【摘要】：第一部分重慶地區(qū)呼吸道合胞病毒F和G基因變異分析(2009年-2011年) 目的在前期研究結果的基礎上進一步分析重慶地區(qū)2009-2011年度重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院急性呼吸道感染(ARTIs)住院患兒呼吸道合胞病毒的亞型流行情況,并進一步檢測呼吸道合胞病毒G基因的遺傳變異度及F蛋白在276位點的基因突變特點。 方法2009年4月至2011年3月每周一、三、五定期收集重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院呼吸科急性呼吸道感染患兒的鼻咽深部吸取物標本,采用RT-PCR方法擴增鼻咽深部吸取物標本中的RSV G蛋白和F蛋白基因并直接測序。 結果從2009年4月到2011年3月共檢測921份標本,其中hRSV感染的陽性標本有210份(22.8%),A、B兩亞型的陽性率分別為35.7%(75/210)和63.8%(134/210),A、B兩亞型共同感染的陽性率為0.5%(1/210)。通過對25例hRSV感染的陽性標本G蛋白基因的進化樹分析,發(fā)現9例A亞型陽性標本全部屬于GA2,16例B亞型陽性標本分別屬于GB2和BA株。與發(fā)達國家相比,本研究中hRSV感染在年齡分布,臨床表現和季節(jié)分布方面沒有明顯的差別。50%的hRSV感染患兒年齡在6個月以下,24.3%的hRSV感染患兒年齡在6-12個月。在隨機抽取的45份hRSV感染陽性標本中,30份為A亞型陽性標本,15份為B亞型陽性標本。通過RT-PCR的方法共檢測到17份A亞型陽性標本在F基因276位點發(fā)生了突變,陽性率為56.7%(17/30)。hRSV B亞型標本F基因276位點未發(fā)現基因突變。 結論2009-2011年hRSV仍是重慶地區(qū)兒童急性呼吸道感染的主要病原。與2009年4月-2010年11月以B亞型優(yōu)勢流行不同,在2010年11月-2011年3月A亞型毒株流行占優(yōu)勢；與2008-2009年以近年新發(fā)現的BA株流行占優(yōu)勢相比,2009-2011年BA株的流行趨勢有所下降。 第二部分20例X-連鎖無丙種球蛋白血癥的臨床特征和分子特點分析 目的X-連鎖無丙種球蛋白血癥(XLA)是Btk基因突變引起的一類常見的原發(fā)性免疫缺陷性病。XLA患者以外周血成熟B細胞顯著下降以及血清中所有免疫球蛋白濃度極度低下為特征。本研究旨在分析和探討20例X-連鎖無丙種球蛋白血癥患兒的臨床特征和分子特點。 方法2010年3月—2011年7月共20例患兒被確診為X-連鎖無丙種球蛋白血癥。本研究采用RT-PCR方法直接擴增Btk基因的cDNA, PCR產物直接雙向測序并對測序結果進行分析。突變位點通過對Btk基因的DNA外顯子的相應部位進行擴增、測序證實,并對確診患兒母親的Btk基因的DNA進行該位點的基因分析。 結果20例XLA患兒的平均起病年齡為1.5歲,平均診斷年齡為7.7歲。在20例XLA患兒的臨床表現中,呼吸道感染是最常見的臨床表現(n=18,90.0%),其他依次為中耳炎(n=15,75%)、關節(jié)炎(n=9,45%)、皮膚感染(n=3,15%)、敗血癥(n=2,10%)和皮疹(n=1,5%)。Btk基因分析在20例患兒中發(fā)現了18種不同基因突變,其中包括7種新發(fā)突變((c.134T A, c.1646TA, c.1829G, c.711GT, c.1235GA, c.523+1GA, c.1024-1025insTTGCTAAAGCAACTGCTAAAGCAAG)。11種突變?yōu)橐褕蟮劳蛔?包括8種錯義突變(c.994CT, c.1987CA, c.1885GT, c.502TC, c.1085CT, c.1816CT, c.214CT, c.1912GA)和3種無義突變(c.1267TA, c.1793CG, c.1618CT)。18例Btk基因突變中有8例位于酪氨酸激酶區(qū)(TK),4例位于Src同源區(qū)2(SH2),4例位于位于血小板-白細胞C激酶底物同源區(qū)(PH),2例位于酪氨酸激酶同源區(qū)(TH)。 結論通過對20例X-連鎖無丙種球蛋白血癥患兒臨床和分子特點分析,發(fā)現BTK基因的7個新發(fā)突變�；蚍治鲇兄赬-連鎖無丙種球蛋白血癥患兒的明確診斷,同時也有利于發(fā)現攜帶者和進行遺傳咨詢,是臨床確診XLA患者的重要工具。
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R725.1

【共引文獻】

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本文編號：2533445