP患兒氣道炎癥的有效指標(biāo);研究NF-κB與CAP患兒病原學(xué)、病情變化及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素8(interleukin-8,IL-8)表達(dá)的關(guān)系;分析細(xì)胞免疫功能變化在兒童CAP發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:選取蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科2010年5~2010年12月間收治的258例CAP患兒及ICU2010年6月~2010年12月間收治的29例重癥肺炎患兒,并選取30例健康患兒為對照組。完善病原學(xué)檢測,收集并整理臨床資料。留取患兒外周血標(biāo)本,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測其中NF-κB-mRNA的表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測TNF-α、IL-8的水平,流式細(xì)胞儀檢測患兒淋巴細(xì)胞亞群。其中的52例患兒進(jìn)行電子支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗,留取BALF標(biāo)本,RT-PCR測定其中NF-κB-mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果:(1)與正常對照組比較,病毒感染組、細(xì)菌感染組、MP感染組及混合感染組患兒外周血NF-κB-mRNA表達(dá)水平明顯增高,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P﹤0.01);細(xì)菌感染組、MP感染組及混合感染組NF-κB-mRNA表達(dá)水平又高于病毒感染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);而細(xì)菌感染組、MP感染組及混合感染組組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 (2)RSV、Pinf-3、HboV、SP、HI感染患兒NF-κB-mRNA的表達(dá)水平均明顯高于正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。SP、HI組NF-κB-mRNA表達(dá)水平均高于RSV、Pinf-3、HboV組(P﹤0.05),而RSV、Pinf-3、HboV三組兩兩比較NF-κB-mRNA的表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,SP、HI組間比較也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。SMPP及普通MPP兩組患兒外周血NF-κB-mRNA的表達(dá)水平均明顯均高于正常對照組, SMPP組又高于普通MPP組(P﹤0.05)。 (3)52例CAP患兒BALF NF-κB-mRNA的表達(dá)水平高于外周血,二者表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.6705,P﹤0.01);其中MP感染、細(xì)菌感染及混合感染患兒外周血NF-κB-mRNA與BALF NF-κB-mRNA的表達(dá)均呈正相關(guān);病毒感染患兒外周血NF-κB-mRNA與BALF NF-κB-mRNA表達(dá)水平相仿。 (4)CAP患兒外周血NF-κB-mRNA、TNF-α及IL-8表達(dá)水平均表現(xiàn)為重癥肺炎組﹥普通肺炎組﹥正常對照組,各組間三種因子的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);外周血TNF-α、IL-8及NF-κB表達(dá)的相關(guān)分析均呈正相關(guān)。 (5)外周血CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴細(xì)胞百分比均表現(xiàn)為正常對照組﹥普通肺炎組﹥重癥肺炎組,三組比較均有總體性差異(P﹤0.01)。重癥肺炎組及普通肺炎組CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴細(xì)胞百分比與正常對照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P﹤0.05),但重癥肺炎組與普通肺炎組組間CD3~+淋巴細(xì)胞百分比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD3-CD19~+、CD19~+CD23~+淋巴細(xì)胞百分比均表現(xiàn)為重癥肺炎組﹥普通肺炎組﹥正常對照組,組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。CD4~+CD25~+淋巴細(xì)胞百分比在三組間統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果為普通肺炎組﹥正常對照組﹥重癥肺炎組,組間比較也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三組間CD3~+CD4~+、CD3-CD(16~+56) ~+淋巴細(xì)胞百分比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (6)NF-κB、TNF-α、IL-8分別與CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴細(xì)胞表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與CD3-CD19~+、CD19~+CD23~+淋巴細(xì)胞表達(dá)呈正相關(guān),與CD3~+CD4~+、CD4~+CD25~+、CD3-CD(16~+56) ~+淋巴細(xì)胞表達(dá)無相關(guān)性。 結(jié)論:NF-κB、TNF-α、IL-8參與兒童CAP的發(fā)病機(jī)制;不同病原感染NF-κB表達(dá)水平存在差異,同種病原感染因個體NF-κB表達(dá)水平不同,出現(xiàn)不同的病情變化;測定外周血NF-κB-mRNA表達(dá)水平可作為評價CAP患兒肺部炎癥的指標(biāo);CAP患兒存在細(xì)胞免疫功能紊亂,與NF-κB、TNF-α、IL-8相互作用共同影響病情變化。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R725.6
【部分圖文】：

圖 1 病毒、細(xì)菌、MP 及混合感染 CAP 患兒 NF-κB-mRNA 基因擴(kuò)增片段凝膠電泳圖注：1a～5a 為內(nèi)參，M 為 Marker，1b、2b、3b、4b、5b 分別為正常對照組、病毒感染組、MP 感染組、細(xì)菌感染組及混合感染組 NF-κB-mRNA 片段。00.511.522.5正常對照組病毒感染組細(xì)菌感染組支原體感染合感染組混F-Nκ-mRNAB

分組NF-κB mRNA WBC 計(jì)數(shù)（x109） CRP（mg/L）正常對照組 0.39±0.185.80±2.25 1.49±1.32RSV 1.09±0.20*5.65±2.83 3..01±2.48Pinf-3 0.79±0.19*6.01±2.96 2.69±1.24HBoV 0.86±0.18*7.09±3.01 1.81 ±1.03SP 1.54±0.63*▲▼■12.13±6.06*▲▼■13.19±6.18*▲▼■HI 1.47±0.46*▲▼■11.39±4.88*▲▼■14.35±6.77*▲▼■FP18.3﹤0.0111.46﹤0.019.96﹤0.01注：與正常對照組比較 P*﹤0.05，與 RSV 組比較 P▲﹤0.05，與 Pinf-3 組比較 P▼﹤0.05，與 HboV 比較 P■﹤0.05。

四. 普通 MPP 及 SMPP 患兒 NF-κB-mRNA 的表達(dá)水平65 例 MP 感染 CAP 患兒中，普通肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniaepneumonia,MPP）47 例，重癥肺炎支原體肺炎（serious mycoplasma pneumoniaepneumonia,SMPP）18 例。普通 MPP 與 SMPP 組患兒外周血 NF-κB-mRNA 的表達(dá)水平分別為 1.26±0.37、1.80±0.51，均明顯高于正常對照組(F=64.10,P﹤0.01)，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.97,P﹤0.01)。見圖 8。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2885535