【摘要】：第一部分 肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因多態(tài)性與武漢地區(qū)新生兒呼吸窘迫綜合征易感性的關(guān)系 目的：了解肺表面活性物質(zhì)蛋白B (SPB)基因多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征易感性的關(guān)系。 方法：應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)(PCR-RFLP)分析技術(shù)及基因測序技術(shù)檢測2008-2010年91名新生兒呼吸窘迫綜合征患兒并與182名同胎齡兒比較,觀察兩組之間肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18及1580多態(tài)性位點基因型和等位基因分布的差異。并比較武漢漢族人與不同種族人之間這兩個位點基因分布差異。 結(jié)果：①肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18A/C多態(tài)性位點在NRDS組和對照組中AA,AC,CC的基因型頻率分別為10.9%,40.6%,48.4%,和6.6%,31.1%,62.1%,兩組基因型分布無統(tǒng)計學(xué)的差異(x2=4.98,P0.05),但A等位基因頻率在NRDS組高于對照組31.3%vs22.3%,P0.05. ②肺表面活性物質(zhì)蛋白B 1580C/T多態(tài)性位點在NRDS組和對照組中TT,TC,CC3種基因型頻率分別為5.5%,30.8%%,63.7%,和6.6%,45.1%,48.4%,兩組基因型分布沒有統(tǒng)計學(xué)的差異()(2=5.88,P0.05),但C等位基因頻率在NRDS組高于對照組(79.1%vs70.9% P0.05) ◎武漢漢族人與美國人、巴西人、丹麥人比較,肺表面活性物質(zhì)蛋白B 1580C/T等位基因的分布比例分別為74%VS26%;35%VS65%；41%VS57%；46%VS54%。P均小于0.05,日本人為72%VS28%,與武漢漢族人比較P大于0.05。武漢漢族人與巴西人、美國人、丹麥人比較,肺表面活性物質(zhì)蛋白B.18A/C等位基因比例為25%VS75%;58%VS42%;57%VS43%；61%VS39%.P均小于0.05。 結(jié)論：中國武漢漢族人中肺表面活性物質(zhì)蛋白B.18A/C及1580C/T基因多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征的易感性相關(guān)。A等位基因和C等位基因分別是這兩個位點的易感基因。不同種族間在SPB1580和-18基因多態(tài)性分布方面有明顯差異。 第二部分 肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因多態(tài)性與支氣管肺發(fā)育不良易感性的關(guān)系 目的：了解肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18A/C和1580C/T基因多態(tài)性與支氣管肺發(fā)育不良易感性的關(guān)系. 方法：應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)(PCR-RFLP)分析技術(shù)及基因測序技術(shù)檢測2007-2010年57名支氣管肺發(fā)育不良患兒及117名對照組同胎齡兒章的SPB-18及1580基因多態(tài)性,比較兩組之間SPB-18及1580基因型和基因分布的差異。 結(jié)果：(Φ)BPD組與對照組中肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18A/C多態(tài)性位點AA、AC、CC基因型頻率分別為14%、45.6%、40.4%和4.9%、31.1%、64.1%；兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,(P0.05),回歸分析顯示：A等位基因增加新生兒患BPD的風(fēng)險為：AC/CC與AA/CC的OR值分別為2.3(95%置信區(qū)間為1.2-4.7)和4.7(95%置信區(qū)間為1.4-16.2),P值分別0.02和0.01。 (2)肺表面活性物質(zhì)蛋白B1580C/T多態(tài)性位點TT,CT,TT基因型在對照組和BPD組分布分別為6.8%、45.6%、47.6%和12.3%、40.4%、47.4%,對照組和BPD組間沒有統(tǒng)計學(xué)差異(#=1.50,P0.05)。 結(jié)論：中國武漢漢族人中肺表面活性物質(zhì)蛋白BB-18基因多態(tài)性是支氣管肺發(fā)育不良的危險因素,基因型為AA者是BPD易感人群。肺表面活性物質(zhì)蛋白B1580 C/T基因多態(tài)性與支氣管肺發(fā)育不良發(fā)病沒有明顯相關(guān)性。 第三部分 高分辨率熔解曲線分析技術(shù)在檢測肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18基因多態(tài)性中的應(yīng)用 目的：探索高分辨率熔解曲線(high resolution melting, HRM)分析技術(shù)在檢測肺表面活性物質(zhì)蛋白B (Surfactant Protein B,SPB)-18基因多態(tài)性中的應(yīng)用。方法：利用高分辨率熔解曲線分析技術(shù)檢測SPB-18基因多態(tài)性位點,并以基因測序這一金標(biāo)準(zhǔn)檢驗其結(jié)果的可靠性。 結(jié)果：應(yīng)用高分辨率熔解曲線分析肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18位點基因多態(tài)性分型結(jié)果顯示,80例樣品中有3種類型熔解曲線, A型42例,B型33例,C型5例。測序結(jié)果顯示,SPB-18A型熔解曲線代表其基因型為CC,B型熔解曲線代表基因型CA,C型熔解曲線代表基因型為AA,高分辨率熔解曲線分析技術(shù)分析結(jié)果與基因測序結(jié)果完全一致。 結(jié)論：本研究表明高分辨率熔解曲線分析技術(shù)分析技術(shù)能準(zhǔn)確檢測肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18基因多態(tài)性,是一種適合大規(guī)模篩查SPB-18多態(tài)性的方法。 第四部分 肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18基因多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征的關(guān)系 目的了解肺表面活性物質(zhì)蛋白B (SPB)-18基因多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征(NRDS)易感性的關(guān)系及其機制。 方法①應(yīng)用高分辨率溶解曲線法(High Resolution Melting HRM)和基因測序法檢測2009年5月-2010年12月100名新生兒呼吸窘迫綜合征患兒及186名同胎齡兒肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18多態(tài)性位點基因型和等位基因的差異。②應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測2009年5月-2010年12月29例基因型為SPB-18CA和32例SPB-18CC的足月新生兒支氣管肺泡灌洗液中SPB水平,比較兩組之間差異. 結(jié)果①肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18A/C多態(tài)性位點在NRDS組和對照組中AA,AC,CC的基因型頻率分別為11.%,40%,49%,和6.5%,31.7%,61.8%,兩組基因型分布無統(tǒng)計學(xué)的差異(χ2=4.83,P0.05。)；但等位基因A頻率在NDRS組和對照組間分別為31%和22.3%,有統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=5.19,P0.05。)②基因型為SPB-18AA者比CC者支氣管肺泡灌洗液中SPB蛋白水平低。其濃度分別是2824±486ng/ml和5167±927ng/ml,兩組間比較P0.05。 結(jié)論肺表面活性物質(zhì)蛋白B-18基因多態(tài)性是NRDS的危險因素,A等位基因可能通過影響肺內(nèi)表面活性物質(zhì)蛋白B水平,增加NRDS易感性。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R722.6

【參考文獻】

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1 曾凌空;李文斌;潘睿;單瑞艷;周玉榮;張佳;常立文;;肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征易感性的研究[J];中國循證兒科雜志;2011年01期

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本文編號：2676075