【摘要】：研究目的研究外用復方紫草油治療小兒尿布皮炎(Diaper Dermatitis,DD)的抗炎機制,旨在為復方紫草油外用治療小兒DD提供實驗研究依據。研究方法1.采用Rev Man 5.3軟件進行Meta分析評估外用復方紫草油治療小兒DD的臨床有效性和安全性;并從“火郁發(fā)之”認識復方紫草油治療小兒DD。2.根據小兒DD多屬變應性接觸性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD),借用幼齡小鼠ACD模型作為小兒DD模型,并以幼齡小鼠急性耳廓腫脹動物模型、幼齡小鼠皮膚毛細血管通透性亢進動物模型作為補充,聯合評價外用復方紫草油治療小兒DD的抗炎作用;并采用HE染色觀察幼齡小鼠耳廓組織的病理形態(tài),硝酸還原酶法檢測幼齡小鼠血清NO含量,ELISA法檢測血清IL-1β、TNF-α和IL6-的蛋白含量,免疫組化檢測耳廓組織P2X7受體和NF-κ B/p65的表達,RT-PCR檢測耳廓組織P2X7受體mRNA和NF-κ B/p65mRNA的水平,從P2X7受體/NF-κB 細胞通路探討外用復方紫草油治療小兒DD的抗炎作用機理。研究結果1.外用復方紫草油治療小兒DD的Meta分析結果:研究共納入11項RCT,合計小兒DD1468例;外用復方紫草油治療小兒DD,與局部其他治療(外用菜籽油、香油、護臀霜、鞣酸軟膏、氧化鋅油、紅霉素軟膏或爐甘石洗劑)相比,在臨床有效率、痊愈率和平均痊愈天數方面的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。11項RCT共計治療組802例,均未提及有不良反應。2.從“火郁發(fā)之”理論認識復方紫草油治療小兒DD:復方紫草油以紫草為君,忍冬藤、白芷為臣,麻油為佐,冰片為使;方中各藥都有良好的抗炎作用,能快速修復炎性皮膚。全方功效為清熱涼血解毒,散風除濕消腫,佐以潤膚生肌,遵從“火郁發(fā)之”之旨,涼之、清之、散之、潤之,將小兒DD之“郁火”因勢利導而解。3.實驗一外用復方紫草油對幼齡小鼠ACD的影響外用復方紫草油對幼齡小鼠ACD影響的系列實驗,結果為:與模型組相比,外用復方紫草油對幼齡小鼠ACD耳腫脹度有明顯抑制作用(P0.01),而麻油對耳腫脹度的抑制作用尚不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0.05);外用復方紫草油能明顯降低幼齡小鼠ACD血清IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白含量(P0.01),而麻油降低血清IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白含量尚不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0 0.05);外用復方紫草油能明顯降低幼齡小鼠ACD血清N0含量(P0.01),而麻油降低血清N0含量尚不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。經HE染色,鏡下見醋酸氟輕松乳膏組、復方紫草油高濃度組(2倍濃度)和復方紫草油組給藥后耳廓腫脹、充血及炎細胞浸潤程度顯著好轉。經免疫組化檢測,鏡下見醋酸氟輕松乳膏組、復方紫草油高濃度組和復方紫草油組隨著炎癥的顯著好轉P2X7受體、NF-κ B/p65陽性表達也顯著減弱。經RT-PCR檢測,模型組幼齡小鼠耳廓腫脹組織P2X7受體mRNA表達水平明顯高于正常組(P0.01),模型組幼齡小鼠耳廓腫脹組織NF-κ B/p65 mRNA表達水平明顯高于正常組(P0.0 5);與模型組比較,醋酸氟輕松乳膏組、復方紫草油高濃度組、復方紫草油組幼齡小鼠耳廓腫脹組織P2X7受體mRNA表達水平明顯降低(P0 0.05),醋酸氟輕松乳膏組、紫草油組、復方紫草油高濃度組、復方紫草油組幼齡小鼠耳廓腫脹組織NF-κ B/p65 mRNA表達水平也明顯降低(P0.05);而麻油組、紫草油組、復方紫草油低濃度組P2X7受體mRNA表達水平和麻油組、復方紫草油低濃度組NF-κ B/p 6 5 mRNA表達水平均較模型組有不同程度的降低,但尚不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.實驗二外用復方紫草油對幼齡小鼠急性耳廓腫脹的影響外用復方紫草油對幼齡小鼠急性耳廓腫脹影響的系列實驗,結果為:與模型組相比,預防性或治療性外用復方紫草油對二甲苯所致幼齡小鼠耳廓腫脹的抑制作用尚不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與模型組相比,預防性或治療性外用復方紫草油對巴豆油所致幼齡小鼠耳廓腫脹均有明顯抑制作用(P0.01)。治療性外用復方紫草油能明顯降低巴豆油所致耳廓腫脹幼齡小鼠血清TNFα-、IL-6蛋白含量(P0.01);能明顯降低幼齡小鼠血清NO含量(P0.01)。經HE染色,鏡下見復方紫草油給藥后耳廓腫脹、充血及炎細胞浸潤程度顯著好轉。經免疫組化檢測,鏡下見復方紫草油給藥后隨著炎癥的顯著好轉P2X7受體陽性表達也顯著減弱。5.實驗三外用復方紫草油對幼齡小鼠皮膚毛細血管通透性亢進的影響:與模型組相比,外用復方紫草油對二甲苯所致幼齡小鼠皮膚毛細血管通透性亢進有明顯抑制作用(P0 0.05),而外用麻油、紫草油、復方紫草油低濃度液(1/2倍濃度)對二甲苯所致幼齡小鼠皮膚毛細血管通透性亢進尚的抑制作用不能認為差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。研究結論1.外用復方紫草油治療小兒DD的Meta分析,得出:局部外用復方紫草油治療小兒DD能明顯提高臨床有效率、治愈率,明顯縮短治療時間,而且尚未發(fā)現不良反應。2.基于“火郁發(fā)之”理論認識復方紫草油治療小兒DD,得出:復方紫草油適用于治療小兒DD,而且方中各藥都具有良好的抗炎作用。3.外用復方紫草油對幼齡小鼠ACD影響的系列實驗,得出外用復方紫草油對幼齡小鼠ACD具有治療作用,其抗炎作用機制與降低幼齡小鼠血清N0含量,降低血清1L-1β、TNF-α、IL-6的蛋白含量,拮抗組織P2X7受體、NF-κ B/p65的表達,降低組織P2X7受體mRNA、NF-κ B/p65 mRNA的水平有關,可能是通過抑制P2X7受體/NF-κ B細胞通路來發(fā)揮抗炎作用。4.外用復方紫草油對幼齡小鼠急性耳廓腫脹影響的系列實驗,得出:外用復方紫草油對幼齡小鼠急性耳廓炎癥具有預防和治療作用,其作用機制可能與降低血清NO含量,降低血清TNF-α、IL-6的蛋白含量,拮抗組織P2X7受體表達有關。5,外用復方紫草油對幼齡小鼠皮膚毛細血管通透性亢進影響的實驗,得出:外用復方紫草油對幼齡小鼠急性皮膚毛細血管通透性亢進具有改善作用。研究總結論:外用復方紫草油治療小兒DD具有良好的抗炎作用,這可能與其抑制P2X7受體/NF-κ B細胞通路有關。
【圖文】：

