【摘要】：背景:手足口病(HFMD)是兒童常見的傳染性疾病,其發(fā)病機制與多種免疫細胞的功能改變相關(guān)。γδT細胞是一種天然免疫細胞,盡管已有報道顯示γδT細胞在一些病毒感染性疾病中起重要作用,但目前其在HFMD中的變化及作用還不清楚。本研究擬通過檢測HFMD患兒外周血中γδT細胞的表型與功能的變化,分析γδT細胞在HFMD發(fā)病中的意義。材料與方法:1.受試對象:共納入HFMD患兒83例,其中66例患兒用于橫向研究(與健康對照(HCs)比較),17例患兒用于縱向研究(自身急性期與恢復(fù)期比較)。按照臨床表現(xiàn)或腸道病毒(EV)71 RNA檢測結(jié)果將患兒分為普通型與重癥型組或EV71-與EV71+組。重癥型患兒進一步細分為EV71-重癥型與EV71+重癥型組。同時納入健康對照兒童26例。2.用流式細胞術(shù)檢測外周血中總γδT細胞及其亞群的比例,包括Vδ1T、Vδ2T、幼稚型γδT(CD45RA~+CD27~+,γδTna?ve)、中央記憶型γδT(CD45RA~-CD27~+,γδTcm)、效應(yīng)記憶型γδT(CD45RA~-CD27~-,γδTem)、效應(yīng)型γδT(CD45RA~+CD27~-,γδTeff),以及產(chǎn)生細胞因子的γδT細胞(干擾素(IFN)-γ~+γδT,腫瘤壞死因子(TNF)-α~+γδT,CD107a~+γδT和顆粒酶(Granzyme)B~+γδT細胞)。3.用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血漿炎性細胞因子(IFN-γ、TNF-α和白細胞介素(IL)-6)及趨化因子(單核細胞趨化蛋白(MCP)-1)的水平。4.用軟件SPSS23.0統(tǒng)計分析γδT細胞的表型與功能在各組HFMD患兒與HCs之間或患兒急性期與恢復(fù)期之間的差異,同時分析γδT細胞及其亞群與臨床指標(biāo)之間的相關(guān)性。以P0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.臨床資料分析結(jié)果顯示,重癥型或EV71+的HFMD患兒白細胞(WBC)和中性粒細胞(N)計數(shù)均顯著高于HCs,而前白蛋白(PA)水平顯著低于HCs。2.γδT細胞及其亞群在HFMD患兒中的變化:2.1總γδT細胞比例在HCs和HFMD患兒間沒有顯著性差異。除了EV71-重癥型組,各組HFMD患兒外周γδTeff細胞比例較HCs顯著升高,而γδTcm細胞比例較HCs顯著降低。2.2與HCs相比,重癥型HFMD患兒的Vδ1T、γδTeff、IFN-γ~+γδT及TNF-α~+γδT細胞比例顯著增加,而Vδ2T、γδTcm及Granzyme B~+γδT細胞比例明顯減少。在EV71+的重癥型HFMD患兒中,也呈現(xiàn)出較HCs顯著升高的γδTeff、IFN-γ~+γδT和TNF-α~+γδT細胞。2.3與急性期相比,患兒恢復(fù)期的Vδ1T和γδTeff細胞比例顯著下降,并恢復(fù)至相對正常水平。3.血漿細胞因子和趨化因子的表達:重癥型HFMD患兒,尤其是EV71-的重癥型HFMD患兒的血漿細胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6及趨化因子MCP-1水平顯著高于HCs。4.相關(guān)性分析結(jié)果顯示,在HFMD患兒中,IFN-γ~+γδT及TNF-α~+γδT細胞分別與γδTem和γδTeff細胞比例呈正相關(guān),而與γδTcm細胞比例呈負相關(guān)。同時,Vδ1T細胞比例與WBC計數(shù)、IFN-γ~+γδT或TNF-α~+γδT細胞比例與N計數(shù)、TNF-α~+γδT細胞比例與PCT濃度均呈正相關(guān),而Vδ2T細胞比例與WBC和N計數(shù)呈負相關(guān)。結(jié)論:重癥型HFMD患兒外周Vδ1T和γδTeff細胞比例增加,胞內(nèi)細胞因子產(chǎn)生增強,且與臨床炎癥參數(shù)呈現(xiàn)一定的正相關(guān)性,提示γδT細胞的Vδ1T及效應(yīng)細胞亞群可能參與重癥型HFMD的發(fā)生過程。
【圖文】：

使用流式細胞術(shù)檢測外周血 γ T 細胞及其亞型的百分比。具有代表性的流式圖顯示在圖 1 中。為了全面分析 HCs 和 HFMD 患兒之間這些細胞比例的差異，分別根據(jù)疾病 重程度或 EV71 RNA 檢測結(jié)果，將 HFMD 患兒分為普通型和重癥型組或 EV71-和 EV71+組。在這些 HFMD 患兒亞組和 HCs 組之間進行差異的統(tǒng)計學(xué)分析。如圖 2 所示，我們的結(jié)果顯示，外周總 γ T 細胞的比例僅在 EV71-和 EV71-重癥型患兒中略微增加，ш各 HFMD 亞組和 HCs 之間均無顯著性差異（圖 2A-C）。у HCs 相比，HFMD 患兒 V 1T 細胞比例有增加的趨勢，但僅在 HCs 和重癥型HFMD 患兒之間發(fā)現(xiàn)顯著性差異（均值，15.8％ vs 27.2％）（P=0.03）。HFMD 患兒的 V 2T 細胞比例低于 HCs（59.7％），并ш普通型（44.5％）（P=0.033）、重癥型 HFMD 組（46.8％）（P=0.041）у HCs 組之間均顯示出顯著性差異。此外，HCs和 EV71-或 EV71+HFMD 患兒之間，，或者 HCs у EV71-重癥型或 EV71+重癥型HFMD 患兒之間的 V 1T 細胞和 V 2T 細胞比例沒有顯著性差異。

