不同方法建立雙足大鼠脊柱側(cè)彎動物模型的特點比較
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【摘要】:目的:特發(fā)性脊柱側(cè)彎(idiopathic scoliosis)為一種脊柱三維度的畸形。其中包括冠狀位、矢狀位和軸位上的序列異常。罹患輕度的脊柱側(cè)彎時,患者通常尚無明顯的軀體畸形,沒有明顯的不適癥狀。然而較重的脊柱側(cè)彎則會嚴重影響嬰幼兒及青少年的生長發(fā)育;純杭怪l(fā)育異常,產(chǎn)生側(cè)彎并最終使軀體變形。嚴重者可以影響心肺功能、甚至累及脊髓,造成癱瘓。輕度的脊柱側(cè)彎可以通過臨床觀察;并通過姿勢調(diào)整及佩戴支具給予曲度矯正。但是當特發(fā)性脊柱側(cè)彎畸形對患者日常生活及工作產(chǎn)生影響后,需要通過手術置入椎弓根釘并進行撐開及加壓復位操作進行矯正。并通過術后長期隨訪觀察患者脊柱側(cè)彎畸形矯正效果。需要指出的是,嚴重特發(fā)性脊柱側(cè)彎畸形甚至需要多次手術進行矯正。特發(fā)性脊柱側(cè)彎是危害青少年和兒童的常見疾病,關鍵是要早期發(fā)現(xiàn)、早期治療。但是,國內(nèi)外學者對于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的發(fā)病原因和病理學產(chǎn)生機制尚無明確定論。對于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的研究包括臨床隨訪研究及動物學實驗研究。其中,通過動物學實驗建立特發(fā)性脊柱側(cè)彎的動物模型是研究特發(fā)性脊柱側(cè)彎發(fā)病過程的基礎方法。國內(nèi)外文獻已經(jīng)對各種特發(fā)性脊柱側(cè)彎的動物模型進行了報道。學者們致力于特發(fā)性脊柱側(cè)彎的病因?qū)W研究并為創(chuàng)建理想的動物模型進行了大量研究,包括鼠類、山羊、狗、兔、雞、豬等動物在內(nèi)進行實驗并發(fā)表文獻報道。然而目前尚無法建立理想的特發(fā)性脊柱側(cè)彎動物模型。其中雙足鼠類(bipedal rats)為常用的創(chuàng)建脊柱側(cè)彎的實驗動物。常用的方法包括為腹腔注射6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)方法;褪黑素(melatonin)拮抗法;肉毒毒素(botulinum toxin A)法。但是不同方法制作特發(fā)性脊柱側(cè)彎鼠類動物模型的原理及效果尚存爭議。本研究旨在探討不同方法建立雙足大鼠脊柱側(cè)彎動物模型的機制特點及對臨床及科研工作的指導意義。方法:2015年7月~2015年12月,實驗地點為河北醫(yī)科大學動物實驗中心。本實驗研究完全符合動物倫理學要求。實驗動物為SD大鼠,均由河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供。首先,本實驗研究選取40只已經(jīng)脫離哺乳期的健康SD大鼠。將SD大鼠隨機分為四組。并且在室溫18℃至22℃;濕度40%RH-60%RH;光照12小時/天的條件下進行常規(guī)分籠飼養(yǎng)。通過手術完全切除SD大鼠的前肢及尾部。其中,空白對照組為10只SD大鼠,僅通過手術完全切除大鼠前肢及尾部;單純制作SD雙足大鼠的動物模型。同時,本研究設立了3個實驗組。其中包括,6-巰基嘌呤組:10只SD大鼠,經(jīng)手術完全切除大鼠前肢及尾部后在SD雙足大鼠腹腔內(nèi)注入6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine,30m L/kg)。低褪黑素組:10只SD大鼠,手術完全切除大鼠前肢及尾部后給予腹腔內(nèi)注入2-苯基-N-乙酰色胺(luzindole,0.2mg/kg)。肉毒毒素組:10只SD大鼠,手術完全切除大鼠前肢及尾部后給予椎旁肌肉注射肉毒毒素(botulinum toxin A)。對四組實驗動物手術前后的脊柱曲度指數(shù)(cobb角)、椎體高度變化情況及脊柱側(cè)彎特點進行比較評估,并采用統(tǒng)計學方法進行對比分析。結(jié)果:所有實驗動物均存活至完成特發(fā)性脊柱側(cè)彎建模實驗。對所有實驗動物進行脊柱曲度指數(shù)的測量發(fā)現(xiàn):空白對照組未達到明顯脊柱側(cè)彎標準。同時,6-巰基嘌呤組、低褪黑素組、肉毒毒素組雙足鼠均發(fā)生了脊柱側(cè)彎。其中,6-巰基嘌呤組雙足鼠cobb角為36.9±5.1度,低褪黑素組cobb角為25.5±3.2度,肉毒毒素組cobb角平均為16.6±3.6度。三組cobb角度數(shù)進行比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。對所有實驗動物進行脊柱椎體高度的測量發(fā)現(xiàn):與空白對照組進行比較,6-巰基嘌呤組雙足鼠椎體高度丟失平均為5.6±1.9mm。低褪黑素組椎體高度增加平均為3.0±1.2mm。肉毒毒素組椎體高度丟失平均為1.6±0.5mm。三組椎體高度變化差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:本研究中采用不同方法均成功構建出雙足鼠的脊柱側(cè)彎模型。應用6-巰基嘌呤進行腹腔注射的方法可成功建立嚴重的脊柱側(cè)彎模型。腹腔注射2-苯基-N-乙酰色胺證明低褪黑素效應可誘發(fā)脊柱側(cè)彎。肉毒毒素可破壞椎旁肌纖維組織,證明椎旁肌生物力學平衡破壞是產(chǎn)生脊柱側(cè)彎的原因之一,但造成的影響較小。
【關鍵詞】:雙足類 脊柱側(cè)彎 椎體高度 動物模型 實驗研究
【學位授予單位】:河北醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R726.8;R-332
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 前言9-10
- 材料與方法10-12
- 結(jié)果12-13
- 附圖13-16
- 附表16-17
- 討論17-24
- 結(jié)論24-25
- 參考文獻25-30
- 綜述 雙足及四足類動物脊柱韌帶解剖學特點及研究進展30-40
- 參考文獻35-40
- 致謝40-41
- 個人簡歷41
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本文關鍵詞:不同方法建立雙足大鼠脊柱側(cè)彎動物模型的特點比較,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:284378
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