總偏倚分析評估圖

2 . 4 . 1 有 效 率1 1 項 R C T 評 價 了 兩 組 治 療 對 有 效 率 的 影 響 ， 其 中 3 項 R C T[ 4 3 、 4 8 、 4 9 ]兩 組 有 效 率 均 為 1 0 0 % ，無 統(tǒng) 計 學 差 異 。合 并 剩 余 8 篇 ，，結 果 發(fā) 現 I2= 0 % ，P = 0 . 6 7 ， 說 明 無 異 質 性 ， 對 其 研 究 進 行 合 并 ， 采 用 固 定 效 應 模 型 ， 總O R 值 = 1 7 . 6 0 ， 9 5 % C I [ 8 . 6 5 , 3 5 . 9 7 ] ， 提 示 M e t a 分 析 結 果 穩(wěn) 健 ， 表 明復 方 紫 草 油 治 療 組 的 有 效 率 顯 著 大 于 局 部 其 他 治 療 組 ， P ＜ 0 . 0 1 ， 有顯 著 統(tǒng) 計 學 差 異 。 結 果 詳 見 森 林 圖 ， 如 下 圖 4 所 示 。 對 1 1 項 R C T 進行 發(fā) 表 偏 倚 檢 測 ， 可 見 漏 斗 圖 基 本 對 稱 ， 如 下 圖 5 所 示 , 表 明 發(fā) 表 性偏 倚 的 可 能 性 較 小 。
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R272


本文編號：2644982