圖 2. HCs 和 HFMD 患兒外周總 γ T 細胞及亞型 V 1T、V 2T 細胞比例的比較分析。統(tǒng)計分析了 HCs（n=26），普通型 HFMD（n=21）和重癥型 HFMD（n=45）組（分別為 A 和 D）之間，HCs，EV71-HFMD（n=28）和 EV71+HFMD（n=25）組（分別為 B 和 E）之間，以及HCs，EV71-重癥型 HFMD（n=19）和 EV71+重癥型 HFMD（n=17）組（分別為 C 和 F）之間的 γ T、V 1T 或 V 2T 細胞比例的差異。數(shù)據(jù)顯示為平均值±SEM。（*P<0.05）。Fig. 2. Proportions of peripheral γ T cells, subset V 1 T and V 2 T cells in the HCs group andHFMD patients. Differences in percentage of γ T, V 1 T or V 2 T cells were statisticallyanalyzed among HCs (n=26), mild HFMD (n=21) and severe HFMD (n=45) groups (A and D,respectively), among HCs, EV71- HFMD (n=28), and EV71+ HFMD (n=25) groups (B and E,respectively), and among HCs, EV71- severe HFMD (n=19) and EV71+ severe HFMD (n=17)groups (C and F, respectively). Data are shown as the mean ±SEM. ( P<0.05).3.3 重癥型 HFMD 患兒 γ Teff 細胞比例增加效應(yīng)細胞是直接發(fā)揮功能的免疫細胞，如圖 1 所示，通過流式細胞儀檢測表
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R725.1

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 何競時,趙令武,范俊,黃友忠,孫水林;促肝細胞生長素治療重癥型病毒性肝炎療效分析[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1997年04期

2 ;成人原發(fā)性腹膜炎24例臨床分析[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1986年02期

3 李寶杰,孫伯麟,吳運廷;重癥型酒精性肝損害死亡一例報告[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1988年03期

4 呂新生;韓明;胡國齡;翁紹紀(jì);范學(xué)工;謝建蘋;張錚;;人胎肝細胞塊腹腔輸注移植治療重癥型肝炎[J];醫(yī)師進修雜志;1988年08期

5 ;醫(yī)源性播散性血管內(nèi)凝血(節(jié)選)[J];臨床薈萃;1989年06期

6 鄒鼎明,陳慧萍;重癥型胰腺炎預(yù)后同術(shù)前準(zhǔn)備和手術(shù)時機的相關(guān)分析(附30例報告)[J];實用外科雜志;1989年01期

7 張國豹;陳世春;;老年人流行性腦脊髓膜炎(附16例分析)[J];江西醫(yī)藥;1989年02期

8 程少均;周再生;蘇洽光;;甲型H1N1流感危重癥型合并ARDS 1例報告[J];山東醫(yī)藥;2010年17期

9 羅溶溶;吳瑞明;;血必凈聯(lián)合無創(chuàng)通氣治療慢性阻塞性肺疾病合并重癥型呼吸衰竭的臨床分析[J];中國藥房;2010年47期

10 李惠琴,韓臨鳳;成人重癥型ITP9例臨床分析[J];實用醫(yī)技雜志;2005年13期

相關(guān)會議論文 前5條

1 馬羽萍;趙玲;;運用“肝與大腸相通”理論治療重癥型肝病的臨床研究[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

2 張運周;高岱Oz;劉剛;宿英英;;9例成人重癥型流行性乙型腦炎臨床特點分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編（上）[C];2014年

3 曾愛誼;周海明;潘世穎;黃海儐;;前列地爾脂微球制劑(Lipo PGE_1)治療重癥型肝炎的療效觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

4 王佳福;楊英昕;張敬中;周婷嬌;劉濤;;膠原酶治療重癥型腰椎間盤突出癥60例臨床體會[A];第11屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2003年

5 羅林;唐尤佳;淦作松;楊楓;翟小麗;熊丹;;依達拉奉在重癥型顱腦損傷急性期中的應(yīng)用(附74例報告)[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第二屆全國代表大會論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 唐明山　;吸煙能抗“非典”嗎？[N];解放軍報;2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 沈妍希;外周γδT細胞的表型與功能在兒童手足口病中的變化及其臨床意義[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2019年

2 黃少華;手足口病患兒臨床特點及血清細胞因子變化[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

3 李燕;147例兒童腺病毒肺炎的臨床與影像學(xué)表現(xiàn)研究分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

4 何艷;IL-10和IFN-γ在兒童手足口病重癥型早期診斷中的價值及意義[D];寧波大學(xué);2017年

5 傅文輝;36例腦靜脈竇血栓形成治療的臨床分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

6 安聰靜;480例甲型H1N1流感患者的影像學(xué)變化及臨床特點[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

7 黃惠媛;2004至2008年734例住院藥疹病例回顧分析[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

8 馬飛飛;糖皮質(zhì)激素治療SARS的應(yīng)用價值研究[D];華中科技大學(xué);2008年

本文編號：2649390