【摘要】： 目的通過建立動物模型,研究口服抗生素對新生大鼠腸道菌群的變化及腸道免疫發(fā)育的影響。 方法選用50只7日齡新生SD大鼠,雌雄不限,隨機(jī)分為5組,即對照組(A)、抗生素組(B)、益生菌組(C)、益生菌干預(yù)組(D)和生理鹽水組(E),每組10只,后4組為模型組。B組:每天100mg/kg的頭孢克洛(希刻勞)灌胃(用PH7.4的生理鹽水配制后為0.2ml/只),1次/d,連續(xù)喂養(yǎng)2周;C組:長雙歧桿菌灌胃(0.5億活菌/ml),0.2ml/只,1次/d,連續(xù)喂養(yǎng)2周;D組:先頭孢克洛0.2ml灌胃,2小時后再灌等量的長雙歧桿菌0.2ml,共0.4ml/只,1次/d,連續(xù)2周;E組:每天灌以等量的生理鹽水(0.2ml/只);A組:實驗前不做處理就處死。實驗結(jié)束后每組隨機(jī)抽取8只采用斷頸法處死動物,取少許新鮮盲腸內(nèi)容物糞便涂片;采用16SrRNA熒光PCR技術(shù)檢測盲腸內(nèi)容物中雙歧桿菌、乳酸桿菌、脆弱類桿菌及梭菌的相對含量;免疫組化方法檢測末端回腸腸組織中CD4、CD8的表達(dá)。 結(jié)果 1.腸道菌群的檢測 1.1糞便涂片結(jié)果顯示:對照組糞便中總細(xì)菌數(shù)量較少,革蘭氏陽性桿菌占絕對優(yōu)勢,革蘭陰性桿菌數(shù)相對少,也有少量的革蘭陰性球菌和革蘭陽性球菌,呈典型新生鼠菌群分布狀態(tài)。模型組與對照組相比,腸道細(xì)菌總數(shù)明顯增多,但每組腸道中各類菌群數(shù)占總細(xì)菌數(shù)比率有變化。結(jié)果顯示:抗生素組與其余四組相比G~+b占腸道總細(xì)菌數(shù)比率明顯下降,G~-b及G~+c占總細(xì)菌數(shù)比率明顯升高差異有顯著性(P＜0.01);益生菌干預(yù)組及生理鹽水組相對對照組、益生菌組G~+b占總細(xì)菌數(shù)的比率下降,G~-b占總細(xì)菌數(shù)的比率升高差異均有顯著性(P＜0.01);益生菌干預(yù)組與生理鹽水組之間、對照組與益生菌組之間各類菌群數(shù)占總細(xì)菌數(shù)比率差異均無顯著性;各組G~-c的比率差異無顯著性。 1.2各組腸道中四種細(xì)菌相對含量的變化:抗生素組與益生菌組、生理鹽水組相比BB、LB含量降低,CL含量升高差異有顯著性(P＜0.05);益生菌干預(yù)組與抗生素組相比BB含量升高,CL含量降低差異有顯著性(P＜0.05);抗生素組與對照組相比CL含量升高,差異有顯著性(P＜0.05);益生菌組、益生菌干預(yù)組、生理鹽水組與對照組相比BB含量升高,BF含量降低差異有顯著性(P＜0.05);益生菌組相對益生菌干預(yù)組及生理鹽水組BB含量升高差異有顯著性(P＜0.05);益生菌干預(yù)組與生理鹽水組相比四種細(xì)菌含量差異均無顯著性。 2.各組腸組織中CD4、CD8的表達(dá) 抗生素組與生理鹽水組、益生菌組及益生菌干預(yù)組相比CD4、CD8表達(dá)受抑制,灰度值增大,差異有顯著性(P＜0.05);益生菌組與生理鹽水組相比CD4、CD8表達(dá)增加,灰度值比較差異有顯著性(P＜0.05);益生菌干預(yù)組與生理鹽水組相比CD4、CD8表達(dá)差異無顯著性;對照組除與抗生素組外,與其它三組相比CD4、CD8表達(dá)減少,差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論1.腸道菌群的正常定植,刺激腸道免疫系統(tǒng)的發(fā)育。2.生命的早期使用抗生素(頭孢克洛)會減弱或影響腸道菌群的正常定植,引起菌群紊亂,從而抑制腸道免疫系統(tǒng)的發(fā)育。3.益生菌(長雙歧桿菌)的干預(yù)可預(yù)防抗生素引起的菌群紊亂,維持腸道菌群的動態(tài)平衡,保護(hù)腸道免疫系統(tǒng)的正常發(fā)育。4.早期口服益生菌能增加腸道中優(yōu)勢菌的數(shù)量,促進(jìn)腸道免疫系統(tǒng)的發(fā)育成熟。
【圖文】：

圖5益生菌組正常大鼠糞便涂片，革蘭陽性桿菌多于革蘭陰性桿菌，革蘭陽性桿菌以雙歧桿菌為主，亦可見乳酸桿菌，革蘭陰性桿菌以擬桿菌為主，菌群長短不一，具有典型的兩端濃然，中間著色淺的特征。圖67d新生鼠

圖5益生菌組正常大鼠糞便涂片，革蘭陽性桿菌多于革蘭陰性桿菌，革蘭陽性桿菌以雙歧桿菌為主，亦可見乳酸桿菌，，革蘭陰性桿菌以擬桿菌為主，菌群長短不一，具有典型的兩端濃然，中間著色淺的特征。圖67d新生鼠
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R722.1

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 薛梅;鼠李糖乳桿菌LV108對免疫低下大鼠腸道菌群及代謝的影響研究[D];揚州大學(xué);2016年

本文編號：2602140