不同方法建立雙足大鼠脊柱側(cè)彎動(dòng)物模型的特點(diǎn)比較
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【摘要】:目的:特發(fā)性脊柱側(cè)彎(idiopathic scoliosis)為一種脊柱三維度的畸形。其中包括冠狀位、矢狀位和軸位上的序列異常。罹患輕度的脊柱側(cè)彎時(shí),患者通常尚無(wú)明顯的軀體畸形,沒(méi)有明顯的不適癥狀。然而較重的脊柱側(cè)彎則會(huì)嚴(yán)重影響嬰幼兒及青少年的生長(zhǎng)發(fā)育。患兒脊柱發(fā)育異常,產(chǎn)生側(cè)彎并最終使軀體變形。嚴(yán)重者可以影響心肺功能、甚至累及脊髓,造成癱瘓。輕度的脊柱側(cè)彎可以通過(guò)臨床觀察;并通過(guò)姿勢(shì)調(diào)整及佩戴支具給予曲度矯正。但是當(dāng)特發(fā)性脊柱側(cè)彎畸形對(duì)患者日常生活及工作產(chǎn)生影響后,需要通過(guò)手術(shù)置入椎弓根釘并進(jìn)行撐開(kāi)及加壓復(fù)位操作進(jìn)行矯正。并通過(guò)術(shù)后長(zhǎng)期隨訪(fǎng)觀察患者脊柱側(cè)彎畸形矯正效果。需要指出的是,嚴(yán)重特發(fā)性脊柱側(cè)彎畸形甚至需要多次手術(shù)進(jìn)行矯正。特發(fā)性脊柱側(cè)彎是危害青少年和兒童的常見(jiàn)疾病,關(guān)鍵是要早期發(fā)現(xiàn)、早期治療。但是,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的發(fā)病原因和病理學(xué)產(chǎn)生機(jī)制尚無(wú)明確定論。對(duì)于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的研究包括臨床隨訪(fǎng)研究及動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。其中,通過(guò)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)建立特發(fā)性脊柱側(cè)彎的動(dòng)物模型是研究特發(fā)性脊柱側(cè)彎發(fā)病過(guò)程的基礎(chǔ)方法。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)已經(jīng)對(duì)各種特發(fā)性脊柱側(cè)彎的動(dòng)物模型進(jìn)行了報(bào)道。學(xué)者們致力于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的病因?qū)W研究并為創(chuàng)建理想的動(dòng)物模型進(jìn)行了大量研究,包括鼠類(lèi)、山羊、狗、兔、雞、豬等動(dòng)物在內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并發(fā)表文獻(xiàn)報(bào)道。然而目前尚無(wú)法建立理想的特發(fā)性脊柱側(cè)彎動(dòng)物模型。其中雙足鼠類(lèi)(bipedal rats)為常用的創(chuàng)建脊柱側(cè)彎的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。常用的方法包括為腹腔注射6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)方法;褪黑素(melatonin)拮抗法;肉毒毒素(botulinum toxin A)法。但是不同方法制作特發(fā)性脊柱側(cè)彎鼠類(lèi)動(dòng)物模型的原理及效果尚存爭(zhēng)議。本研究旨在探討不同方法建立雙足大鼠脊柱側(cè)彎動(dòng)物模型的機(jī)制特點(diǎn)及對(duì)臨床及科研工作的指導(dǎo)意義。方法:2015年7月~2015年12月,實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)為河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。本實(shí)驗(yàn)研究完全符合動(dòng)物倫理學(xué)要求。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為SD大鼠,均由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。首先,本實(shí)驗(yàn)研究選取40只已經(jīng)脫離哺乳期的健康SD大鼠。將SD大鼠隨機(jī)分為四組。并且在室溫18℃至22℃;濕度40%RH-60%RH;光照12小時(shí)/天的條件下進(jìn)行常規(guī)分籠飼養(yǎng)。通過(guò)手術(shù)完全切除SD大鼠的前肢及尾部。其中,空白對(duì)照組為10只SD大鼠,僅通過(guò)手術(shù)完全切除大鼠前肢及尾部;單純制作SD雙足大鼠的動(dòng)物模型。同時(shí),本研究設(shè)立了3個(gè)實(shí)驗(yàn)組。其中包括,6-巰基嘌呤組:10只SD大鼠,經(jīng)手術(shù)完全切除大鼠前肢及尾部后在SD雙足大鼠腹腔內(nèi)注入6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine,30m L/kg)。低褪黑素組:10只SD大鼠,手術(shù)完全切除大鼠前肢及尾部后給予腹腔內(nèi)注入2-苯基-N-乙酰色胺(luzindole,0.2mg/kg)。肉毒毒素組:10只SD大鼠,手術(shù)完全切除大鼠前肢及尾部后給予椎旁肌肉注射肉毒毒素(botulinum toxin A)。對(duì)四組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)前后的脊柱曲度指數(shù)(cobb角)、椎體高度變化情況及脊柱側(cè)彎特點(diǎn)進(jìn)行比較評(píng)估,并采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果:所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至完成特發(fā)性脊柱側(cè)彎建模實(shí)驗(yàn)。對(duì)所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行脊柱曲度指數(shù)的測(cè)量發(fā)現(xiàn):空白對(duì)照組未達(dá)到明顯脊柱側(cè)彎標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí),6-巰基嘌呤組、低褪黑素組、肉毒毒素組雙足鼠均發(fā)生了脊柱側(cè)彎。其中,6-巰基嘌呤組雙足鼠cobb角為36.9±5.1度,低褪黑素組cobb角為25.5±3.2度,肉毒毒素組cobb角平均為16.6±3.6度。三組cobb角度數(shù)進(jìn)行比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對(duì)所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行脊柱椎體高度的測(cè)量發(fā)現(xiàn):與空白對(duì)照組進(jìn)行比較,6-巰基嘌呤組雙足鼠椎體高度丟失平均為5.6±1.9mm。低褪黑素組椎體高度增加平均為3.0±1.2mm。肉毒毒素組椎體高度丟失平均為1.6±0.5mm。三組椎體高度變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:本研究中采用不同方法均成功構(gòu)建出雙足鼠的脊柱側(cè)彎模型。應(yīng)用6-巰基嘌呤進(jìn)行腹腔注射的方法可成功建立嚴(yán)重的脊柱側(cè)彎模型。腹腔注射2-苯基-N-乙酰色胺證明低褪黑素效應(yīng)可誘發(fā)脊柱側(cè)彎。肉毒毒素可破壞椎旁肌纖維組織,證明椎旁肌生物力學(xué)平衡破壞是產(chǎn)生脊柱側(cè)彎的原因之一,但造成的影響較小。
【關(guān)鍵詞】:雙足類(lèi) 脊柱側(cè)彎 椎體高度 動(dòng)物模型 實(shí)驗(yàn)研究
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R726.8;R-332
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 前言9-10
- 材料與方法10-12
- 結(jié)果12-13
- 附圖13-16
- 附表16-17
- 討論17-24
- 結(jié)論24-25
- 參考文獻(xiàn)25-30
- 綜述 雙足及四足類(lèi)動(dòng)物脊柱韌帶解剖學(xué)特點(diǎn)及研究進(jìn)展30-40
- 參考文獻(xiàn)35-40
- 致謝40-41
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷41
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