【摘要】：第一部分重慶地區(qū)呼吸道合胞病毒F和G基因變異分析(2009年-2011年) 目的在前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)一步分析重慶地區(qū)2009-2011年度重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院急性呼吸道感染(ARTIs)住院患兒呼吸道合胞病毒的亞型流行情況,并進(jìn)一步檢測(cè)呼吸道合胞病毒G基因的遺傳變異度及F蛋白在276位點(diǎn)的基因突變特點(diǎn)。 方法2009年4月至2011年3月每周一、三、五定期收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科急性呼吸道感染患兒的鼻咽深部吸取物標(biāo)本,采用RT-PCR方法擴(kuò)增鼻咽深部吸取物標(biāo)本中的RSV G蛋白和F蛋白基因并直接測(cè)序。 結(jié)果從2009年4月到2011年3月共檢測(cè)921份標(biāo)本,其中hRSV感染的陽(yáng)性標(biāo)本有210份(22.8%),A、B兩亞型的陽(yáng)性率分別為35.7%(75/210)和63.8%(134/210),A、B兩亞型共同感染的陽(yáng)性率為0.5%(1/210)。通過(guò)對(duì)25例hRSV感染的陽(yáng)性標(biāo)本G蛋白基因的進(jìn)化樹(shù)分析,發(fā)現(xiàn)9例A亞型陽(yáng)性標(biāo)本全部屬于GA2,16例B亞型陽(yáng)性標(biāo)本分別屬于GB2和BA株。與發(fā)達(dá)國(guó)家相比,本研究中hRSV感染在年齡分布,臨床表現(xiàn)和季節(jié)分布方面沒(méi)有明顯的差別。50%的hRSV感染患兒年齡在6個(gè)月以下,24.3%的hRSV感染患兒年齡在6-12個(gè)月。在隨機(jī)抽取的45份hRSV感染陽(yáng)性標(biāo)本中,30份為A亞型陽(yáng)性標(biāo)本,15份為B亞型陽(yáng)性標(biāo)本。通過(guò)RT-PCR的方法共檢測(cè)到17份A亞型陽(yáng)性標(biāo)本在F基因276位點(diǎn)發(fā)生了突變,陽(yáng)性率為56.7%(17/30)。hRSV B亞型標(biāo)本F基因276位點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)基因突變。 結(jié)論2009-2011年hRSV仍是重慶地區(qū)兒童急性呼吸道感染的主要病原。與2009年4月-2010年11月以B亞型優(yōu)勢(shì)流行不同,在2010年11月-2011年3月A亞型毒株流行占優(yōu)勢(shì)；與2008-2009年以近年新發(fā)現(xiàn)的BA株流行占優(yōu)勢(shì)相比,2009-2011年BA株的流行趨勢(shì)有所下降。 第二部分20例X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥的臨床特征和分子特點(diǎn)分析 目的X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥(XLA)是Btk基因突變引起的一類(lèi)常見(jiàn)的原發(fā)性免疫缺陷性病。XLA患者以外周血成熟B細(xì)胞顯著下降以及血清中所有免疫球蛋白濃度極度低下為特征。本研究旨在分析和探討20例X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥患兒的臨床特征和分子特點(diǎn)。 方法2010年3月—2011年7月共20例患兒被確診為X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥。本研究采用RT-PCR方法直接擴(kuò)增Btk基因的cDNA, PCR產(chǎn)物直接雙向測(cè)序并對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析。突變位點(diǎn)通過(guò)對(duì)Btk基因的DNA外顯子的相應(yīng)部位進(jìn)行擴(kuò)增、測(cè)序證實(shí),并對(duì)確診患兒母親的Btk基因的DNA進(jìn)行該位點(diǎn)的基因分析。 結(jié)果20例XLA患兒的平均起病年齡為1.5歲,平均診斷年齡為7.7歲。在20例XLA患兒的臨床表現(xiàn)中,呼吸道感染是最常見(jiàn)的臨床表現(xiàn)(n=18,90.0%),其他依次為中耳炎(n=15,75%)、關(guān)節(jié)炎(n=9,45%)、皮膚感染(n=3,15%)、敗血癥(n=2,10%)和皮疹(n=1,5%)。Btk基因分析在20例患兒中發(fā)現(xiàn)了18種不同基因突變,其中包括7種新發(fā)突變((c.134T A, c.1646TA, c.1829G, c.711GT, c.1235GA, c.523+1GA, c.1024-1025insTTGCTAAAGCAACTGCTAAAGCAAG)。11種突變?yōu)橐褕?bào)道突變,包括8種錯(cuò)義突變(c.994CT, c.1987CA, c.1885GT, c.502TC, c.1085CT, c.1816CT, c.214CT, c.1912GA)和3種無(wú)義突變(c.1267TA, c.1793CG, c.1618CT)。18例Btk基因突變中有8例位于酪氨酸激酶區(qū)(TK),4例位于Src同源區(qū)2(SH2),4例位于位于血小板-白細(xì)胞C激酶底物同源區(qū)(PH),2例位于酪氨酸激酶同源區(qū)(TH)。 結(jié)論通過(guò)對(duì)20例X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥患兒臨床和分子特點(diǎn)分析,發(fā)現(xiàn)BTK基因的7個(gè)新發(fā)突變。基因分析有助于X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥患兒的明確診斷,同時(shí)也有利于發(fā)現(xiàn)攜帶者和進(jìn)行遺傳咨詢(xún),是臨床確診XLA患者的重要工具。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R725.1

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

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本文編號(hào)：2533445