【摘要】：研究目的研究外用復(fù)方紫草油治療小兒尿布皮炎(Diaper Dermatitis,DD)的抗炎機(jī)制,旨在為復(fù)方紫草油外用治療小兒DD提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。研究方法1.采用Rev Man 5.3軟件進(jìn)行Meta分析評(píng)估外用復(fù)方紫草油治療小兒DD的臨床有效性和安全性;并從“火郁發(fā)之”認(rèn)識(shí)復(fù)方紫草油治療小兒DD。2.根據(jù)小兒DD多屬變應(yīng)性接觸性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD),借用幼齡小鼠ACD模型作為小兒DD模型,并以幼齡小鼠急性耳廓腫脹動(dòng)物模型、幼齡小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)動(dòng)物模型作為補(bǔ)充,聯(lián)合評(píng)價(jià)外用復(fù)方紫草油治療小兒DD的抗炎作用;并采用HE染色觀察幼齡小鼠耳廓組織的病理形態(tài),硝酸還原酶法檢測(cè)幼齡小鼠血清NO含量,ELISA法檢測(cè)血清IL-1β、TNF-α和IL6-的蛋白含量,免疫組化檢測(cè)耳廓組織P2X7受體和NF-κ B/p65的表達(dá),RT-PCR檢測(cè)耳廓組織P2X7受體mRNA和NF-κ B/p65mRNA的水平,從P2X7受體/NF-κB 細(xì)胞通路探討外用復(fù)方紫草油治療小兒DD的抗炎作用機(jī)理。研究結(jié)果1.外用復(fù)方紫草油治療小兒DD的Meta分析結(jié)果:研究共納入11項(xiàng)RCT,合計(jì)小兒DD1468例;外用復(fù)方紫草油治療小兒DD,與局部其他治療(外用菜籽油、香油、護(hù)臀霜、鞣酸軟膏、氧化鋅油、紅霉素軟膏或爐甘石洗劑)相比,在臨床有效率、痊愈率和平均痊愈天數(shù)方面的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。11項(xiàng)RCT共計(jì)治療組802例,均未提及有不良反應(yīng)。2.從“火郁發(fā)之”理論認(rèn)識(shí)復(fù)方紫草油治療小兒DD:復(fù)方紫草油以紫草為君,忍冬藤、白芷為臣,麻油為佐,冰片為使;方中各藥都有良好的抗炎作用,能快速修復(fù)炎性皮膚。全方功效為清熱涼血解毒,散風(fēng)除濕消腫,佐以潤膚生肌,遵從“火郁發(fā)之”之旨,涼之、清之、散之、潤之,將小兒DD之“郁火”因勢(shì)利導(dǎo)而解。3.實(shí)驗(yàn)一外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠ACD的影響外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠ACD影響的系列實(shí)驗(yàn),結(jié)果為:與模型組相比,外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠ACD耳腫脹度有明顯抑制作用(P0.01),而麻油對(duì)耳腫脹度的抑制作用尚不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);外用復(fù)方紫草油能明顯降低幼齡小鼠ACD血清IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白含量(P0.01),而麻油降低血清IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白含量尚不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0 0.05);外用復(fù)方紫草油能明顯降低幼齡小鼠ACD血清N0含量(P0.01),而麻油降低血清N0含量尚不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)HE染色,鏡下見醋酸氟輕松乳膏組、復(fù)方紫草油高濃度組(2倍濃度)和復(fù)方紫草油組給藥后耳廓腫脹、充血及炎細(xì)胞浸潤程度顯著好轉(zhuǎn)。經(jīng)免疫組化檢測(cè),鏡下見醋酸氟輕松乳膏組、復(fù)方紫草油高濃度組和復(fù)方紫草油組隨著炎癥的顯著好轉(zhuǎn)P2X7受體、NF-κ B/p65陽性表達(dá)也顯著減弱。經(jīng)RT-PCR檢測(cè),模型組幼齡小鼠耳廓腫脹組織P2X7受體mRNA表達(dá)水平明顯高于正常組(P0.01),模型組幼齡小鼠耳廓腫脹組織NF-κ B/p65 mRNA表達(dá)水平明顯高于正常組(P0.0 5);與模型組比較,醋酸氟輕松乳膏組、復(fù)方紫草油高濃度組、復(fù)方紫草油組幼齡小鼠耳廓腫脹組織P2X7受體mRNA表達(dá)水平明顯降低(P0 0.05),醋酸氟輕松乳膏組、紫草油組、復(fù)方紫草油高濃度組、復(fù)方紫草油組幼齡小鼠耳廓腫脹組織NF-κ B/p65 mRNA表達(dá)水平也明顯降低(P0.05);而麻油組、紫草油組、復(fù)方紫草油低濃度組P2X7受體mRNA表達(dá)水平和麻油組、復(fù)方紫草油低濃度組NF-κ B/p 6 5 mRNA表達(dá)水平均較模型組有不同程度的降低,但尚不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.實(shí)驗(yàn)二外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠急性耳廓腫脹的影響外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠急性耳廓腫脹影響的系列實(shí)驗(yàn),結(jié)果為:與模型組相比,預(yù)防性或治療性外用復(fù)方紫草油對(duì)二甲苯所致幼齡小鼠耳廓腫脹的抑制作用尚不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,預(yù)防性或治療性外用復(fù)方紫草油對(duì)巴豆油所致幼齡小鼠耳廓腫脹均有明顯抑制作用(P0.01)。治療性外用復(fù)方紫草油能明顯降低巴豆油所致耳廓腫脹幼齡小鼠血清TNFα-、IL-6蛋白含量(P0.01);能明顯降低幼齡小鼠血清NO含量(P0.01)。經(jīng)HE染色,鏡下見復(fù)方紫草油給藥后耳廓腫脹、充血及炎細(xì)胞浸潤程度顯著好轉(zhuǎn)。經(jīng)免疫組化檢測(cè),鏡下見復(fù)方紫草油給藥后隨著炎癥的顯著好轉(zhuǎn)P2X7受體陽性表達(dá)也顯著減弱。5.實(shí)驗(yàn)三外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)的影響:與模型組相比,外用復(fù)方紫草油對(duì)二甲苯所致幼齡小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)有明顯抑制作用(P0 0.05),而外用麻油、紫草油、復(fù)方紫草油低濃度液(1/2倍濃度)對(duì)二甲苯所致幼齡小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)尚的抑制作用不能認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。研究結(jié)論1.外用復(fù)方紫草油治療小兒DD的Meta分析,得出:局部外用復(fù)方紫草油治療小兒DD能明顯提高臨床有效率、治愈率,明顯縮短治療時(shí)間,而且尚未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。2.基于“火郁發(fā)之”理論認(rèn)識(shí)復(fù)方紫草油治療小兒DD,得出:復(fù)方紫草油適用于治療小兒DD,而且方中各藥都具有良好的抗炎作用。3.外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠ACD影響的系列實(shí)驗(yàn),得出外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠ACD具有治療作用,其抗炎作用機(jī)制與降低幼齡小鼠血清N0含量,降低血清1L-1β、TNF-α、IL-6的蛋白含量,拮抗組織P2X7受體、NF-κ B/p65的表達(dá),降低組織P2X7受體mRNA、NF-κ B/p65 mRNA的水平有關(guān),可能是通過抑制P2X7受體/NF-κ B細(xì)胞通路來發(fā)揮抗炎作用。4.外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠急性耳廓腫脹影響的系列實(shí)驗(yàn),得出:外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠急性耳廓炎癥具有預(yù)防和治療作用,其作用機(jī)制可能與降低血清NO含量,降低血清TNF-α、IL-6的蛋白含量,拮抗組織P2X7受體表達(dá)有關(guān)。5,外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)影響的實(shí)驗(yàn),得出:外用復(fù)方紫草油對(duì)幼齡小鼠急性皮膚毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)具有改善作用。研究總結(jié)論:外用復(fù)方紫草油治療小兒DD具有良好的抗炎作用,這可能與其抑制P2X7受體/NF-κ B細(xì)胞通路有關(guān)。
【圖文】：

