【摘要】：目的通過建立新生鼠窒息模型,觀察窒息后不同時間點心肌組織中氧化應激相關酶類(SOD、GSH-PX、XOD)活力、脂質過氧化物產物(MDA)含量和心肌細胞凋亡指數的變化。研究在窒息致心肌損傷中氧化應激對心肌凋亡的影響,為新生兒窒息致心肌損傷的預防和治療提供可靠實驗依據。 方法取7日齡新生大鼠48只,隨機分為6組(第1組為正常對照組,第2-6組為窒息組：分別為窒息后6h、24h、48h、72h、7d組),每組8只。將實驗動物分別放入55ml的磨口瓶中,瓶內放入0.005kg的鈉石灰,待動物安靜后,窒息組塞緊瓶塞半小時,取出復氧120min后,放回母鼠身邊繼續(xù)喂養(yǎng),分別于窒息后6h、24h、48h、72h、7d后處死;正常對照組放入55ml的磨口瓶中半小時不塞瓶塞,取出120min后放回母鼠身邊繼續(xù)喂養(yǎng),6h后全部處死。在不同的時間段采取心肌組織樣本,采用TUNEL法檢測心肌細胞凋亡,并進行陽性細胞的計數；采用黃嘌呤氧化酶法測心肌組織勻漿SOD活性；采用二硫代二硝基苯甲酸法檢測心肌組織勻漿GSH-PX活力；采用硫代巴比妥酸法檢測心肌組織勻漿MDA含量；采用化學比色法測定心肌組織勻漿XOD活性。最后應用單因素方差分析、相關性分析等統(tǒng)計學方法進行數據分析。 結果(1)窒息后6h、24h、48h、72h組與對照組相比心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力明顯下降(P值0.01),窒息后7d組與對照組相比兩組差異無統(tǒng)計學意義(P值0.05)。(2)窒息后6h、24h、48h、72h組與對照組相比心肌MDA含量、心肌XOD活性明顯增高(P值0.05),窒息后7d組與對照組相比兩組差異無統(tǒng)計學意義(P值0.05)。(3)窒息后各組心肌細胞凋亡指數明顯高于對組,有顯著差異(P值0.05),72h組心肌凋亡指數最高,7d組陽性細胞數減少,但仍高于正常對照組。(4)心肌細胞凋亡指數與心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力呈直線負相關,心肌細胞凋亡指數與心肌MDA含量、心肌XOD活力呈直線正相關。 結論窒息后心肌組織氧化應激促進心肌細胞凋亡；心肌細胞凋亡為窒息后心肌損傷的一種主要形式；抗氧化劑可能是治療窒息致心肌損傷中的一種重要的方法；在窒息后7天時心肌組織氧化應激逐漸恢復正常,心肌細胞凋亡開始減少但仍高與正常,提示對心肌損傷的防治應持續(xù)至窒息后7天,以免加重心肌損傷和產生后遺癥。
【圖文】：

躁動不安、呼吸頻率加快;約15min時躁動不安較劇烈;約23而n時開始倦怠、不愛活動口周、眼眶明顯發(fā)組;約28min時嗜睡，對外界刺激發(fā)應差，全身皮膚發(fā)組。(見圖2一5)1.2心肌組織石蠟切片HE染色的病理變化:正常組:心肌細胞呈條索狀排列，胞漿清晰可見，無凋亡細胞及炎性細胞滲出(見圖6);窒息組:心肌細胞排列紊亂，，失去條索狀結構，心內膜表面有少許炎性滲出，伴炎性細胞浸潤，可見凋亡細胞。(見圖7一11)圖l剛入缺氧瓶:安靜圖2入缺氧瓶8~:開始躁動不安圖3入缺氧瓶15min:躁動不安較劇烈圖4入缺氧瓶23~:開始倦怠口周、眼眶明顯發(fā)給

L己明醫(yī)學院碩十研究生學位論文結果1動物模型的鑒定1.1缺氧表現:實驗前各組新生大鼠表現正常(見圖1)，窒息模型制作中隨著時間的持續(xù)全部發(fā)生缺氧表現，為主要表現為入缺氧瓶后約7一8min開始出現躁動不安、呼吸頻率加快;約15min時躁動不安較劇烈;約23而n時開始倦怠、不愛活動口周、眼眶明顯發(fā)組;約28min時嗜睡，對外界刺激發(fā)應差，全身皮膚發(fā)組。(見圖2一5)1.2心肌組織石蠟切片HE染色的病理變化:正常組:心肌細胞呈條索狀排列，胞漿清晰可見，無凋亡細胞及炎性細胞滲出(見圖6);窒息組:心肌細胞排列紊亂，失去條索狀結構，心內膜表面有少許炎性滲出，伴炎性細胞浸潤，可見凋亡細胞。(見圖7一11)
【學位授予單位】：昆明醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R722.1

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本文編號：2632207