【摘要】： 本實(shí)驗(yàn)建立H9c2大鼠心肌細(xì)胞缺氧缺血模型,采用MTT法測定細(xì)胞存活率、流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率、免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測Cyt C及Caspase-3蛋白表達(dá),并應(yīng)用FDP進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果表明:缺氧12小時(shí)后H9c2細(xì)胞存活率降低、凋亡率升高,Cyt C及Caspase-3蛋白表達(dá)增高;FDP提高細(xì)胞存活率,降低細(xì)胞凋亡率及Cyt C、Caspase-3蛋白表達(dá)。結(jié)扎7日齡新生大鼠一側(cè)頸總動脈后,吸入低濃度氧復(fù)制HIBD模型,證實(shí)了它是一個(gè)穩(wěn)定、可重復(fù)性好,設(shè)備簡單,可大規(guī)模應(yīng)用的模擬新生兒HIBD的動物模型。在此模型基礎(chǔ)上,實(shí)驗(yàn)分為3組:HIBD組、FDP組及NC組。應(yīng)用TUNEL檢測法發(fā)現(xiàn)HIBD后12h心肌細(xì)胞凋亡明顯增高,72h達(dá)高峰,7d仍有少量凋亡存在;FDP組較HIBD組心肌細(xì)胞凋亡率降低。應(yīng)用免疫組化法,首次研究線粒體通道上的凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bax、Bcl-2及Cyt C在新生大鼠HIBD后不同時(shí)間點(diǎn)心肌細(xì)胞的表達(dá),結(jié)果表明:Caspase-3、Bax、Bcl-2及Cyt C蛋白表達(dá)增高,且與凋亡細(xì)胞數(shù)之間呈直線正相關(guān);FDP抑制Bax、Caspase-3、Cyt C蛋白表達(dá),提高Bcl-2蛋白表達(dá)及Bcl-2/Bax的比值。同時(shí)動態(tài)觀察HIBD后血清MDA、SOD及NO含量,結(jié)果表明:HIBD后血清MDA、NO增高,SOD降低,MDA與凋亡細(xì)胞數(shù)之間呈直線正相關(guān),SOD與凋亡細(xì)胞數(shù)呈直線負(fù)相關(guān);FDP可降低MDA,增高SOD。提示FDP可能通過抑制心肌細(xì)胞凋亡而發(fā)揮保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。
【圖文】：

NC組流式圖

HI組流式圖
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R722.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2633584