總偏倚分析評(píng)估圖

2 . 4 . 1 有 效 率1 1 項(xiàng) R C T 評(píng) 價(jià) 了 兩 組 治 療 對(duì) 有 效 率 的 影 響 ， 其 中 3 項(xiàng) R C T[ 4 3 、 4 8 、 4 9 ]兩 組 有 效 率 均 為 1 0 0 % ，無 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 差 異 。合 并 剩 余 8 篇 ，，結(jié) 果 發(fā) 現(xiàn) I2= 0 % ，P = 0 . 6 7 ， 說 明 無 異 質(zhì) 性 ， 對(duì) 其 研 究 進(jìn) 行 合 并 ， 采 用 固 定 效 應(yīng) 模 型 ， 總O R 值 = 1 7 . 6 0 ， 9 5 % C I [ 8 . 6 5 , 3 5 . 9 7 ] ， 提 示 M e t a 分 析 結(jié) 果 穩(wěn) 健 ， 表 明復(fù) 方 紫 草 油 治 療 組 的 有 效 率 顯 著 大 于 局 部 其 他 治 療 組 ， P ＜ 0 . 0 1 ， 有顯 著 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 差 異 。 結(jié) 果 詳 見 森 林 圖 ， 如 下 圖 4 所 示 。 對(duì) 1 1 項(xiàng) R C T 進(jìn)行 發(fā) 表 偏 倚 檢 測(cè) ， 可 見 漏 斗 圖 基 本 對(duì) 稱 ， 如 下 圖 5 所 示 , 表 明 發(fā) 表 性偏 倚 的 可 能 性 較 小 。
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R272


本文編號(hào)：2644982