背景食管靜脈曲張破裂出血(EVB)是肝硬化門脈高壓最兇險的并發(fā)癥,占上消化道出血所有病因的10%～30%,死亡率高達30%左右,再出血風險也很高。如何在EVB出現(xiàn)之前利用臨床有關指標來評估出血的風險,需要進行病例-對照研究評價。另外,肝硬化患者血漿兒茶酚胺類遞質水平升高,參與了全身和內臟血流動力學障礙,可促進EVB的發(fā)生。兒茶酚胺氧位甲基轉移酶(COMT)是兒茶酚胺的主要代謝酶,人類COMT基因存在1個鳥嘌呤(G)與腺嘌呤(A)的單堿基突變,產(chǎn)生具有臨床意義的基因多態(tài)性,導致COMT酶活性下降3-4倍。COMT基因多態(tài)性與肝硬化門脈高壓及出血風險的關系值得進行研究。 目的對EVB危險因素進行多因素分析,探索肝硬化并發(fā)EVB的規(guī)律。另外,從基因多態(tài)性角度尋找EVB的危險因素,探討COMT基因多態(tài)性是否參與肝硬化門脈高壓進展過程及EVB風險的個體差異。 方法臨床調查肝硬化伴有食管靜脈曲張患者202例,其中出血組112例,未出血組90例。采用單因素分析和Logistic回歸分析,分析臨床各項指標與出血的關系。另外,采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性分析技術,檢測104例肝硬化患者和140例健康對照者COMT基因多態(tài)性;運用高效液相色譜-電化學法檢測其中74例患者血漿兒茶酚胺水平,并進行一年內有無出血的隨訪研究。 結果(1)肝硬化食管靜脈曲張出血組和未出血組在病程、門靜脈直徑(PV)、脾靜脈直徑(SV)、脾臟指數(shù)、紅色征以及食管靜脈曲張分級比較差異具有顯著性(P0.05),進一步分層分析顯示,入院期間再出血組凝血酶原活動度明顯低于未再出血組(P0.01);Logistic回歸分析模型顯示肝硬化并發(fā)EVB的主要預測因素為病程、凝血酶原活動度及紅色征。 (2)隨著肝功能分級加重,血漿去甲腎上腺素水平逐漸升高(P0.05),而腎上腺素水平在不同肝功能分級患者中差異無顯著性;食管靜脈曲張出血患者去甲腎上腺素水平高于未出血患者(P0.05)。 (3)COMT 3種基因型(GG、GA和AA型)和等位基因(G和A等位基因)頻率在肝硬化組與正常對照組分布差異均無顯著性(P0.05);同時,按照有無門脈高壓進行分層分析,肝硬化門脈高壓組與無門脈高壓的單純肝硬化組基因型和等位基因頻率分布差異亦均無顯著性(P0.05)。 (4) GG、GA和AA型組中血漿去甲腎上腺素水平(ng/ml)分別為0.28±0.14;0.41±0.23;0.76±0.16,組間差異具有顯著性(F=11.918, P值均小于0.05);同一肝功能分級各基因型組去甲腎上腺素水平比較,含有突變基因的GA+AA型組明顯高于野生型(GG型)組(P值均小于0.05)。 (5)按照有無食管靜脈曲張出血進行分層,肝硬化出血組GA+AA基因型頻率和A等位基因頻率高于未出血組(46.7% vs 42.4%;26.7% vs 24.6%),但差異均無顯著性;與GG型患者相比,初步隨訪一年,未進行干預的GG、GA和AA型患者的出血率依次升高,但差異亦均無顯著性(P0.05)。 結論病程、凝血酶原活動度及紅色征是肝硬化并發(fā)食管靜脈曲張破裂出血的主要危險因素。中國安徽地區(qū)漢族人群COMT基因存在多態(tài)性,A等位基因的發(fā)生頻率較低, COMT基因多態(tài)性與肝硬化門脈高壓無顯著相關性。未能發(fā)現(xiàn)COMT基因多態(tài)性與肝硬化食管靜脈曲張出血風險存在關聯(lián),需要進一步探討。血漿去甲腎上腺素水平與COMT基因多態(tài)性存在相關性,其基因多態(tài)性可能與血漿去甲腎上腺素共同參與肝硬化疾病的進展過程。
【學位單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2007
【中圖分類】：R575.2
【部分圖文】：

示意圖 1 PCR反應循環(huán)條件經(jīng)1%瓊脂糖電泳，EB染色，電泳顯示切酶酶切系進行限制性內切酶酶切：酶切反應體系10×NEB Buffer 2 μl100×BSA 0.2 μlPCR 反應產(chǎn)物 12 μlNlaIII 內切酶 0.8 μl總體積 加水至總體積 2 37 ℃，溫育 3 h。 μl 加 1 μl 上樣緩沖液在 3.5 ％～4 ％瓊

2） 線性范圍：去甲腎上腺素和腎上腺素濃度在 0.1～2.0 n預測范圍可以包括去甲腎上腺素和腎上腺素在人體內血漿線圖 3A-B�；貧w方程和相關系數(shù)（r）分別為：甲腎上腺素（NE）：Y=-0.027+1.063X， r=0.990，線性范上腺素（E）： Y=0.071+0.882X， r=0.986，線性范

; B 圖：空白血漿加標準樣品 1 ng/ml ; C 圖：肝硬化患者圖 4 血漿兒茶酚胺色譜圖A: blank plasma . B:blank plasma plus standard catecholamines . cirrhotic patient with Child-pugh CFig 4 Chromatographs of plasma catecholamines
【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 趙海峰,聞勤生;肝硬化食管靜脈曲張破裂出血危險因素的多變量分析[J];實用醫(yī)藥雜志;2005年06期

2 鐘友工,朱禧星,鐘學禮,王澤人,朱秋毓,陸明廉;高效液相色譜法測定血清去甲腎上腺素及腎上腺素[J];上海醫(yī)科大學學報;1987年06期

3 張阮章,王沙燕,戴勇,徐輝,翟麗華,石之嶙;血管緊張素轉換酶和血管緊張素受體基因多態(tài)性與冠心病的關系[J];中國心血管雜志;2004年01期

4 吳斌,許戈良;血漿NO、ET水平和肝硬化食管靜脈曲張出血相關性研究[J];安徽醫(yī)科大學學報;2004年03期

5 李琴,孫桂珍,王寶恩,賈繼東,馬紅,魏玉香,叢玉隆,沈靜;肝硬化患者血小板計數(shù)與血小板生成素及脾臟指數(shù)間的關系[J];中華肝臟病雜志;2004年04期

6 李定國,范平;肝硬化食管靜脈曲張破裂出血危險的預測[J];中華消化雜志;2002年03期

7 林菊生,程元橋,田德英,廖家志,劉南植,熊平,梁擴寰;HLA-DRB_1和腫瘤壞死因子α基因多態(tài)性與肝硬化的遺傳易感性[J];中華內科雜志;2002年12期

8 丁大洪;食管胃底靜脈曲張內鏡下診斷和治療規(guī)范試行方案[J];中華消化內鏡雜志;2000年04期

9 邵明,劉焯霖,陶恩祥,陳彪;中國漢族人兒茶酚胺氧位甲基轉移酶基因多態(tài)性[J];中華醫(yī)學遺傳學雜志;2000年03期

10 林菊生,程元橋,廖家智,梁擴寰,熊平;內皮素-1基因TaqI多態(tài)性與肝硬化門靜脈高壓的相關性研究[J];中華醫(yī)學雜志;2003年06期

本文編號：2841391